| 目录 | 第1-7页 |
| 中文摘要 | 第7-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 缩略词表 | 第13-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-32页 |
| ·植物抗旱性研究 | 第15-20页 |
| ·干旱对植物造成的影响 | 第15-16页 |
| ·植物抗干旱生理机制 | 第16-19页 |
| ·植物抗干旱分子生物学机制 | 第19-20页 |
| ·气孔运动研究 | 第20-29页 |
| ·气孔与植物抗旱 | 第21-22页 |
| ·钙离子与气孔运动 | 第22-23页 |
| ·ABA与气孔运动 | 第23-27页 |
| ·离子通道与气孔运动 | 第27-29页 |
| ·膜片钳技术在离子通道研究中的应用 | 第29-31页 |
| ·立题依据与研究内容 | 第31-32页 |
| 第二章 AtNRGA1功能研究与机理分析 | 第32-77页 |
| ·引言 | 第32-33页 |
| ·实验材料 | 第33-34页 |
| ·植物材料 | 第33页 |
| ·主要试剂 | 第33页 |
| ·主要载体和菌株 | 第33-34页 |
| ·实验方法 | 第34-54页 |
| ·植物材料种植 | 第34页 |
| ·质粒小量提取(碱法) | 第34-35页 |
| ·大肠杆菌(DH5α)感受态的制备和转化 | 第35-36页 |
| ·农杆菌感受态的制备和转化 | 第36-37页 |
| ·酵母感受态的制备和转化 | 第37-39页 |
| ·植物基因组DNA提取 | 第39-40页 |
| ·植物总RNA提取和反转录 | 第40-41页 |
| ·NRGA1序列分析 | 第41页 |
| ·N-RGA1丙酮酸转运体(MPC)活性检测 | 第41-42页 |
| ·T-DNA插入突变体nrga1鉴定 | 第42-44页 |
| ·NRGA1过表达和功能恢复株系获得 | 第44-46页 |
| ·生理性状实验 | 第46-47页 |
| ·电生理学实验 | 第47-50页 |
| ·NRGA1表达模式分析 | 第50-51页 |
| ·NRGA1亚细胞定位 | 第51-54页 |
| ·结果与分析 | 第54-73页 |
| ·NRGA1具有丙酮酸转运体(MPC)保守序列 | 第54-56页 |
| ·NRGA1具有丙酮酸转运体(MPC)活性 | 第56-58页 |
| ·T-DNA插入突变体nrga1为有效缺失突变体 | 第58-59页 |
| ·nrga1突变体对ABA的作用过敏感,提高植物抗旱能力 | 第59-63页 |
| ·NRGA1过表达对ABA调控气孔运动弱敏感,抗旱能力降低 | 第63-69页 |
| ·NRGA1表达模式 | 第69-72页 |
| ·NRGA1定位于线粒体 | 第72-73页 |
| ·讨论 | 第73-77页 |
| ·NRGA1具有丙酮酸转运体活性 | 第74页 |
| ·NRGA1在ABA调控气孔运动中起到负调控作用 | 第74-77页 |
| 第三章 AtGPK1参与气孔运动的功能研究与机理分析 | 第77-104页 |
| ·引言 | 第77-80页 |
| ·实验材料 | 第80-81页 |
| ·植物材料 | 第80-81页 |
| ·主要试剂 | 第81页 |
| ·载体和菌株 | 第81页 |
| ·实验方法 | 第81-85页 |
| ·植物材料种植 | 第81页 |
| ·常用分子生物学方法 | 第81页 |
| ·GPK1 T-DNA插入突变体鉴定 | 第81-82页 |
| ·GPK1过表达和功能恢复株系获得 | 第82页 |
| ·生理性状实验 | 第82页 |
| ·电生理学实验 | 第82页 |
| ·GPK1表达模式分析 | 第82页 |
| ·GPK1亚细胞定位 | 第82-83页 |
| ·GPK1原核表达蛋白和纯化 | 第83-85页 |
| ·GPK1钙依赖激酶活性验证 | 第85页 |
| ·结果与分析 | 第85-101页 |
| ·GPK1具有保守的钙依赖蛋白激酶结构域 | 第85-86页 |
| ·GPK1具有钙依赖的激酶活性 | 第86-88页 |
| ·GPK1定位于细胞膜 | 第88-89页 |
| ·GPK1在保卫细胞表达量很高 | 第89-90页 |
| ·T-DNA插入突变体gpk1-1,gpk1-2为有效突变体 | 第90-91页 |
| ·gpk1-1和gpkl-2对ABA调控气孔运动过敏感,提高植物抗旱能力 | 第91-96页 |
| ·GPK1过表达对ABA调控气孔运动和离子通道弱敏感 | 第96-101页 |
| ·讨论 | 第101-104页 |
| ·GPK1具有钙依赖的蛋白激酶活性 | 第101页 |
| ·GPK1在植物保卫细胞中大量表达 | 第101-102页 |
| ·GPK1参与ABA调控气孔运动过程 | 第102页 |
| ·GPK1影响了离子通道活性 | 第102-104页 |
| 第四章 酵母双杂交方法筛选到GPK1可能的互作蛋白GIP1及其功能研究 | 第104-121页 |
| ·引言 | 第104-106页 |
| ·实验材料 | 第106页 |
| ·植物材料 | 第106页 |
| ·主要试剂 | 第106页 |
| ·载体和菌株 | 第106页 |
| ·实验方法 | 第106-113页 |
| ·植物材料种植 | 第106页 |
| ·常用分子生物学方法 | 第106页 |
| ·BAIT载体构建和3AT浓度筛选 | 第106-108页 |
| ·转化酵母文库筛选互作蛋白 | 第108-109页 |
| ·互作性分析和确定互作蛋白 | 第109-110页 |
| ·GIP1原核表达和纯化 | 第110-112页 |
| ·GIP1对GPK1激酶活性的调控实验 | 第112页 |
| ·GIP1 Promoter+GUS载体构建和GUS染色分析 | 第112页 |
| ·GIP1亚细胞定位及与GPK1共定位 | 第112页 |
| ·GIP1过表达载体构建和过表达株系筛选 | 第112-113页 |
| ·GIP1过表达株系气孔运动实验 | 第113页 |
| ·结果和分析 | 第113-119页 |
| ·GPK1 bait载体构建和筛选3AT浓度 | 第113-114页 |
| ·筛选酵母文库和互作性分析 | 第114-115页 |
| ·GIP1原核表达和纯化 | 第115-116页 |
| ·GIP1抑制GPK1激酶活性 | 第116页 |
| ·GIP1与GPK1在亚细胞水平存在共定位 | 第116-117页 |
| ·GIP1过表达株系对ABA促进气孔关闭过程过敏感 | 第117-119页 |
| ·讨论 | 第119-121页 |
| ·GIP1是GPK1可能的互作蛋白 | 第119页 |
| ·GIP1在体外抑制了GPK1的激酶活性 | 第119页 |
| ·GIP1过表达株系在ABA促进气孔关闭过程中过敏感 | 第119-121页 |
| 总结 | 第121-123页 |
| 参考文献 | 第123-134页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第134-135页 |
| 致谢 | 第135页 |
