摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-14页 |
缩略词表 | 第14-15页 |
第一章 肿瘤治疗的研究进展 | 第15-25页 |
·前言 | 第15-23页 |
·抗体治疗肿瘤相关 | 第15-16页 |
·Avastin | 第16页 |
·杆状病毒表达载体系统(Baculovirus Expression Vector System, BEVS) | 第16-17页 |
·AAV 简介 | 第17-23页 |
·实验设计方案及课题内容 | 第23-25页 |
·本课题的研究目的和意义 | 第23-24页 |
·本课题的研究内容 | 第24-25页 |
第二章 单双链带有 EGFP 重组杆状病毒的生产 | 第25-48页 |
·实验器材 | 第25-28页 |
·实验材料 | 第25页 |
·实验仪器 | 第25-26页 |
·实验试剂 | 第26-28页 |
·实验方法 | 第28-38页 |
·pABVN-EF1a-EGFP 菌株的鉴定 | 第28-30页 |
·dspABVN-EF1a-EGFP 菌株的构建及鉴定 | 第30-31页 |
·单双链带有 EGFP 的 Bacmid 的获得 | 第31-33页 |
·单双链带有 EGFP 的重组杆状病毒的包装及检测 | 第33-36页 |
·重组杆状病毒 ABPM8、ABVNM-EF1a-EGFP 和 dsABVNM-EF1a-EGFP 的滴度测定 | 第36-38页 |
·实验结果 | 第38-46页 |
·pABVN-EF1a-EGFP 的酶切鉴定结果 | 第38-40页 |
·dspABVN-EF1a-EGFP 的鉴定结果 | 第40-42页 |
·ITR 部分的 PCR 检测结果 | 第42页 |
·转座重组的鉴定结果 | 第42-43页 |
·重组杆状病毒转染及扩增结果 | 第43-44页 |
·重组杆状病毒滴度结果 | 第44-46页 |
·讨论 | 第46-47页 |
·小结 | 第47-48页 |
第三章 rAAV8-EGFP 的生产、纯化、鉴定 | 第48-57页 |
·实验器材 | 第48-50页 |
·实验材料 | 第48页 |
·实验仪器 | 第48页 |
·实验试剂 | 第48-50页 |
·试验方法 | 第50-54页 |
·cap 基因表达的 Western Blot 检测 | 第50-52页 |
·ssrAAV8-EGFP/scrAAV8-EGFP 病毒的生产 | 第52页 |
·ssrAAV8-EGFP/scrAAV8-EGFP 病毒的纯化 | 第52-53页 |
·ssrAAV8-EGFP/scrAAV8-EGFP 病毒活力的检测 | 第53-54页 |
·实验结果 | 第54-56页 |
·重组杆状病毒 ABPM8 cap 基因表达的 Western blot 检测 | 第54页 |
·rAAV8-EGFP 的荧光表达 | 第54-55页 |
·rAAV8-EGFP 的活力检测 | 第55-56页 |
·讨论 | 第56页 |
·小结 | 第56-57页 |
第四章 dspABVNM-EF1a-AT7 载体的构建及 scrAAV8 的包装鉴定 | 第57-77页 |
·实验器材 | 第57-58页 |
·材料与试剂 | 第57页 |
·仪器与设备 | 第57页 |
·试剂的配制 | 第57-58页 |
·试验方法 | 第58-66页 |
·dspABVNM-EF1a-AT7 的载体构建 | 第58-62页 |
·dspABVNM-EF1a-AT7 重组杆状病毒的生产、检测 | 第62-64页 |
·scrAAV8-AT7 病毒的生产纯化 | 第64-65页 |
·纯化后 dsrAAV8-AT7 病毒滴度的检测 | 第65页 |
·dsrAAV8-AT7 病毒活力的检测 | 第65-66页 |
·实验结果 | 第66-75页 |
·dspABVN-EF1a-AT7 质粒的构建 | 第66-71页 |
·转座重组的鉴定 | 第71页 |
·重组杆状病毒 dsABVNM-EF1a-AT7 的鉴定 | 第71-72页 |
·重组杆状病毒 dsABVNM-EF1a-AT7 的滴度检测 | 第72-73页 |
·纯化的 scrAAV8-AT7 的滴度检测 | 第73-75页 |
·Avastin 表达的 Western Blot 检测 | 第75页 |
·Avastin 表达量的 ELISA 检测 | 第75页 |
·讨论 | 第75-76页 |
·小结 | 第76-77页 |
结论 | 第77-79页 |
参考文献 | 第79-84页 |
致谢 | 第84页 |