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猪STMN1基因在肌肉生长发育中功能的初步研究

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-12页
縮略语表第12-14页
1 文献综述第14-23页
   ·肌肉的生长发育第14-18页
     ·肌细胞发育相关的基因第14-16页
     ·肌细胞生长相关研究进展第16-18页
   ·STMN1基因概述及其功能研究第18-22页
     ·STMN1基因的结构第18-19页
     ·STMN1基因与细胞周期第19页
     ·STMN1基因的功能第19-22页
   ·研究目的与意义第22-23页
2 实验材料与方法第23-40页
   ·实验材料第23-27页
     ·试验样品与细胞及载体第23页
     ·主要试剂与试剂盒第23-25页
     ·主要试剂和缓冲液配制第25-26页
     ·主要仪器设备第26-27页
     ·分子生物学软件与生物信息学网站第27页
   ·试验方法第27-40页
     ·猪STMN1基因近端启动子生物信息学分析第27-28页
     ·猪STMN1基因的克隆及SNPs寻找第28-31页
     ·真核表达载体pcDNA3.1-STMN1的构建第31-33页
     ·干扰片段的设计与合成第33页
     ·细胞分化实验第33-35页
     ·细胞增殖实验第35-36页
     ·Western Blot检测STMN1基因对C2C12细胞影响后Ki67蛋白的表达量第36-39页
     ·统计分析方法第39-40页
3 结果与分析第40-57页
   ·生物信息学分析STMN1基因第40-44页
     ·生物信息学对STMN1基因近端启动子区域预测第40-42页
     ·生物信息学对STMN1基因近端启动子区域CpG岛预测第42页
     ·生物信息学分析STMN1基因在不同物种中的亲缘关系第42-44页
   ·对猪STMN1基因启动子和3'UTR区域的克隆及SNPs寻找第44-45页
     ·克隆不同猪种STMN1基因启动子区域第44页
     ·克隆不同猪种STMN1基因3'UTR区域第44-45页
     ·对不同猪种STMN1基因的启动子及3'UTR区域的SNPs寻找第45页
   ·真核表达载体pcDNA3.1-STMN1的构建与干扰片段的合成第45-48页
     ·猪肌肉组织RNA的提取第45-46页
     ·猪STMN1基因的CDs扩增及真核表达载体pcDNA3.1-STMN1双酶切鉴定第46-47页
     ·干扰片段siRNA的筛选第47-48页
   ·猪STMN1基因对C2C12细胞的分化作用第48-54页
     ·C2C12细胞不同时期的分化效果第48-49页
     ·C2C12细胞的转染效率分析第49-51页
     ·猪STMN1基因对C2C12细胞分化的影响第51-54页
   ·猪STMN1基因对C2C12细胞增殖的影响第54-57页
     ·罗氏ARCE仪器实时检测上调/下调STMN1基因表达后C2C12细胞数目第54-55页
     ·上调/下调STMN1基因对细胞增殖影响数据分析结果第55-56页
     ·Western blot检测上调/下调STMN1基因的表达对C2C12细胞增殖的影响第56-57页
4 讨论第57-62页
   ·实验设计第57页
   ·试验方法第57-59页
     ·细胞转染方法的选择与改进第57-58页
     ·实验仪器的选择第58-59页
   ·猪STMN1基因启动子区域潜在SNPs的可靠性第59页
   ·转染后的效果分析第59页
   ·猪STMN1基因对C2C12细胞分化的作用第59-60页
   ·猪STMN1基因对C2C12细胞增殖的影响第60-61页
   ·后续的工作计划第61-62页
结论第62-63页
参考文献第63-73页
附录一第73-74页
附录二第74-79页
致谢第79-80页

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