| 目录 | 第1-8页 |
| 缩略词表 | 第8-10页 |
| 摘要 | 第10-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-25页 |
| 1 NDV 的分子流行病学研究进展 | 第15-17页 |
| ·ND 的流行情况 | 第15-16页 |
| ·我国 NDV 分子流行病学情况 | 第16-17页 |
| 2 NDV 分子生物学特性 | 第17-21页 |
| ·NDV 的形态结构 | 第17页 |
| ·NDV 的理化特性 | 第17页 |
| ·NDV 的基因组结构特征 | 第17-18页 |
| ·NDV 编码的主要结构蛋白 | 第18-21页 |
| 3 NDV 检测方法研究进展 | 第21-23页 |
| ·血凝试验和血凝抑制试验 | 第21页 |
| ·RT-PCR 技术 | 第21-22页 |
| ·酶联免疫吸附试验（ELISA） | 第22页 |
| ·血清中和实验（VN） | 第22-23页 |
| ·免疫胶体金技术（Immune colloidal gold technique，ICGT） | 第23页 |
| 4 ND 的防控 | 第23-25页 |
| 第二章 河南省部分地区鸡源 NDV 分子流行病学特点 | 第25-33页 |
| 1 试验材料 | 第25-26页 |
| ·病料 | 第25页 |
| ·SPF 鸡胚及红细胞制备 | 第25页 |
| ·酶及相关试剂 | 第25页 |
| ·试验仪器 | 第25-26页 |
| 2 试验方法 | 第26-28页 |
| ·病毒分离 | 第26页 |
| ·病毒的血清学鉴定 | 第26页 |
| ·病毒 RNA 提取 | 第26-27页 |
| ·病毒 F 基因扩增 | 第27-28页 |
| 3 结果 | 第28-30页 |
| ·血清学鉴定结果 | 第28页 |
| ·RT-PCR 检测结果 | 第28-29页 |
| ·分离株 F 基因遗传进化分析 | 第29页 |
| ·分离株 F 基因及氨基酸序列分析 | 第29-30页 |
| 4 讨论 | 第30-32页 |
| ·目前河南部分地区 NDV 毒株流行情况 | 第30-31页 |
| ·现行疫苗对流行毒株的保护 | 第31页 |
| ·NDV 分子流行病学监测的重要要性 | 第31-32页 |
| 5 小结 | 第32-33页 |
| 第三章 ND xx08 株 HN 基因主要抗原区的原核表达及鉴定 | 第33-55页 |
| 1 试验材料 | 第33-36页 |
| ·病毒、菌种和质粒 | 第33页 |
| ·酶及其他相关试剂 | 第33页 |
| ·主要仪器 | 第33-34页 |
| ·主要试剂配制 | 第34-35页 |
| ·SDS-PAGE 电泳缓冲液 | 第35页 |
| ·Western-blott 所用溶液 | 第35-36页 |
| ·蛋白纯化相关溶液 | 第36页 |
| 2 方法 | 第36-45页 |
| ·引物设计与合成 | 第36页 |
| ·病毒基因组 RNA 的提取 | 第36-37页 |
| ·HN 主要抗原区基因片段的 PCR 扩增 | 第37页 |
| ·PCR 产物的回收与纯化 | 第37-38页 |
| ·NDV xx08 株 HN 基因片段与 pMD18-T-vector 克隆载体连接 | 第38页 |
| ·HN 基因片段连接产物的转化 | 第38页 |
| ·重组克隆质粒的鉴定 | 第38-40页 |
| ·重组表达质粒 pET-28a-rHN | 第40-42页 |
| ·重组表达质粒在大肠杆菌中的表达 | 第42-45页 |
| 3 结果与分析 | 第45-51页 |
| ·NDV xx08 株 HN 抗原区基因片段的获得 | 第45页 |
| ·重组克隆质粒的构建及鉴定 | 第45-46页 |
| ·NDV HN 抗原区基因片段的序列分析结果 | 第46页 |
| ·重组表达质粒的构建 | 第46-48页 |
| ·表达产物的分析及鉴定 | 第48-50页 |
| ·表达产物的可溶性分析 | 第50-51页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第51页 |
| 4 讨论 | 第51-53页 |
| ·关于 NDV xx08 株 HN 主要抗原区基因片段 | 第51-52页 |
| ·关于原核表达条件的优化 | 第52页 |
| ·关于蛋白纯化 | 第52-53页 |
| 5 小结 | 第53-55页 |
| 第四章 NDV 抗体检测方法的建立 | 第55-65页 |
| 1 材料与方法 | 第55-58页 |
| ·材料 | 第55-56页 |
| ·方法 | 第56-58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-61页 |
| ·最佳抗原包被浓度及血清稀释度的确定 | 第58页 |
| ·酶标二抗工作浓度的确定 | 第58-59页 |
| ·最佳血清反应时间的确定 | 第59页 |
| ·最佳二抗反应时间的确定 | 第59页 |
| ·间接 ELISA 临界值的判定 | 第59-60页 |
| ·ELISA 方法特异性、敏感性和准确性试验 | 第60-61页 |
| ·交叉反应实验结果 | 第61页 |
| ·临床血清样品检测 | 第61页 |
| 3 讨论 | 第61-63页 |
| 4 小结 | 第63-65页 |
| 全文结论 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-77页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第77-79页 |
| 附录 | 第79-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
