摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
縮略语表 | 第12-14页 |
1 文献综述 | 第14-23页 |
·肌肉的生长发育 | 第14-18页 |
·肌细胞发育相关的基因 | 第14-16页 |
·肌细胞生长相关研究进展 | 第16-18页 |
·STMN1基因概述及其功能研究 | 第18-22页 |
·STMN1基因的结构 | 第18-19页 |
·STMN1基因与细胞周期 | 第19页 |
·STMN1基因的功能 | 第19-22页 |
·研究目的与意义 | 第22-23页 |
2 实验材料与方法 | 第23-40页 |
·实验材料 | 第23-27页 |
·试验样品与细胞及载体 | 第23页 |
·主要试剂与试剂盒 | 第23-25页 |
·主要试剂和缓冲液配制 | 第25-26页 |
·主要仪器设备 | 第26-27页 |
·分子生物学软件与生物信息学网站 | 第27页 |
·试验方法 | 第27-40页 |
·猪STMN1基因近端启动子生物信息学分析 | 第27-28页 |
·猪STMN1基因的克隆及SNPs寻找 | 第28-31页 |
·真核表达载体pcDNA3.1-STMN1的构建 | 第31-33页 |
·干扰片段的设计与合成 | 第33页 |
·细胞分化实验 | 第33-35页 |
·细胞增殖实验 | 第35-36页 |
·Western Blot检测STMN1基因对C2C12细胞影响后Ki67蛋白的表达量 | 第36-39页 |
·统计分析方法 | 第39-40页 |
3 结果与分析 | 第40-57页 |
·生物信息学分析STMN1基因 | 第40-44页 |
·生物信息学对STMN1基因近端启动子区域预测 | 第40-42页 |
·生物信息学对STMN1基因近端启动子区域CpG岛预测 | 第42页 |
·生物信息学分析STMN1基因在不同物种中的亲缘关系 | 第42-44页 |
·对猪STMN1基因启动子和3'UTR区域的克隆及SNPs寻找 | 第44-45页 |
·克隆不同猪种STMN1基因启动子区域 | 第44页 |
·克隆不同猪种STMN1基因3'UTR区域 | 第44-45页 |
·对不同猪种STMN1基因的启动子及3'UTR区域的SNPs寻找 | 第45页 |
·真核表达载体pcDNA3.1-STMN1的构建与干扰片段的合成 | 第45-48页 |
·猪肌肉组织RNA的提取 | 第45-46页 |
·猪STMN1基因的CDs扩增及真核表达载体pcDNA3.1-STMN1双酶切鉴定 | 第46-47页 |
·干扰片段siRNA的筛选 | 第47-48页 |
·猪STMN1基因对C2C12细胞的分化作用 | 第48-54页 |
·C2C12细胞不同时期的分化效果 | 第48-49页 |
·C2C12细胞的转染效率分析 | 第49-51页 |
·猪STMN1基因对C2C12细胞分化的影响 | 第51-54页 |
·猪STMN1基因对C2C12细胞增殖的影响 | 第54-57页 |
·罗氏ARCE仪器实时检测上调/下调STMN1基因表达后C2C12细胞数目 | 第54-55页 |
·上调/下调STMN1基因对细胞增殖影响数据分析结果 | 第55-56页 |
·Western blot检测上调/下调STMN1基因的表达对C2C12细胞增殖的影响 | 第56-57页 |
4 讨论 | 第57-62页 |
·实验设计 | 第57页 |
·试验方法 | 第57-59页 |
·细胞转染方法的选择与改进 | 第57-58页 |
·实验仪器的选择 | 第58-59页 |
·猪STMN1基因启动子区域潜在SNPs的可靠性 | 第59页 |
·转染后的效果分析 | 第59页 |
·猪STMN1基因对C2C12细胞分化的作用 | 第59-60页 |
·猪STMN1基因对C2C12细胞增殖的影响 | 第60-61页 |
·后续的工作计划 | 第61-62页 |
结论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-73页 |
附录一 | 第73-74页 |
附录二 | 第74-79页 |
致谢 | 第79-80页 |