| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-27页 |
| ·铁硫簇的结构、功能及生物合成 | 第11-18页 |
| ·铁硫簇的结构 | 第12-13页 |
| ·铁硫簇的功能 | 第13-14页 |
| ·铁硫簇的生物合成 | 第14-18页 |
| ·嗜酸硫氧化细菌硫氧化系统介绍 | 第18-25页 |
| ·嗜酸硫氧化细菌对元素硫的吸附 | 第20-21页 |
| ·元素硫的活化及转运 | 第21页 |
| ·元素硫的氧化 | 第21-25页 |
| ·课题的研究目的与研究内容 | 第25-27页 |
| ·依据和目的 | 第25-26页 |
| ·论文的主要研究内容 | 第26页 |
| ·论文课题受资助情况 | 第26-27页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第27-38页 |
| ·实验材料 | 第27-30页 |
| ·菌种 | 第27页 |
| ·培养基 | 第27-28页 |
| ·A.ferrooxidans菌基因组抽提试剂 | 第28页 |
| ·质粒提取试剂 | 第28页 |
| ·DNA回收试剂 | 第28页 |
| ·不连续体系SDS-PAGE电泳 | 第28-29页 |
| ·蛋白亲和纯化试剂 | 第29-30页 |
| ·包涵体处理液 | 第30页 |
| ·包涵体复性试剂(透析Buffer) | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-36页 |
| ·PCR扩增 | 第30-31页 |
| ·酶切PCR产物及载体pET-28a | 第31页 |
| ·载体和目的片段连接反应 | 第31-32页 |
| ·转化 | 第32页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第32页 |
| ·蛋白质表达转化 | 第32-33页 |
| ·蛋白质的条件表达 | 第33页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第33-34页 |
| ·蛋白质的纯化 | 第34-35页 |
| ·蛋白质的复性 | 第35-36页 |
| ·定点突变 | 第36页 |
| ·引物的设计 | 第36页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第36页 |
| ·突变蛋白质的表达及纯化 | 第36页 |
| ·分析方法 | 第36-38页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第36页 |
| ·紫外分光光度计(UV Scanning) | 第36-37页 |
| ·电子顺磁共振(EPR) | 第37-38页 |
| 第三章 HdrC1的克隆、表达、纯化及C27、C73定点突变 | 第38-51页 |
| ·HdrC1蛋白基因的克隆 | 第38-40页 |
| ·HdrC1蛋白基因的克隆 | 第38-39页 |
| ·HdrC1蛋白基因克隆产物和pET-28a质粒双酶切 | 第39页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第39-40页 |
| ·HdrC1蛋白的表达 | 第40-43页 |
| ·HdrC1蛋白表达条件的确定 | 第40-41页 |
| ·HdrC1大规模的表达 | 第41页 |
| ·SDS-PAGE分析HdrC1蛋白 | 第41-42页 |
| ·UV/Vis分析HdrC1蛋白 | 第42页 |
| ·电子顺磁共振波谱(EPR)分析HdrC1蛋白 | 第42-43页 |
| ·HdrC1蛋白C27、C73定点突变 | 第43-49页 |
| ·HdrC1蛋白定点突变 | 第43-45页 |
| ·突变蛋白质的表达、纯化 | 第45页 |
| ·突变蛋白质的SDS-PAGE检测 | 第45页 |
| ·UV/Vis分析突变蛋白 | 第45-46页 |
| ·电子顺磁共振波谱(EPR)分析突变体蛋白 | 第46-47页 |
| ·序列的同源对比 | 第47-48页 |
| ·HdrC1蛋白分子结构图 | 第48-49页 |
| ·本章小结 | 第49-51页 |
| 第四章 HdrC2的克隆、表达、纯化及C63、C109定点突变 | 第51-64页 |
| ·HdrC2蛋白基因的克隆 | 第51-53页 |
| ·HdrC2蛋白基因的克隆 | 第51-52页 |
| ·HdrC2蛋白基因克隆产物和pET-28a质粒双酶切 | 第52页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第52-53页 |
| ·HdrC2蛋白的表达 | 第53-56页 |
| ·HdrC2蛋白表达条件的确定 | 第53-54页 |
| ·HdrC2大规模的表达 | 第54页 |
| ·SDS-PAGE分析HdrC2蛋白 | 第54-55页 |
| ·UV/Vis分析HdrC2蛋白 | 第55-56页 |
| ·电子顺磁共振波谱(EPR)分析HdrC2蛋白 | 第56页 |
| ·HdrC2蛋白C63、C109定点突变 | 第56-62页 |
| ·HdrC2蛋白定点突变 | 第56-58页 |
| ·突变蛋白质的表达、纯化 | 第58-59页 |
| ·UV/Vis分析突变蛋白 | 第59-60页 |
| ·电子顺磁共振波谱(EPR)分析突变体蛋白 | 第60-61页 |
| ·序列的同源对比 | 第61-62页 |
| ·HdrC2蛋白分子结构图 | 第62页 |
| ·本章小结 | 第62-64页 |
| 第五章 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 研究成果 | 第74页 |
