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利用杆状病毒系统生产携带抗体表达基因的双链AAV的研究

摘要第1-9页
Abstract第9-14页
缩略词表第14-15页
第一章 肿瘤治疗的研究进展第15-25页
   ·前言第15-23页
     ·抗体治疗肿瘤相关第15-16页
     ·Avastin第16页
     ·杆状病毒表达载体系统(Baculovirus Expression Vector System, BEVS)第16-17页
     ·AAV 简介第17-23页
   ·实验设计方案及课题内容第23-25页
     ·本课题的研究目的和意义第23-24页
     ·本课题的研究内容第24-25页
第二章 单双链带有 EGFP 重组杆状病毒的生产第25-48页
   ·实验器材第25-28页
     ·实验材料第25页
     ·实验仪器第25-26页
     ·实验试剂第26-28页
   ·实验方法第28-38页
     ·pABVN-EF1a-EGFP 菌株的鉴定第28-30页
     ·dspABVN-EF1a-EGFP 菌株的构建及鉴定第30-31页
     ·单双链带有 EGFP 的 Bacmid 的获得第31-33页
     ·单双链带有 EGFP 的重组杆状病毒的包装及检测第33-36页
     ·重组杆状病毒 ABPM8、ABVNM-EF1a-EGFP 和 dsABVNM-EF1a-EGFP 的滴度测定第36-38页
   ·实验结果第38-46页
     ·pABVN-EF1a-EGFP 的酶切鉴定结果第38-40页
     ·dspABVN-EF1a-EGFP 的鉴定结果第40-42页
     ·ITR 部分的 PCR 检测结果第42页
     ·转座重组的鉴定结果第42-43页
     ·重组杆状病毒转染及扩增结果第43-44页
     ·重组杆状病毒滴度结果第44-46页
   ·讨论第46-47页
   ·小结第47-48页
第三章 rAAV8-EGFP 的生产、纯化、鉴定第48-57页
   ·实验器材第48-50页
     ·实验材料第48页
     ·实验仪器第48页
     ·实验试剂第48-50页
   ·试验方法第50-54页
     ·cap 基因表达的 Western Blot 检测第50-52页
     ·ssrAAV8-EGFP/scrAAV8-EGFP 病毒的生产第52页
     ·ssrAAV8-EGFP/scrAAV8-EGFP 病毒的纯化第52-53页
     ·ssrAAV8-EGFP/scrAAV8-EGFP 病毒活力的检测第53-54页
   ·实验结果第54-56页
     ·重组杆状病毒 ABPM8 cap 基因表达的 Western blot 检测第54页
     ·rAAV8-EGFP 的荧光表达第54-55页
     ·rAAV8-EGFP 的活力检测第55-56页
   ·讨论第56页
   ·小结第56-57页
第四章 dspABVNM-EF1a-AT7 载体的构建及 scrAAV8 的包装鉴定第57-77页
   ·实验器材第57-58页
     ·材料与试剂第57页
     ·仪器与设备第57页
     ·试剂的配制第57-58页
   ·试验方法第58-66页
     ·dspABVNM-EF1a-AT7 的载体构建第58-62页
     ·dspABVNM-EF1a-AT7 重组杆状病毒的生产、检测第62-64页
     ·scrAAV8-AT7 病毒的生产纯化第64-65页
     ·纯化后 dsrAAV8-AT7 病毒滴度的检测第65页
     ·dsrAAV8-AT7 病毒活力的检测第65-66页
   ·实验结果第66-75页
     ·dspABVN-EF1a-AT7 质粒的构建第66-71页
     ·转座重组的鉴定第71页
     ·重组杆状病毒 dsABVNM-EF1a-AT7 的鉴定第71-72页
     ·重组杆状病毒 dsABVNM-EF1a-AT7 的滴度检测第72-73页
     ·纯化的 scrAAV8-AT7 的滴度检测第73-75页
     ·Avastin 表达的 Western Blot 检测第75页
     ·Avastin 表达量的 ELISA 检测第75页
   ·讨论第75-76页
   ·小结第76-77页
结论第77-79页
参考文献第79-84页
致谢第84页

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