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绒毛白蜡表达谱分析及MYB基因的克隆和功能研究

目录第1-8页
摘要第8-11页
Abstract第11-15页
第一部分 文献综述第15-36页
 1 新一代测序技术第15-17页
   ·新一代测序技术概况第15页
   ·新一代测序技术在植物研究中的应用第15-17页
     ·转录组测序第15-16页
     ·数字基因表达谱测序第16-17页
 2 植物中 MYB 转录因子研究进展第17-25页
   ·植物 MYB 蛋白结构与分类第18-19页
   ·MYB 基因的起源与进化第19-20页
   ·MYB 基因的功能多样性第20-25页
     ·调控植物的初级与次级代谢第20-21页
     ·控制细胞形态和决定细胞命运第21-23页
     ·控制植物发育第23页
     ·影响生物和非生物胁迫第23-25页
   ·MYB 转录因子在调控网络中的作用第25页
 3 植物启动子研究概况第25-32页
   ·植物启动子的结构特征第26-27页
   ·植物启动子的研究进展第27-32页
     ·组成型启动子的研究第27-28页
     ·组织特异性启动子的研究第28-29页
     ·诱导型启动子的研究第29-32页
   ·植物启动子展望第32页
 4 研究目的、意义及实验设计第32-36页
   ·研究目的和意义第32-33页
   ·研究目标和研究内容第33-35页
     ·研究目标第33页
     ·研究内容第33-35页
   ·研究技术路线第35-36页
第二部分 实验论文第36-145页
 第一章 绒毛白蜡基因表达谱测序与分析第36-65页
   ·试验材料第36-37页
     ·植物材料第36页
     ·试剂与仪器第36-37页
   ·实验方法第37-40页
     ·绒毛白蜡 RNA 样品的提取及检测第37-38页
     ·基因表达谱测序第38页
     ·测序结果分析第38-39页
     ·基因表达谱测序结果验证第39-40页
   ·实验结果与分析第40-54页
     ·绒毛白蜡 RNA 提取第40-41页
     ·原始测序数据统计第41-42页
     ·饱和度分析第42-43页
     ·随机性分析第43页
     ·差异表达基因的聚类分析第43-44页
     ·差异表达基因的分布特征第44-45页
     ·差异表达基因的 GO 分类第45-47页
     ·差异表达基因的功能分析第47-50页
     ·KEEG 代谢通路分析第50页
     ·盐调节基因的筛选第50-53页
     ·差异表达基因的荧光定量 PCR 检测第53-54页
   ·讨论第54-65页
 第二章 绒毛白蜡 MYB 基因的克隆及功能分析第65-124页
   ·实验材料第65-68页
     ·植物材料、载体及菌种第65-66页
     ·酶和试剂第66-67页
     ·主要仪器第67页
     ·溶液及培养基第67-68页
   ·实验方法第68-84页
     ·绒毛白蜡基因组 DNA 提取第68-69页
     ·CTAB 法提取绒毛白蜡总 RNA第69页
     ·反转录 cDNA 第一链的合成第69-70页
     ·RACE 方法克隆基因及序列分析第70-73页
     ·半定量 RT-PCR 分析基因表达模式第73-75页
     ·基因枪法进行亚细胞定位第75-76页
     ·酵母转录激活验证第76-77页
     ·原核表达第77-80页
     ·植物表达载体构建、烟草转化及检测第80-82页
     ·转基因烟草胁迫相关基因的表达分析第82页
     ·转基因烟草的耐盐性实验第82-84页
   ·实验结果与分析第84-118页
     ·绒毛白蜡 RNA 的提取第84页
     ·FvMYB1、FvMYB2 基因的克隆及序列分析第84-94页
     ·FvMYB1、FvMYB2 基因的表达分析第94-96页
     ·FvMYB1、FvMYB2 基因的亚细胞定位分析第96-99页
     ·FvMYB1、FvMYB2 基因酵母转录活性分析第99-102页
     ·FvMYB1、FvMYB2 基因的原核诱导表达第102-106页
     ·FvMYB1、FvMYB2 基因植物表达载体的构建第106-108页
     ·烟草的遗传转化及检测第108-113页
     ·转基因植株中胁迫应答基因的表达分析第113-114页
     ·转基因植株的耐盐性分析第114-118页
   ·讨论第118-124页
     ·绒毛白蜡 2 个 MYB 基因的结构特点第118-119页
     ·绒毛白蜡 MYB 基因的表达模式分析第119-121页
     ·绒毛白蜡 MYB 基因转录激活活性的分析第121-122页
     ·绒毛白蜡 MYB 基因的亚细胞定位第122页
     ·FvMYB1、FvMYB2 调节植物耐盐性的可能机制第122-124页
 第三章 FvMYB1 和 FvMYB2 启动子克隆及表达研究第124-145页
   ·实验材料第124-126页
     ·植物材料第124页
     ·菌株及质粒第124页
     ·试剂第124-125页
     ·引物序列第125-126页
   ·实验方法第126-130页
     ·基因组 DNA 的提取第126页
     ·染色体步移文库的构建第126-129页
     ·启动子序列验证第129页
     ·启动子序列的生物信息学分析第129页
     ·启动子不同缺失区段的表达载体构建第129-130页
     ·重组质粒的农杆菌转化第130页
     ·烟草遗传转化第130页
     ·转基因烟草的检测第130页
     ·GUS 组织化学染色第130页
   ·结果与分析第130-142页
     ·绒毛白蜡基因组 DNA 的提取及酶切第130-131页
     ·绒毛白蜡 FvMYB1 和 FvMYB2 基因启动子的克隆第131-132页
     ·FvMYB1 和 FvMYB2 基因启动子序列的验证第132-133页
     ·FvMYB1 和 FvMYB2 基因启动子序列分析第133-136页
     ·启动子不同缺失区段的载体构建第136-138页
     ·不同缺失区段启动子载体的酶切验证第138-139页
     ·转基因烟草的鉴定第139-140页
     ·转基因植株的 GUS 染色第140-142页
   ·讨论第142-145页
     ·启动子序列的克隆与序列分析第142-143页
     ·盐胁迫下启动子功能分析第143-145页
总结第145-147页
参考文献第147-173页
攻读博士期间发表论文与申请专利第173-174页
参与的科研课题第174-175页
致谢第175页

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