目录 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-11页 |
Abstract | 第11-15页 |
第一部分 文献综述 | 第15-36页 |
1 新一代测序技术 | 第15-17页 |
·新一代测序技术概况 | 第15页 |
·新一代测序技术在植物研究中的应用 | 第15-17页 |
·转录组测序 | 第15-16页 |
·数字基因表达谱测序 | 第16-17页 |
2 植物中 MYB 转录因子研究进展 | 第17-25页 |
·植物 MYB 蛋白结构与分类 | 第18-19页 |
·MYB 基因的起源与进化 | 第19-20页 |
·MYB 基因的功能多样性 | 第20-25页 |
·调控植物的初级与次级代谢 | 第20-21页 |
·控制细胞形态和决定细胞命运 | 第21-23页 |
·控制植物发育 | 第23页 |
·影响生物和非生物胁迫 | 第23-25页 |
·MYB 转录因子在调控网络中的作用 | 第25页 |
3 植物启动子研究概况 | 第25-32页 |
·植物启动子的结构特征 | 第26-27页 |
·植物启动子的研究进展 | 第27-32页 |
·组成型启动子的研究 | 第27-28页 |
·组织特异性启动子的研究 | 第28-29页 |
·诱导型启动子的研究 | 第29-32页 |
·植物启动子展望 | 第32页 |
4 研究目的、意义及实验设计 | 第32-36页 |
·研究目的和意义 | 第32-33页 |
·研究目标和研究内容 | 第33-35页 |
·研究目标 | 第33页 |
·研究内容 | 第33-35页 |
·研究技术路线 | 第35-36页 |
第二部分 实验论文 | 第36-145页 |
第一章 绒毛白蜡基因表达谱测序与分析 | 第36-65页 |
·试验材料 | 第36-37页 |
·植物材料 | 第36页 |
·试剂与仪器 | 第36-37页 |
·实验方法 | 第37-40页 |
·绒毛白蜡 RNA 样品的提取及检测 | 第37-38页 |
·基因表达谱测序 | 第38页 |
·测序结果分析 | 第38-39页 |
·基因表达谱测序结果验证 | 第39-40页 |
·实验结果与分析 | 第40-54页 |
·绒毛白蜡 RNA 提取 | 第40-41页 |
·原始测序数据统计 | 第41-42页 |
·饱和度分析 | 第42-43页 |
·随机性分析 | 第43页 |
·差异表达基因的聚类分析 | 第43-44页 |
·差异表达基因的分布特征 | 第44-45页 |
·差异表达基因的 GO 分类 | 第45-47页 |
·差异表达基因的功能分析 | 第47-50页 |
·KEEG 代谢通路分析 | 第50页 |
·盐调节基因的筛选 | 第50-53页 |
·差异表达基因的荧光定量 PCR 检测 | 第53-54页 |
·讨论 | 第54-65页 |
第二章 绒毛白蜡 MYB 基因的克隆及功能分析 | 第65-124页 |
·实验材料 | 第65-68页 |
·植物材料、载体及菌种 | 第65-66页 |
·酶和试剂 | 第66-67页 |
·主要仪器 | 第67页 |
·溶液及培养基 | 第67-68页 |
·实验方法 | 第68-84页 |
·绒毛白蜡基因组 DNA 提取 | 第68-69页 |
·CTAB 法提取绒毛白蜡总 RNA | 第69页 |
·反转录 cDNA 第一链的合成 | 第69-70页 |
·RACE 方法克隆基因及序列分析 | 第70-73页 |
·半定量 RT-PCR 分析基因表达模式 | 第73-75页 |
·基因枪法进行亚细胞定位 | 第75-76页 |
·酵母转录激活验证 | 第76-77页 |
·原核表达 | 第77-80页 |
·植物表达载体构建、烟草转化及检测 | 第80-82页 |
·转基因烟草胁迫相关基因的表达分析 | 第82页 |
·转基因烟草的耐盐性实验 | 第82-84页 |
·实验结果与分析 | 第84-118页 |
·绒毛白蜡 RNA 的提取 | 第84页 |
·FvMYB1、FvMYB2 基因的克隆及序列分析 | 第84-94页 |
·FvMYB1、FvMYB2 基因的表达分析 | 第94-96页 |
·FvMYB1、FvMYB2 基因的亚细胞定位分析 | 第96-99页 |
·FvMYB1、FvMYB2 基因酵母转录活性分析 | 第99-102页 |
·FvMYB1、FvMYB2 基因的原核诱导表达 | 第102-106页 |
·FvMYB1、FvMYB2 基因植物表达载体的构建 | 第106-108页 |
·烟草的遗传转化及检测 | 第108-113页 |
·转基因植株中胁迫应答基因的表达分析 | 第113-114页 |
·转基因植株的耐盐性分析 | 第114-118页 |
·讨论 | 第118-124页 |
·绒毛白蜡 2 个 MYB 基因的结构特点 | 第118-119页 |
·绒毛白蜡 MYB 基因的表达模式分析 | 第119-121页 |
·绒毛白蜡 MYB 基因转录激活活性的分析 | 第121-122页 |
·绒毛白蜡 MYB 基因的亚细胞定位 | 第122页 |
·FvMYB1、FvMYB2 调节植物耐盐性的可能机制 | 第122-124页 |
第三章 FvMYB1 和 FvMYB2 启动子克隆及表达研究 | 第124-145页 |
·实验材料 | 第124-126页 |
·植物材料 | 第124页 |
·菌株及质粒 | 第124页 |
·试剂 | 第124-125页 |
·引物序列 | 第125-126页 |
·实验方法 | 第126-130页 |
·基因组 DNA 的提取 | 第126页 |
·染色体步移文库的构建 | 第126-129页 |
·启动子序列验证 | 第129页 |
·启动子序列的生物信息学分析 | 第129页 |
·启动子不同缺失区段的表达载体构建 | 第129-130页 |
·重组质粒的农杆菌转化 | 第130页 |
·烟草遗传转化 | 第130页 |
·转基因烟草的检测 | 第130页 |
·GUS 组织化学染色 | 第130页 |
·结果与分析 | 第130-142页 |
·绒毛白蜡基因组 DNA 的提取及酶切 | 第130-131页 |
·绒毛白蜡 FvMYB1 和 FvMYB2 基因启动子的克隆 | 第131-132页 |
·FvMYB1 和 FvMYB2 基因启动子序列的验证 | 第132-133页 |
·FvMYB1 和 FvMYB2 基因启动子序列分析 | 第133-136页 |
·启动子不同缺失区段的载体构建 | 第136-138页 |
·不同缺失区段启动子载体的酶切验证 | 第138-139页 |
·转基因烟草的鉴定 | 第139-140页 |
·转基因植株的 GUS 染色 | 第140-142页 |
·讨论 | 第142-145页 |
·启动子序列的克隆与序列分析 | 第142-143页 |
·盐胁迫下启动子功能分析 | 第143-145页 |
总结 | 第145-147页 |
参考文献 | 第147-173页 |
攻读博士期间发表论文与申请专利 | 第173-174页 |
参与的科研课题 | 第174-175页 |
致谢 | 第175页 |