| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 縮略语表 | 第12-13页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-21页 |
| 1 我国奶水牛发展现状及同期发情技术应用 | 第13页 |
| 2 褪黑激素对生殖系统的调控作用 | 第13-16页 |
| ·褪黑激素对性腺轴的调控作用 | 第13-14页 |
| ·褪黑激素对卵巢功能的调节作用 | 第14-15页 |
| ·褪黑激素的其他作用 | 第15页 |
| ·褪黑激素受体研究进展 | 第15-16页 |
| 3 颗粒细胞对卵泡的作用 | 第16-18页 |
| ·颗粒细胞对卵泡发育的调节 | 第16-17页 |
| ·颗粒细胞对卵泡闭锁的调节 | 第17-18页 |
| 4 生长抑素基因疫苗免疫及其研究进展 | 第18-21页 |
| ·我国生猪发展现状及生长抑素DNA疫苗的研究进展 | 第18-19页 |
| ·提高SS基因疫苗的免疫效果 | 第19-20页 |
| ·基因疫苗的免疫方式 | 第19-20页 |
| ·皮内注射法 | 第19页 |
| ·粘膜免疫法 | 第19页 |
| ·肌肉注射法 | 第19页 |
| ·电转化法 | 第19-20页 |
| ·其他免疫方式 | 第20页 |
| ·基因疫苗的免疫剂量和免疫次数 | 第20页 |
| ·基因疫苗的安全性和应用前景 | 第20-21页 |
| 第二部分 实验研究 | 第21-55页 |
| 一、褪黑激素对水牛颗粒细胞的调节 | 第21-39页 |
| 1 试验材料 | 第21-25页 |
| ·试验细胞 | 第21页 |
| ·主要实验试剂及耗材 | 第21-22页 |
| ·实验主要试剂盒 | 第22-23页 |
| ·实验主要抗体 | 第23页 |
| ·实验引物设计列表 | 第23页 |
| ·实验主要仪器 | 第23-24页 |
| ·实验主要试剂的配制 | 第24-25页 |
| 2 实验方法 | 第25-32页 |
| ·水牛颗粒细胞的分离与培养 | 第25-26页 |
| ·褪黑激素受体在水牛颗粒细胞表达的检测 | 第26-28页 |
| ·颗粒细胞总RNA的提取及cDNA第一链合成 | 第26-28页 |
| ·PCR扩增MT受体基因 | 第28页 |
| ·外源添加MLT处理水牛颗粒细胞 | 第28页 |
| ·水牛颗粒细胞用MLT处理后相关基因表达分析 | 第28-29页 |
| ·颗粒细胞用MLT处理后采用流式技术检测细胞的凋亡 | 第29页 |
| ·颗粒细胞用MLT处理后采用流式技术检测细胞的周期 | 第29-30页 |
| ·颗粒细胞用MLT处理后采用ELISA检测雌、孕激素浓度 | 第30-31页 |
| ·颗粒细胞用MLT处理后凋亡和周期调控因子的蛋白印迹检测 | 第31-32页 |
| ·水牛颗粒细胞总蛋白的提取 | 第31页 |
| ·水牛颗粒细胞总蛋白含量的测定 | 第31页 |
| ·SDS-PAGE电泳及蛋白成像 | 第31-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-36页 |
| ·褪黑激素受体在水牛颗粒细胞表达的检测 | 第32-33页 |
| ·水牛颗粒细胞用MLT处理后相关基因表达、细胞凋亡周期及激素内分泌的影响 | 第33-36页 |
| ·颗粒细胞在mRNA水平相关受体基因表达量的变化 | 第33页 |
| ·颗粒细胞用MLT处理后类固醇激素分泌量的检测 | 第33-34页 |
| ·颗粒细胞用MLT处理后对细胞凋亡和周期的影响及相关调控因子在蛋白水平的表达量 | 第34-36页 |
| 4 讨论 | 第36-39页 |
| 二、生长抑素基因疫苗免疫程序及安全性研究 | 第39-55页 |
| 1 试验材料 | 第39-42页 |
| ·试验动物 | 第39页 |
| ·试验质粒菌种 | 第39-40页 |
| ·主要实验试剂及耗材 | 第40页 |
| ·主要仪器设备 | 第40-41页 |
| ·实验引物设计列表 | 第41页 |
| ·主要试剂配制 | 第41-42页 |
| 2 试验方法 | 第42-46页 |
| ·质粒的小量提取 | 第42页 |
| ·质粒的酶切鉴定 | 第42-43页 |
| ·质粒的大量提取 | 第43-44页 |
| ·实验分组及免疫程序 | 第44页 |
| ·称重记录、血样采集和肌肉、脂肪组织的样品采集 | 第44页 |
| ·抗体检测 | 第44-45页 |
| ·激素测定 | 第45页 |
| ·组织DNA的提取 | 第45-46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-52页 |
| ·质粒的酶切鉴定 | 第46-47页 |
| ·试验猪不同阶段血浆中CST,GH,SS激素的分泌量 | 第47-50页 |
| ·皮质抑素水平 | 第47-48页 |
| ·生长激素水平 | 第48-49页 |
| ·生长抑素水平 | 第49-50页 |
| ·试验猪的免疫应答反应及免疫后抗体水平变化 | 第50-51页 |
| ·免疫后猪日增重 | 第51-52页 |
| ·安全性检测 | 第52页 |
| 4 讨论 | 第52-55页 |
| ·生长抑素DNA疫苗不同免疫方式和免疫剂量的效果评价 | 第52-54页 |
| ·生长抑素DNA疫苗的安全性检测 | 第54-55页 |
| 全文结论 | 第55-56页 |
| 创新与不足 | 第56-57页 |
| 创新之处 | 第56页 |
| 不足之处 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
