| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 英文缩略词表 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-29页 |
| ·哺乳动物体细胞核移植研究进展 | 第13页 |
| ·体细胞克隆发展历程 | 第13-14页 |
| ·体细胞核移植技术的应用前景 | 第14-15页 |
| ·动物育种 | 第14页 |
| ·拯救濒危动物 | 第14-15页 |
| ·异种器官移植 | 第15页 |
| ·体细胞克隆关键技术 | 第15-19页 |
| ·供体细胞 | 第15页 |
| ·受体卵母细胞 | 第15-16页 |
| ·构建重构胚 | 第16页 |
| ·卵母细胞的去核 | 第16-17页 |
| ·融合与激活 | 第17-18页 |
| ·克隆胚胎的培养 | 第18-19页 |
| ·我国的体细胞克隆发展历程 | 第19-20页 |
| ·猪卵母细胞体外成熟研究 | 第20-24页 |
| ·影响猪卵母细胞体外成熟的生理性因素 | 第20-21页 |
| ·影响猪卵母细胞体外成熟的物理性因素 | 第21-22页 |
| ·影响猪卵母细胞体外成熟的化学性因素 | 第22-24页 |
| ·体细胞克隆技术相关机理 | 第24-25页 |
| ·供体细胞与受体卵母细胞间的相互作用 | 第24页 |
| ·供体细胞周期对发育的影响 | 第24-25页 |
| ·猪体细胞克隆相关技术途径 | 第25-28页 |
| ·供体细胞 | 第25页 |
| ·受体卵母细胞 | 第25-26页 |
| ·猪体细胞克隆胚胎的构建 | 第26页 |
| ·融合与激活 | 第26-27页 |
| ·克隆胚胎的体外培养 | 第27-28页 |
| ·研究目的与意义 | 第28-29页 |
| ·研究意义 | 第28页 |
| ·研究目的 | 第28-29页 |
| 第二章 供体细胞的制备 | 第29-34页 |
| ·材料 | 第29-30页 |
| ·材料 | 第29页 |
| ·主要试剂 | 第29页 |
| ·主要仪器 | 第29页 |
| ·实验器材 | 第29页 |
| ·主要试剂的配制 | 第29-30页 |
| ·方法 | 第30-31页 |
| ·猪胎儿的采样 | 第30页 |
| ·胎儿成纤维细胞系建立的方法 | 第30页 |
| ·细胞传代培养的方法 | 第30-31页 |
| ·细胞液氮冷冻储存方法 | 第31页 |
| ·成纤维细胞的复苏 | 第31页 |
| ·结果与分析 | 第31-32页 |
| ·讨论 | 第32-34页 |
| ·有关猪胎儿成纤维细胞的研究 | 第32-33页 |
| ·成纤维细胞的传代的研究 | 第33页 |
| ·成纤维细胞的冷冻保存的研究 | 第33-34页 |
| 第三章 猪卵母细胞体外成熟 | 第34-42页 |
| ·材料 | 第34-36页 |
| ·主要试剂 | 第34页 |
| ·主要仪器 | 第34页 |
| ·溶液配制 | 第34-36页 |
| ·方法 | 第36-37页 |
| ·猪卵母细胞的采集和体外成熟培养步骤 | 第36页 |
| ·试验设计 | 第36-37页 |
| ·结果与分析 | 第37-40页 |
| ·两种基础培养基对卵母细胞体外成熟的影响 | 第38页 |
| ·卵母细胞的体外成熟时间 | 第38-40页 |
| ·比较两种不同猪卵母细胞体外成熟培养方式 | 第40页 |
| ·猪卵母细胞体外成熟 | 第40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 体外成熟的猪卵母细胞的消化和去核 | 第42-49页 |
| ·材料 | 第42-43页 |
| ·主要试剂 | 第42页 |
| ·主要器材 | 第42-43页 |
| ·方法 | 第43-44页 |
| ·卵母细胞去除透明带 | 第43页 |
| ·无透明带卵母细胞的去核 | 第43-44页 |
| ·结果与分析 | 第44-47页 |
| ·卵母细胞的脱颗粒细胞和去除透明带 | 第44页 |
| ·不同浓度ＤＣ对体外成熟卵母细胞去核效率和显核率的影响 | 第44-45页 |
| ·Deme处理时间对显核的影响 | 第45-46页 |
| ·比较化学辅助手工去核与传统显微去核的效率 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| 第五章 手工克隆猪体细胞核移植胚胎的构建 | 第49-59页 |
| ·材料 | 第49-50页 |
| ·主要试剂 | 第49页 |
| ·仪器设备 | 第49页 |
| ·主要的溶液配制 | 第49-50页 |
| ·方法 | 第50-53页 |
| ·卵母细胞的采集和体外成熟培养 | 第50页 |
| ·受体细胞的准备 | 第50页 |
| ·供核细胞的准备 | 第50-51页 |
| ·卵母细胞去透明带 | 第51页 |
| ·切割去核 | 第51页 |
| ·细胞的融合和激活 | 第51页 |
| ·实验设计 | 第51-52页 |
| ·重构胚的体外培养 | 第52-53页 |
| ·结果与分析 | 第53-56页 |
| ·无透明带去核卵母细胞融合及重构胚判断 | 第53页 |
| ·不同电场强度对去核卵母细胞融合的影响 | 第53-54页 |
| ·不同电场时程对对去核卵母细胞融合的影响 | 第54页 |
| ·不同电脉冲次数对去核卵母细胞融合的影响 | 第54-55页 |
| ·不同去核方法对无透明带重构胚体外发育的影响 | 第55-56页 |
| ·重构胚体外发育情况 | 第56页 |
| ·讨论 | 第56-59页 |
| ·去核无透明卵母细胞电融合参数的研究 | 第56-57页 |
| ·重构胚融合激活的相关细节 | 第57-58页 |
| ·重构胚体外发育情况 | 第58-59页 |
| 第六章 结论与展望 | 第59-61页 |
| ·本研究的主要结论 | 第59页 |
| ·创新点 | 第59-60页 |
| ·工作展望 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 作者简介 | 第66页 |