| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-14页 |
| 缩略词表 | 第14-15页 |
| 第一章 肿瘤治疗的研究进展 | 第15-25页 |
| ·前言 | 第15-23页 |
| ·抗体治疗肿瘤相关 | 第15-16页 |
| ·Avastin | 第16页 |
| ·杆状病毒表达载体系统(Baculovirus Expression Vector System, BEVS) | 第16-17页 |
| ·AAV 简介 | 第17-23页 |
| ·实验设计方案及课题内容 | 第23-25页 |
| ·本课题的研究目的和意义 | 第23-24页 |
| ·本课题的研究内容 | 第24-25页 |
| 第二章 单双链带有 EGFP 重组杆状病毒的生产 | 第25-48页 |
| ·实验器材 | 第25-28页 |
| ·实验材料 | 第25页 |
| ·实验仪器 | 第25-26页 |
| ·实验试剂 | 第26-28页 |
| ·实验方法 | 第28-38页 |
| ·pABVN-EF1a-EGFP 菌株的鉴定 | 第28-30页 |
| ·dspABVN-EF1a-EGFP 菌株的构建及鉴定 | 第30-31页 |
| ·单双链带有 EGFP 的 Bacmid 的获得 | 第31-33页 |
| ·单双链带有 EGFP 的重组杆状病毒的包装及检测 | 第33-36页 |
| ·重组杆状病毒 ABPM8、ABVNM-EF1a-EGFP 和 dsABVNM-EF1a-EGFP 的滴度测定 | 第36-38页 |
| ·实验结果 | 第38-46页 |
| ·pABVN-EF1a-EGFP 的酶切鉴定结果 | 第38-40页 |
| ·dspABVN-EF1a-EGFP 的鉴定结果 | 第40-42页 |
| ·ITR 部分的 PCR 检测结果 | 第42页 |
| ·转座重组的鉴定结果 | 第42-43页 |
| ·重组杆状病毒转染及扩增结果 | 第43-44页 |
| ·重组杆状病毒滴度结果 | 第44-46页 |
| ·讨论 | 第46-47页 |
| ·小结 | 第47-48页 |
| 第三章 rAAV8-EGFP 的生产、纯化、鉴定 | 第48-57页 |
| ·实验器材 | 第48-50页 |
| ·实验材料 | 第48页 |
| ·实验仪器 | 第48页 |
| ·实验试剂 | 第48-50页 |
| ·试验方法 | 第50-54页 |
| ·cap 基因表达的 Western Blot 检测 | 第50-52页 |
| ·ssrAAV8-EGFP/scrAAV8-EGFP 病毒的生产 | 第52页 |
| ·ssrAAV8-EGFP/scrAAV8-EGFP 病毒的纯化 | 第52-53页 |
| ·ssrAAV8-EGFP/scrAAV8-EGFP 病毒活力的检测 | 第53-54页 |
| ·实验结果 | 第54-56页 |
| ·重组杆状病毒 ABPM8 cap 基因表达的 Western blot 检测 | 第54页 |
| ·rAAV8-EGFP 的荧光表达 | 第54-55页 |
| ·rAAV8-EGFP 的活力检测 | 第55-56页 |
| ·讨论 | 第56页 |
| ·小结 | 第56-57页 |
| 第四章 dspABVNM-EF1a-AT7 载体的构建及 scrAAV8 的包装鉴定 | 第57-77页 |
| ·实验器材 | 第57-58页 |
| ·材料与试剂 | 第57页 |
| ·仪器与设备 | 第57页 |
| ·试剂的配制 | 第57-58页 |
| ·试验方法 | 第58-66页 |
| ·dspABVNM-EF1a-AT7 的载体构建 | 第58-62页 |
| ·dspABVNM-EF1a-AT7 重组杆状病毒的生产、检测 | 第62-64页 |
| ·scrAAV8-AT7 病毒的生产纯化 | 第64-65页 |
| ·纯化后 dsrAAV8-AT7 病毒滴度的检测 | 第65页 |
| ·dsrAAV8-AT7 病毒活力的检测 | 第65-66页 |
| ·实验结果 | 第66-75页 |
| ·dspABVN-EF1a-AT7 质粒的构建 | 第66-71页 |
| ·转座重组的鉴定 | 第71页 |
| ·重组杆状病毒 dsABVNM-EF1a-AT7 的鉴定 | 第71-72页 |
| ·重组杆状病毒 dsABVNM-EF1a-AT7 的滴度检测 | 第72-73页 |
| ·纯化的 scrAAV8-AT7 的滴度检测 | 第73-75页 |
| ·Avastin 表达的 Western Blot 检测 | 第75页 |
| ·Avastin 表达量的 ELISA 检测 | 第75页 |
| ·讨论 | 第75-76页 |
| ·小结 | 第76-77页 |
| 结论 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-84页 |
| 致谢 | 第84页 |