| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 1 前言 | 第10-18页 |
| ·课题的提出 | 第10-11页 |
| ·植物幼年期向成年期转变的研究进展 | 第11-18页 |
| ·植物幼年期向成年期过渡的形态和生理特征变化 | 第11页 |
| ·植物幼年期向成年期过渡的分子调控机制 | 第11-18页 |
| ·MicroRNA 调控植物营养阶段转变 | 第12-13页 |
| ·内源信号分子和外源生物/非生物胁迫调控 miR156 表达控制营养阶段转变 | 第13-15页 |
| ·MicroRNA 合成与效应路径调控植物营养阶段转变 | 第15-16页 |
| ·表观遗传修饰影响植物幼年向成年过渡 | 第16页 |
| ·miR156-SPLs 调控开花 | 第16-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-33页 |
| ·试验材料 | 第18-20页 |
| ·主要仪器和设备 | 第18页 |
| ·植物材料 | 第18页 |
| ·细菌菌株与质粒载体 | 第18页 |
| ·酶及生化试剂 | 第18页 |
| ·引物序列 | 第18-20页 |
| ·试验方法 | 第20-33页 |
| ·miR156 基因家族的进化分析 | 第20页 |
| ·基因表达分析 | 第20-22页 |
| ·目的基因克隆 | 第22-26页 |
| ·烟草 miR156c 片段的获得 | 第22-23页 |
| ·mimicry156 片段的获取 | 第23页 |
| ·PCR 产物回收纯化 | 第23-24页 |
| ·目的基因连接 | 第24页 |
| ·大肠杆菌转化 | 第24页 |
| ·阳性克隆筛选与鉴定 | 第24-26页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第26页 |
| ·目的片段的双酶切 | 第26页 |
| ·目的片段与表达载体的连接 | 第26页 |
| ·烟草转基因 | 第26-29页 |
| ·农杆菌感受态细胞制备 | 第26-27页 |
| ·冻融法转化农杆菌 | 第27页 |
| ·农杆菌介导转化烟草（参考 Horsch，1985）[88] | 第27-28页 |
| ·转基因植株 PCR 检测 | 第28-29页 |
| ·靶基因预测 | 第29页 |
| ·目的基因及靶基因表达量检测 | 第29-30页 |
| ·转基因植株功能鉴定 | 第30-33页 |
| ·转基因植株表型观察 | 第30-31页 |
| ·转基因植株生理指标测定 | 第31-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-49页 |
| ·烟草 miR156 进化分析 | 第33页 |
| ·miR156 在野生型烟草 NC89 植株中的表达 | 第33-34页 |
| ·烟草 miR156c 与 mimicry156 基因克隆 | 第34-36页 |
| ·nta-miR156c 与 mimicry156 片段的获得 | 第34-36页 |
| ·植物表达载体构建 | 第36页 |
| ·转基因植株获得与鉴定 | 第36-38页 |
| ·转基因植株目的基因表达量的测定 | 第38-39页 |
| ·烟草 miR156 靶基因预测与组织表达量测定 | 第39-40页 |
| ·转基因植株表型观察 | 第40-47页 |
| ·叶片形态比较 | 第41-43页 |
| ·叶片背面表皮毛观察 | 第43-44页 |
| ·叶片表面电镜观察 | 第44-45页 |
| ·叶片侧脉观察 | 第45-46页 |
| ·转基因植物对烟草开花的影响 | 第46-47页 |
| ·转基因植株生理指标测定 | 第47-49页 |
| ·过表达和抑制 miR156 表达对叶绿素含量的影响 | 第47-48页 |
| ·转基因植株花青素含量测定 | 第48-49页 |
| 4 讨论 | 第49-53页 |
| ·烟草 miR156 表达分析 | 第49页 |
| ·miR156 调控烟草幼年向成年过渡 | 第49-50页 |
| ·miR156 时序调控烟草叶脉的发生 | 第50页 |
| ·miR156 影响烟草成花过渡 | 第50-51页 |
| ·叶脉发育和烟草发育过程转变的关系 | 第51-53页 |
| 5.结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-62页 |
| 个人简介 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
