中文摘要 | 第1-13页 |
Abstract | 第13-16页 |
1 前言 | 第16-40页 |
·植物矮化突变与激素的关系 | 第16-36页 |
·赤霉素(Gibberellin acids, GAs) | 第16-25页 |
·油菜素类固醇(Brassinosteroids, BRs) | 第25-29页 |
·生长素 | 第29-31页 |
·转录因子基因 | 第31-36页 |
·植物类病斑坏死突变研究进展 | 第36-39页 |
·植物类病变坏死突变形成机制 | 第36-37页 |
·植物中类病变坏死突变基因 | 第37-39页 |
·研究目的意义 | 第39-40页 |
2 材料与方法 | 第40-56页 |
·实验材料 | 第40-42页 |
·植物材料 | 第40页 |
·酶及各种分子生物试剂 | 第40页 |
·菌株及载体 | 第40页 |
·培养基、营养液及试剂配制 | 第40-42页 |
·实验方法 | 第42-56页 |
·材料种植 | 第42页 |
·表型鉴定 | 第42页 |
·组织学分析 | 第42页 |
·矮秆突变体对外源激素响应试验 | 第42-43页 |
·玉米基因组 DNA 提取 | 第43-44页 |
·PCR 程序 | 第44页 |
·Dt 候选基因的克隆和序列分析 | 第44-45页 |
·nec-t 候选基因的克隆和序列分析 | 第45-46页 |
·RNA 提取 | 第46-47页 |
·RT-PCR 和 Real-Time PCR | 第47-48页 |
·RNA 原位杂交 | 第48-51页 |
·质粒提取 | 第51页 |
·转化载体的构建 | 第51-53页 |
·Dt 蛋白的亚细胞定位 | 第53-54页 |
·农杆菌感受态细胞的制备 | 第54-55页 |
·农杆菌的转化 | 第55页 |
·转基因检测 | 第55-56页 |
3 结果与分析 | 第56-85页 |
·显性矮秆突变体的表型分析 | 第56-58页 |
·显性矮秆突变体的株型 | 第56-57页 |
·矮秆突变体夹角变化 | 第57页 |
·矮秆突变体生育期延迟 | 第57-58页 |
·矮秆突变体细胞组织学分析 | 第58-59页 |
·矮秆突变体对外源植物激素的响应 | 第59-62页 |
·矮秆突变体对外源赤霉素(GA3)的响应 | 第59-60页 |
·矮秆突变体对外源油菜素内酯(BL)的响应 | 第60-62页 |
·矮秆突变体对外源生长素(IAA)的响应 | 第62页 |
·显性矮秆突变基因 Dt 的精细定位 | 第62-63页 |
·候选基因的筛选和克隆分析 | 第63-64页 |
·候选基因的筛选 | 第63-64页 |
·候选基因的克隆分析 | 第64页 |
·Dt 基因的核酸和蛋白的分析 | 第64-66页 |
·Dt 基因的系统进化分析 | 第66-67页 |
·Dt 基因的表达模式分析 | 第67-69页 |
·RNA 的提取及 cDNA 反转录 | 第67-68页 |
·Dt 基因的 RT-PCR 和 Real-Time PCR | 第68-69页 |
·Dt 基因的 RNA 原位杂交分析 | 第69-70页 |
·探针的合成 | 第69页 |
·Dt 基因在茎顶端分生组织表达模式 | 第69-70页 |
·Dt 基因的亚细胞定位 | 第70-72页 |
·Dt 蛋白核定位信号预测 | 第70页 |
·Dt-GFP 融合表达载体构建 | 第70-71页 |
·洋葱表皮亚细胞定位 | 第71-72页 |
·Dt 基因的 RNAi 功能分析 | 第72-74页 |
·RNAi 干涉表达载体的构建 | 第72-73页 |
·RNA 干涉表达载体的转化 | 第73页 |
·转基因植株 PCR 检测及表型 | 第73-74页 |
·Dt 基因的过量表达分析 | 第74-76页 |
·Dt 基因过量表达载体构建 | 第74-75页 |
·Dt 过量表达载体转化及转基因检测 | 第75-76页 |
·Dt 基因功能互补表达载体构建及转化 | 第76-77页 |
·Dt-MYC 载体的构建 | 第77-78页 |
·赤霉素(GA)合成基因的表达分析 | 第78-80页 |
·黄化坏死突变体 nec-t 的表型 | 第80-81页 |
·黄花坏死突变候选基因 nec-t 的克隆分析 | 第81-83页 |
·nec-t 候选基因系统进化分析 | 第83-84页 |
·nec-t 基因的表达模式 | 第84-85页 |
4 讨论 | 第85-89页 |
·玉米矮秆基因 Dt | 第85-87页 |
·Dt 基因调控 GA 合成途径 | 第85页 |
·Dt 基因的表达模式 | 第85-86页 |
·Dt 蛋白属于 OVATE 基因家族 | 第86页 |
·Dt 基因通过调控 ZmKS 基因的表达控制株高 | 第86-87页 |
·矮秆突变体在农业上的应用 | 第87页 |
·黄花坏死基因 nec-t | 第87-89页 |
·黄化坏死突变体 nec-t 的表型 | 第87-88页 |
·坏死突变基因 nec-t 的表达及功能分析 | 第88-89页 |
5 全文结论 | 第89-91页 |
·矮秆突变体属 GA 缺陷型突变体 | 第89页 |
·矮秆基因 Dt 属于 OVATE 转录因子家族 | 第89页 |
·矮秆基因 Dt 的时空表达分析 | 第89-90页 |
·矮秆基因 Dt 的功能验证 | 第90页 |
·黄化坏死突变基因 | 第90-91页 |
参考文献 | 第91-102页 |
附录 | 第102-104页 |
致谢 | 第104-105页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第105页 |