| 致谢 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| 1. 文献综述 | 第9-20页 |
| ·目前甘薯生产的状况 | 第9-11页 |
| ·甘薯简介 | 第9页 |
| ·甘薯病毒病简介 | 第9-11页 |
| ·甘薯病毒的检测方法研究进展 | 第11-15页 |
| ·目测法 | 第11-12页 |
| ·血清学检测法 | 第12-13页 |
| ·分子生物学检测方法 | 第13-15页 |
| ·核酸杂交技术 | 第13页 |
| ·PCR技术 | 第13-14页 |
| ·其它分子生物学检测技术 | 第14-15页 |
| ·双生病毒研究进展 | 第15-20页 |
| ·双生病毒简介 | 第15-17页 |
| ·菜豆金色花叶病毒属 | 第15-16页 |
| ·玉米线条病毒属 | 第16页 |
| ·甜菜曲顶病毒属 | 第16页 |
| ·番茄伪曲顶病毒属 | 第16-17页 |
| ·双生病毒的复制转录表达及变异 | 第17-18页 |
| ·双生病毒的复制和转录 | 第17页 |
| ·双生病毒的变异 | 第17-18页 |
| ·甘薯双生病毒(SPLCV)研究进展 | 第18页 |
| ·甘薯褪绿矮化病毒(SPCSV)研究进展 | 第18-20页 |
| 引言 | 第20-21页 |
| 3. 材料与方法 | 第21-30页 |
| ·试验材料 | 第21-22页 |
| ·病毒样品 | 第21页 |
| ·质粒及菌株 | 第21页 |
| ·酶和试剂盒 | 第21页 |
| ·引物 | 第21-22页 |
| ·基本生物学方法 | 第22-27页 |
| ·植物总DNA的提取 | 第22-23页 |
| ·植物总RNA的提取 | 第23-24页 |
| ·RT-PCR | 第24页 |
| ·PCR | 第24-25页 |
| ·目的片段的胶回收和纯化 | 第25页 |
| ·目的片段与载体连接 | 第25-26页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第26页 |
| ·转化大肠杆菌 | 第26页 |
| ·质粒提取 | 第26-27页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第27页 |
| ·PCR产物序列测定 | 第27页 |
| ·PCR法制备地高辛标记探针斑点杂交检测甘薯卷叶病毒(SPLCV) | 第27-29页 |
| ·甘薯叶片总DNA提取 | 第27页 |
| ·引物设计 | 第27-28页 |
| ·PCR法制备地高辛(DIG)标记DNA探针 | 第28页 |
| ·斑点杂交方法的建立 | 第28页 |
| ·探针的特异性检测 | 第28页 |
| ·探针的灵敏性检测 | 第28页 |
| ·探针重复性和稳定性检测 | 第28-29页 |
| ·甘薯褪绿矮化病毒西非株系(SPCSV-WA)RT-LAMP检测方法的建立 | 第29-30页 |
| ·RNA提取 | 第29页 |
| ·一步法RT-LAMP检测SPCSV-WA | 第29页 |
| ·RT-LAMP产物的克隆、测序和序列分析 | 第29页 |
| ·RT-LAMP特异性分析 | 第29-30页 |
| ·几种甘薯病毒(株系)RNA体外转录产物的制备 | 第29-30页 |
| ·特异性试验 | 第30页 |
| ·RT-LAMP检测灵敏度分析 | 第30页 |
| ·SPCSV-WA RT-LAMP检测方法的应用 | 第30页 |
| 4. 结果与分析 | 第30-37页 |
| ·利用地高辛标记探针检测甘薯卷叶病毒(SPLCV)方法的建立 | 第30-32页 |
| ·DIG探针的制备获得 | 第30-31页 |
| ·探针特异性检测结果 | 第31页 |
| ·探针灵敏性检测结果 | 第31-32页 |
| ·探针稳定性和重复性检测结果 | 第32页 |
| ·SPCSV-WA RT-LAMP检测方法的建立 | 第32-37页 |
| ·一步法RT-LAMP的产物的检测 | 第32-33页 |
| ·RT-LAMP产物的基因克隆和序列分析 | 第33页 |
| ·RT-LAMP检测特异性分析 | 第33-34页 |
| ·SPCSV-WA一步法RT-LAMP检测灵敏度分析 | 第34-35页 |
| ·RT-LAMP检测方法应用 | 第35-37页 |
| 5. 讨论 | 第37-38页 |
| 6. 结论 | 第38页 |
| 参考文献 | 第38-44页 |
| ABSTRACT | 第44页 |
