摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-7页 |
第一章 引言 | 第7-13页 |
·研究背景 | 第7页 |
·化疗引起脱发的研究现状 | 第7-8页 |
·研究依据 | 第8页 |
·shh信号通路简要介绍 | 第8-10页 |
·shh信号在毛发发育中的作用 | 第10-12页 |
·研究目的及意义 | 第12-13页 |
第二章 材料与方法 | 第13-32页 |
·药品与仪器 | 第13-20页 |
·实验试剂 | 第13页 |
·抗体来源 | 第13-14页 |
·一抗 | 第13页 |
·二抗 | 第13-14页 |
·qRT-PCR引物 | 第14页 |
·仪器和设备 | 第14-15页 |
·溶液成分及配方 | 第15-20页 |
·实验材料 | 第20-21页 |
·主要实验方法 | 第21-32页 |
·小鼠拔毛 | 第21页 |
·石蜡切片 | 第21页 |
·石蜡切片HE染色 | 第21页 |
·石蜡切片的免疫荧光染色 | 第21-22页 |
·脱蜡与水洗 | 第21页 |
·抗原修复与封闭 | 第21-22页 |
·抗体的孵育与观察 | 第22页 |
·Trizol方法提取RNA与蛋白 | 第22-23页 |
·取样 | 第22页 |
·总RNA的提取 | 第22页 |
·总蛋白的提取 | 第22-23页 |
·western blot步骤 | 第23-24页 |
·蛋白的提取 | 第23页 |
·蛋白浓度的测定 | 第23页 |
·蛋白SDS-PAGE电泳 | 第23-24页 |
·转膜 | 第24页 |
·封闭与抗体的孵育 | 第24页 |
·曝光显色 | 第24页 |
·原位杂交步骤 | 第24-28页 |
·探针的制备 | 第24-26页 |
·探针的孵育 | 第26-27页 |
·地高辛抗体的孵育 | 第27页 |
·显色与观察 | 第27页 |
·封片拍照 | 第27-28页 |
·细胞培养与转染 | 第28-29页 |
·细胞的培养相关方法 | 第28-29页 |
·细胞的培养 | 第28页 |
·细胞的传代 | 第28页 |
·细胞的冻存 | 第28页 |
·细胞的复苏 | 第28-29页 |
·磷酸钙转染的相关方法 | 第29页 |
·AGS细胞的培养与药物的处理 | 第29页 |
·RNA的反转录 | 第29-30页 |
·DNA的消化 | 第29页 |
·DNase I的灭活 | 第29-30页 |
·cDNA的合成 | 第30页 |
·Real-time RT-PCR | 第30页 |
·小鼠基因型鉴定 | 第30-32页 |
·小鼠尾巴的消化及DNA的提取 | 第30-31页 |
·小鼠基因型鉴定PCR反应体系 | 第31页 |
·小鼠基因型鉴定PCR引物 | 第31-32页 |
第三章 结果与讨论 | 第32-48页 |
·实验结果 | 第32-46页 |
·化疗会引起毛囊组织损伤 | 第32-33页 |
·化疗会引起毛囊shh基因下调 | 第33-35页 |
·化疗只对shh依赖的细胞有影响 | 第35-37页 |
·补充外源shh蛋白能在一定程度上缓解CIA | 第37-39页 |
·shh也是其它引起CIA药物的靶基因 | 第39-41页 |
·shh基因的下调引起细胞增殖受阻而非p53途径 | 第41-45页 |
·N-myc和CDC25参与因shh下调而导致的细胞增殖抑制 | 第45-46页 |
·讨论 | 第46-48页 |
小结 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
个人简历 | 第54页 |