摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-12页 |
第一章 引言 | 第12-49页 |
第一节 细胞迁移中的细胞骨架 | 第12-24页 |
·细胞迁移 | 第12-13页 |
·细胞迁移中的微丝 | 第13-18页 |
·微管在细胞迁移的作用 | 第18-24页 |
第二节 中性粒细胞 | 第24-34页 |
·中性粒细胞的产生和释放 | 第24-26页 |
·中性粒细胞募集到炎症部位的过程及调控 | 第26-32页 |
·中性粒细胞杀菌机制 | 第32-34页 |
第三节 Hsp70/Hsp90 Organizing Protein(HOP)简述 | 第34-40页 |
·HOP的发现和遗传学信息 | 第34-36页 |
·HOP调节Hsp90和Hsp70活性 | 第36-37页 |
·HOP的TPR及其他功能性结构域 | 第37-39页 |
·HOP的其他生物学功能 | 第39-40页 |
第四节 S-谷光甘肽化简述 | 第40-49页 |
·S-谷光甘肽化 | 第40-44页 |
·Grx(glutaredoxin) | 第44-47页 |
·S-谷光甘肽化调节的细胞活动 | 第47-49页 |
第二章 HOP调节血管内皮细胞迁移 | 第49-73页 |
第一节 材料、试剂与方法 | 第49-60页 |
·本章所用细胞系 | 第49-50页 |
·本章所用的抗体 | 第50页 |
·本章所用主要药品试剂 | 第50-51页 |
·本章用仪器设备 | 第51页 |
·本章所用质粒及构建 | 第51-53页 |
·shRNA的构建 | 第53-54页 |
·质粒转染 | 第54-55页 |
·siRNA的转染 | 第55页 |
·免疫杂交(Western blotting) | 第55-56页 |
·融合蛋白GST-HOP的诱导表达 | 第56页 |
·免疫共沉淀 | 第56-57页 |
·GST-pulldown | 第57页 |
·免疫荧光染色实验 | 第57页 |
·SRB检测细胞增殖 | 第57-58页 |
·AnnexinⅤ检测细胞凋亡 | 第58页 |
·细胞划痕愈合实验 | 第58页 |
·Transwell细胞迁移实验 | 第58-59页 |
·血管内皮细胞体外成管实验 | 第59页 |
·三维毛细血管出芽形成实验 | 第59-60页 |
·细胞极化实验 | 第60页 |
·活细胞膜皱褶实验 | 第60页 |
第二节 本章实验结果 | 第60-73页 |
·HOP促进体外血管内皮细胞成管和毛细血管出芽 | 第60-62页 |
·敲减HOP不影响血管内皮细胞增殖或凋亡速率 | 第62-64页 |
·HOP对血管内皮细胞迁移很重要 | 第64-66页 |
·HOP调节迁移细胞极性和膜皱褶动态性 | 第66-68页 |
·HOP与微管共定位,并与微管蛋白相互作用 | 第68-70页 |
·胞外HOP不影响血管内皮细胞迁移或体外成管 | 第70-73页 |
第三章 谷胱甘肽化调控中性粒细胞的actin动态性 | 第73-97页 |
第一节 材料与方法 | 第74-79页 |
·实验动物 | 第74页 |
·培养和分化HL60细胞 | 第74页 |
·中性粒细胞分离 | 第74-75页 |
·细胞裂解和谷光甘肽化的免疫杂交 | 第75页 |
·EZ-taxiscan趋化实验 | 第75-76页 |
·分析细胞运动轨迹和形态 | 第76-77页 |
·HL60细胞系中野生型和突变型actin的表达 | 第77页 |
·细胞皱褶(极化)实验 | 第77-78页 |
·体外吞噬作用实验 | 第78页 |
·腹膜炎模型体内噬菌作用 | 第78页 |
·¨中性粒细胞继承性移植 | 第78-79页 |
·Luminol化学发光法来测量ROS | 第79页 |
·Wright-Giemsa染色 | 第79页 |
第二节 本章实验结果 | 第79-97页 |
·ROS提升被刺激的中性粒细胞actin谷光甘肽化水平 | 第79-80页 |
·ROS和谷光甘肽化蛋白在趋化中的中性粒细胞的定位 | 第80-81页 |
·ROS的清除导致F-actin总量明显增高 | 第81-82页 |
·过表达Grx1对actin动态性和趋化的影响 | 第82-83页 |
·干扰Grx1修复清除ROS引起的中性粒细胞趋化缺陷 | 第83-86页 |
·Grx1是actin动态性的关键生理调节因子 | 第86-92页 |
·Grx1的敲除削弱腹膜炎鼠的中性粒细胞募集和杀菌能力 | 第92-97页 |
第四章 结论与展望 | 第97-101页 |
第一节 HOP在细胞迁移中的作用 | 第97-98页 |
第二节 谷光甘肽化修饰对actin动态性的调控 | 第98-101页 |
参考文献 | 第101-112页 |
致谢 | 第112-114页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第114页 |
个人简历 | 第114页 |
在学期间发表的学术论文 | 第114页 |