| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 目录 | 第5-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第7-20页 |
| ·左旋多巴 | 第7-14页 |
| ·左旋多巴的研究历史 | 第7-8页 |
| ·左旋多巴治疗机理 | 第8页 |
| ·左旋多巴的化学合成 | 第8-9页 |
| ·天然植物中提取左旋多巴 | 第9页 |
| ·酶法合成左旋多巴 | 第9-13页 |
| ·代谢工程策略合成左旋多巴 | 第13-14页 |
| ·左旋多巴的衍生物 | 第14-18页 |
| ·甲基多巴 | 第14-15页 |
| ·3-氧-甲基多巴 | 第15页 |
| ·卡比多巴 | 第15-16页 |
| ·左旋多巴酯 | 第16-17页 |
| ·咪唑啉酮 | 第17页 |
| ·其他左旋多巴衍生物 | 第17-18页 |
| ·本文的研究意义和主要的研究内容 | 第18-20页 |
| ·研究意义 | 第18-19页 |
| ·主要研究内容 | 第19-20页 |
| 第二章 生产多巴的大肠杆菌菌株构建 | 第20-41页 |
| ·材料及方法 | 第20-30页 |
| ·菌种及载体 | 第20页 |
| ·试剂及仪器 | 第20-21页 |
| ·主要缓冲液 | 第21-22页 |
| ·林可链霉菌培养与基因组提取 | 第22-23页 |
| ·大肠杆菌的培养与质粒提取 | 第23-24页 |
| ·lmbB2 基因克隆方法 | 第24-27页 |
| ·重组表达质粒构建方法 | 第27-28页 |
| ·诱导表达及优化 | 第28页 |
| ·Codon plus（RIL）质粒对 lmbB2 基因的作用 | 第28-29页 |
| ·左旋多巴的检测方法 | 第29-30页 |
| ·结果与分析 | 第30-39页 |
| ·lmbB2 基因的克隆 | 第30-31页 |
| ·重组质粒的构建 | 第31-32页 |
| ·表达载体的选择 | 第32-33页 |
| ·基因 lmbB2 表达的优化 | 第33-35页 |
| ·Codon plus（RIL）质粒对 lmbB2 表达的影响 | 第35-37页 |
| ·左旋多巴的鉴定 | 第37-39页 |
| ·小结 | 第39-41页 |
| 第三章 培养基优化 | 第41-54页 |
| ·材料与方法 | 第41-44页 |
| ·菌种与质粒 | 第41页 |
| ·主要试剂 | 第41页 |
| ·主要仪器 | 第41页 |
| ·培养基的选择 | 第41-42页 |
| ·酪氨酸添加实验 | 第42页 |
| ·Fe~(2+)与 H_2O_2添加实验 | 第42-43页 |
| ·抗坏血酸的添加实验 | 第43-44页 |
| ·结果与分析 | 第44-53页 |
| ·培养基的选择 | 第44-46页 |
| ·底物酪氨酸对发酵的影响 | 第46-48页 |
| ·Fe~(2+)与 H_2O_2对发酵的影响 | 第48-50页 |
| ·抗坏血酸对发酵的影响 | 第50-53页 |
| ·小结 | 第53-54页 |
| 第四章 lmbB2 基因的随机突变 | 第54-65页 |
| ·材料与方法 | 第54-56页 |
| ·菌种及载体 | 第54页 |
| ·试剂及仪器 | 第54页 |
| ·突变体系的建立 | 第54-55页 |
| ·构建突变文库 | 第55页 |
| ·菌落 PCR 验证 | 第55页 |
| ·多巴的快速检测方法 | 第55-56页 |
| ·筛选高产多巴的菌株 | 第56页 |
| ·结果与分析 | 第56-64页 |
| ·左旋多巴的快速检测方法的建立 | 第56-58页 |
| ·随即突变的筛选结果 | 第58页 |
| ·测序结果分析 | 第58-61页 |
| ·生物信息学分析 | 第61-64页 |
| ·小结 | 第64-65页 |
| 第五章 结论与展望 | 第65-67页 |
| ·结论 | 第65页 |
| ·展望 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-71页 |
| 致谢 | 第71页 |