| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 英文缩略词表 | 第11-13页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 第1章 文献综述 | 第15-33页 |
| ·文献综述 1 | 第15-23页 |
| ·文献综述 2 | 第23-33页 |
| 第2章 不同发育阶段脊髓组织中 EGFR 和 MTOR 的表达及相关性研究 | 第33-47页 |
| ·实验材料 | 第33-34页 |
| ·实验动物 | 第33页 |
| ·主要仪器 | 第33页 |
| ·主要试剂 | 第33-34页 |
| ·实验方法 | 第34-40页 |
| ·大鼠脊髓组织的取材 | 第34页 |
| ·脊髓组织冰冻切片标本的制备 | 第34-35页 |
| ·脊髓组织冰冻切片的免疫组织化学染色 | 第35-36页 |
| ·脊髓组织总蛋白的提取及蛋白浓度的测定 | 第36页 |
| ·Western-blot 检测脊髓组织中 EGFR 和 mTOR 蛋白的表达 | 第36-37页 |
| ·不同发育阶段脊髓组织总 RNA 的提取及 RT-PCR 实验 | 第37-39页 |
| ·统计学处理 | 第39-40页 |
| ·实验结果 | 第40-45页 |
| ·不同发育阶段的脊髓组织中 EGFR 和 mTOR 的表达 | 第40-43页 |
| ·PI3K/Akt 信号通路在脊髓组织不同发育阶段的活化状态的检测 | 第43页 |
| ·不同发育阶段的大鼠脊髓组织免疫化学染色检测 EGFR 和mTOR | 第43-45页 |
| ·实验讨论 | 第45-46页 |
| ·小结 | 第46-47页 |
| 第3章 大鼠皮质神经干细胞的培养及向神经元诱导分化 | 第47-65页 |
| ·实验材料 | 第47-48页 |
| ·实验动物 | 第47页 |
| ·主要仪器 | 第47页 |
| ·主要试剂 | 第47-48页 |
| ·实验方法 | 第48-55页 |
| ·神经干细胞的分离、培养、鉴定 | 第48-49页 |
| ·神经干细胞向神经元诱导分化培养与鉴定 | 第49-50页 |
| ·全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)促进神经元分化的实验 | 第50页 |
| ·膜片钳检测诱导培养神经元的分化程度 | 第50-55页 |
| ·实验结果 | 第55-61页 |
| ·神经干细胞原代培养与鉴定 | 第55页 |
| ·神经干细胞向神经元诱导培养与鉴定 | 第55-57页 |
| ·全反式维甲酸(ATRA)促进神经干细胞向神经元分化 | 第57-58页 |
| ·膜片钳检测培养的神经元分化成熟度 | 第58-61页 |
| ·实验讨论 | 第61-64页 |
| ·小结 | 第64-65页 |
| 第4章 不同表达水平的 EGFR 对培养的神经元生长能力的影响及机制的探讨 | 第65-79页 |
| ·实验材料 | 第65-67页 |
| ·实验对象 | 第65页 |
| ·主要仪器 | 第65页 |
| ·主要试剂 | 第65-66页 |
| ·调控 EGFR 表达的质粒、病毒及细胞株 | 第66-67页 |
| ·实验方法 | 第67-71页 |
| ·神经元的培养 | 第67页 |
| ·慢病毒载体的制备和转导 | 第67-69页 |
| ·western-blot 检测不同培养条件下神经元 tau、β-tubulin、NF、p-Akt~(S473)、p-mTOR~(S2448)蛋白的表达 | 第69页 |
| ·雷帕霉素(Rapamycin)对神经元毒性实验 | 第69-71页 |
| ·结果 | 第71-77页 |
| ·pLEGFP-EGFR 和 vshRNA-EGFR 转染效果 | 第71-72页 |
| ·雷帕霉素对培养细胞的毒性实验 | 第72-74页 |
| ·体外不同 EGFR 表达水平下神经元生长能力的检测 | 第74页 |
| ·雷帕霉素(Rapamycin)对体外 EGFR 过表达水平下的神经元生长能力的影响 | 第74页 |
| ·Rapamycin 对 PI3K/Akt 信号通路的状态的影响 | 第74-77页 |
| ·实验讨论 | 第77-78页 |
| ·小结 | 第78-79页 |
| 全文讨论 | 第79-85页 |
| 结论 | 第85-87页 |
| 创新点 | 第87-89页 |
| 参考文献 | 第89-100页 |
| 博士期间已发表的论文 | 第100页 |
| 博士期间主持的课题 | 第100-101页 |
| 致谢 | 第101页 |