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表皮生长因子受体调节中枢神经元内在生长活性的机制

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
英文缩略词表第11-13页
前言第13-15页
第1章 文献综述第15-33页
   ·文献综述 1第15-23页
   ·文献综述 2第23-33页
第2章 不同发育阶段脊髓组织中 EGFR 和 MTOR 的表达及相关性研究第33-47页
   ·实验材料第33-34页
     ·实验动物第33页
     ·主要仪器第33页
     ·主要试剂第33-34页
   ·实验方法第34-40页
     ·大鼠脊髓组织的取材第34页
     ·脊髓组织冰冻切片标本的制备第34-35页
     ·脊髓组织冰冻切片的免疫组织化学染色第35-36页
     ·脊髓组织总蛋白的提取及蛋白浓度的测定第36页
     ·Western-blot 检测脊髓组织中 EGFR 和 mTOR 蛋白的表达第36-37页
     ·不同发育阶段脊髓组织总 RNA 的提取及 RT-PCR 实验第37-39页
     ·统计学处理第39-40页
   ·实验结果第40-45页
     ·不同发育阶段的脊髓组织中 EGFR 和 mTOR 的表达第40-43页
     ·PI3K/Akt 信号通路在脊髓组织不同发育阶段的活化状态的检测第43页
     ·不同发育阶段的大鼠脊髓组织免疫化学染色检测 EGFR 和mTOR第43-45页
   ·实验讨论第45-46页
   ·小结第46-47页
第3章 大鼠皮质神经干细胞的培养及向神经元诱导分化第47-65页
   ·实验材料第47-48页
     ·实验动物第47页
     ·主要仪器第47页
     ·主要试剂第47-48页
   ·实验方法第48-55页
     ·神经干细胞的分离、培养、鉴定第48-49页
     ·神经干细胞向神经元诱导分化培养与鉴定第49-50页
     ·全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)促进神经元分化的实验第50页
     ·膜片钳检测诱导培养神经元的分化程度第50-55页
   ·实验结果第55-61页
     ·神经干细胞原代培养与鉴定第55页
     ·神经干细胞向神经元诱导培养与鉴定第55-57页
     ·全反式维甲酸(ATRA)促进神经干细胞向神经元分化第57-58页
     ·膜片钳检测培养的神经元分化成熟度第58-61页
   ·实验讨论第61-64页
   ·小结第64-65页
第4章 不同表达水平的 EGFR 对培养的神经元生长能力的影响及机制的探讨第65-79页
   ·实验材料第65-67页
     ·实验对象第65页
     ·主要仪器第65页
     ·主要试剂第65-66页
     ·调控 EGFR 表达的质粒、病毒及细胞株第66-67页
   ·实验方法第67-71页
     ·神经元的培养第67页
     ·慢病毒载体的制备和转导第67-69页
     ·western-blot 检测不同培养条件下神经元 tau、β-tubulin、NF、p-Akt~(S473)、p-mTOR~(S2448)蛋白的表达第69页
     ·雷帕霉素(Rapamycin)对神经元毒性实验第69-71页
   ·结果第71-77页
     ·pLEGFP-EGFR 和 vshRNA-EGFR 转染效果第71-72页
     ·雷帕霉素对培养细胞的毒性实验第72-74页
     ·体外不同 EGFR 表达水平下神经元生长能力的检测第74页
     ·雷帕霉素(Rapamycin)对体外 EGFR 过表达水平下的神经元生长能力的影响第74页
     ·Rapamycin 对 PI3K/Akt 信号通路的状态的影响第74-77页
   ·实验讨论第77-78页
   ·小结第78-79页
全文讨论第79-85页
结论第85-87页
创新点第87-89页
参考文献第89-100页
博士期间已发表的论文第100页
博士期间主持的课题第100-101页
致谢第101页

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