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IRF-1调控IFP35表达及抑制BFV复制作用机制初探

摘要第1-7页
Abstract第7-9页
目录第9-13页
第一章 引言第13-44页
 第一节 泡沫病毒第13-21页
     ·泡沫病毒的基本生物学特征第13-15页
     ·泡沫病毒的基因表达调控第15-20页
       ·泡沫病毒反式激活因子Tas概述第16-19页
       ·泡沫病毒基因表达时序模型第19-20页
     ·泡沫病毒的宿主范围及致病性第20-21页
 第二节 病毒及其诱导的先天免疫应答第21-42页
     ·病毒诱导干扰素和炎症因子产生的机制第22-35页
       ·宿主模式识别受体(PRR)介导的信号通路第22-25页
       ·干扰素调节因子家族(IRFs)第25-32页
         ·IRF-1概述第25-29页
           ·IRF-1的表达及活性调节第25-27页
           ·IRF-1与病毒的相互作用第27-28页
           ·IRF-1的其他功能第28-29页
         ·IRF-2概述第29-30页
         ·其他IRFs概述第30-32页
       ·细胞的NF-κB信号通路第32-35页
         ·NF-κB信号通路概述第32-33页
         ·NF-κB的经典和非经典通路第33-35页
     ·干扰素的抗病毒活性第35-38页
       ·干扰素介导ISGs产生的信号通路第35-37页
       ·干扰素诱导蛋白(ISGs)第37-38页
     ·泡沫病毒与宿主先天免疫系统第38-39页
       ·FV与NF-κB信号通路第38页
       ·FV与干扰素第38-39页
       ·FV与干扰素诱导蛋白第39页
     ·IFP35概述第39-41页
       ·IFP35的结构与主要功能第39-40页
       ·IFP35的表达调控第40-41页
       ·IFP35具有抑制BFV复制的作用第41页
     ·小结第41-42页
 第三节 本研究的目的和意义第42-44页
     ·本研究的前期基础第42页
     ·本研究的目的和意义第42-44页
第二章 材料与方法第44-57页
 第一节 实验材料第44-46页
     ·细胞第44页
     ·菌株第44页
     ·质粒第44-46页
     ·主要试剂第46页
 第二节 实验方法第46-57页
     ·基因操作第46-48页
     ·蛋白的表达纯化第48-49页
     ·细胞培养第49页
     ·细胞转染第49页
     ·蛋白质SDS-PAGE电泳第49-50页
     ·Western Blot第50页
     ·荧光素酶活性测定第50-51页
     ·BFV指示细胞系分析第51页
     ·5'-cDNA末端快速扩增分析第51页
     ·染色质免疫共沉淀第51-53页
     ·电泳迁移率阻滞实验第53-54页
     ·RNA提取及反转录第54-56页
     ·实时定量PCR第56-57页
第三章 结果第57-93页
 第一节 IRF-1介导干扰素对IFP35的诱导表达第57-80页
     ·IFP35转录起始位点及启动子活性分析第57-59页
     ·Ⅰ型和Ⅱ型干扰素通过ISRE激活了IFP35的启动子第59-63页
       ·ISRE介导了Ⅰ型干扰素对IFP35启动子的激活第59-61页
       ·ISRE介导了Ⅱ型干扰素对IFP35启动子的激活第61-63页
     ·IRF-1通过ISRE激活了IFP35的表达第63-67页
       ·IRF-1可以激活IFP35的启动子第63-66页
       ·IRF-1通过ISRE激活IFP35的表达第66-67页
     ·IRF-1参与了Ⅰ型干扰素对IFP35的激活第67-69页
     ·IRF-1参与了Ⅱ型干扰素对IFP35的激活第69-75页
       ·IFN-γ对IFP35的激活需要IRF-1第69-71页
       ·在IFN-γ的刺激下,IRF-1可以结合在IFP35的启动子上第71-72页
       ·IFN-γ通过STAT-1/IRF-1通路激活IFP35的表达第72-75页
     ·IRF-1参与了NIK对IFP35的激活第75-78页
     ·IRF-2、组成活化型的IRF-3及IRF-7可以激活IFP35的表达第78-80页
 第二节 IRF-1抑制BFV复制第80-93页
     ·BFV感染可诱导IRF-1表达第81-84页
       ·BFV感染导致IRF-1表达上调第81-82页
       ·BTas通过NF-κB通路激活IRF-1的表达第82-84页
     ·IRF-1抑制BFV复制第84-93页
       ·IRF-1可抑制BFV复制第84-87页
       ·IRF-1可抑制BFV基因的转录第87-90页
       ·IRF-1抑制BFV复制效应基因初探第90-93页
第四章 讨论第93-99页
 第一节 IFP35表达调控及其与BFV感染的关系第93-96页
     ·IFP35启动子顺式作用元件分析第93-94页
     ·IRFs激活IFP35的表达分析第94-95页
     ·BFV感染不影响HeLa细胞内源IFP35表达的可能原因第95-96页
 第二节 IRF-1与BFV感染的博弈第96-99页
     ·BFV激活IRF-1表达第96页
     ·IRF-1在宿主抑制BFV复制中的贡献第96-99页
第五章 结论与展望第99-102页
 第一节 结论第99-100页
 第二节 展望第100-102页
参考文献第102-115页
致谢第115-116页
附录1 英文缩写第116-119页
附录2 个人简历第119-120页
附录3 在学期间发表的论文与研究成果第120页

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