摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
英文缩略词表 | 第11-13页 |
前言 | 第13-15页 |
第1章 文献综述 | 第15-33页 |
·文献综述 1 | 第15-23页 |
·文献综述 2 | 第23-33页 |
第2章 不同发育阶段脊髓组织中 EGFR 和 MTOR 的表达及相关性研究 | 第33-47页 |
·实验材料 | 第33-34页 |
·实验动物 | 第33页 |
·主要仪器 | 第33页 |
·主要试剂 | 第33-34页 |
·实验方法 | 第34-40页 |
·大鼠脊髓组织的取材 | 第34页 |
·脊髓组织冰冻切片标本的制备 | 第34-35页 |
·脊髓组织冰冻切片的免疫组织化学染色 | 第35-36页 |
·脊髓组织总蛋白的提取及蛋白浓度的测定 | 第36页 |
·Western-blot 检测脊髓组织中 EGFR 和 mTOR 蛋白的表达 | 第36-37页 |
·不同发育阶段脊髓组织总 RNA 的提取及 RT-PCR 实验 | 第37-39页 |
·统计学处理 | 第39-40页 |
·实验结果 | 第40-45页 |
·不同发育阶段的脊髓组织中 EGFR 和 mTOR 的表达 | 第40-43页 |
·PI3K/Akt 信号通路在脊髓组织不同发育阶段的活化状态的检测 | 第43页 |
·不同发育阶段的大鼠脊髓组织免疫化学染色检测 EGFR 和mTOR | 第43-45页 |
·实验讨论 | 第45-46页 |
·小结 | 第46-47页 |
第3章 大鼠皮质神经干细胞的培养及向神经元诱导分化 | 第47-65页 |
·实验材料 | 第47-48页 |
·实验动物 | 第47页 |
·主要仪器 | 第47页 |
·主要试剂 | 第47-48页 |
·实验方法 | 第48-55页 |
·神经干细胞的分离、培养、鉴定 | 第48-49页 |
·神经干细胞向神经元诱导分化培养与鉴定 | 第49-50页 |
·全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)促进神经元分化的实验 | 第50页 |
·膜片钳检测诱导培养神经元的分化程度 | 第50-55页 |
·实验结果 | 第55-61页 |
·神经干细胞原代培养与鉴定 | 第55页 |
·神经干细胞向神经元诱导培养与鉴定 | 第55-57页 |
·全反式维甲酸(ATRA)促进神经干细胞向神经元分化 | 第57-58页 |
·膜片钳检测培养的神经元分化成熟度 | 第58-61页 |
·实验讨论 | 第61-64页 |
·小结 | 第64-65页 |
第4章 不同表达水平的 EGFR 对培养的神经元生长能力的影响及机制的探讨 | 第65-79页 |
·实验材料 | 第65-67页 |
·实验对象 | 第65页 |
·主要仪器 | 第65页 |
·主要试剂 | 第65-66页 |
·调控 EGFR 表达的质粒、病毒及细胞株 | 第66-67页 |
·实验方法 | 第67-71页 |
·神经元的培养 | 第67页 |
·慢病毒载体的制备和转导 | 第67-69页 |
·western-blot 检测不同培养条件下神经元 tau、β-tubulin、NF、p-Akt~(S473)、p-mTOR~(S2448)蛋白的表达 | 第69页 |
·雷帕霉素(Rapamycin)对神经元毒性实验 | 第69-71页 |
·结果 | 第71-77页 |
·pLEGFP-EGFR 和 vshRNA-EGFR 转染效果 | 第71-72页 |
·雷帕霉素对培养细胞的毒性实验 | 第72-74页 |
·体外不同 EGFR 表达水平下神经元生长能力的检测 | 第74页 |
·雷帕霉素(Rapamycin)对体外 EGFR 过表达水平下的神经元生长能力的影响 | 第74页 |
·Rapamycin 对 PI3K/Akt 信号通路的状态的影响 | 第74-77页 |
·实验讨论 | 第77-78页 |
·小结 | 第78-79页 |
全文讨论 | 第79-85页 |
结论 | 第85-87页 |
创新点 | 第87-89页 |
参考文献 | 第89-100页 |
博士期间已发表的论文 | 第100页 |
博士期间主持的课题 | 第100-101页 |
致谢 | 第101页 |