| 符号说明 | 第1-10页 |
| 中文摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-15页 |
| 1 前言 | 第15-27页 |
| ·低温胁迫对植物光合作用的影响 | 第15-20页 |
| ·低温胁迫导致 PSII 的光抑制 | 第16-18页 |
| ·低温胁迫导致 PSI 的光抑制 | 第18-20页 |
| ·低温胁迫对植物碳代谢的影响 | 第20-21页 |
| ·黄体素的简介 | 第21-24页 |
| ·黄体素的分子结构 | 第21页 |
| ·黄体素的生物合成途径 | 第21-23页 |
| ·黄体素的分布与在光合膜上的定位 | 第23-24页 |
| ·黄体素的生理功能和研究进展 | 第24-25页 |
| ·黄体素参与天线色素蛋白复合物的组装以及稳定其结构 | 第24页 |
| ·黄体素为吸收光能的辅助色素 | 第24页 |
| ·黄体素耗散过量激发能，防御光破坏 | 第24-25页 |
| ·黄体素清除自由基和抗氧化作用 | 第25页 |
| ·影响黄体素水平的因子 | 第25-26页 |
| ·本研究的目的、意义 | 第26-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-48页 |
| ·实验材料 | 第27-28页 |
| ·植物材料 | 第27页 |
| ·材料处理 | 第27页 |
| ·菌株与质粒 | 第27页 |
| ·酶及生化试剂 | 第27-28页 |
| ·PCR 引物 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-48页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第28-29页 |
| ·反转录 cDNA 第一条链的合成 | 第29-30页 |
| ·PCR 扩增 | 第30页 |
| ·Quantitative real-time PCR 体系及反应条件 | 第30页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第30-35页 |
| ·正义表达载体的构建 | 第30-31页 |
| ·连接 | 第31页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第31页 |
| ·转化及克隆筛选 | 第31-32页 |
| ·碱法小量提取质粒 DNA | 第32页 |
| ·质粒 DNA 的酶切鉴定 | 第32-33页 |
| ·回收 | 第33页 |
| ·DNA 序列测定 | 第33页 |
| ·根癌农杆菌 LBA4404 感受态细胞的制备与转化 | 第33-34页 |
| ·利用农杆菌介导转化烟草 | 第34-35页 |
| ·转基因烟草植株的 PCR 检测 | 第35-36页 |
| ·CTAB 微量法提取基因组 DNA | 第35页 |
| ·转基因植株的 PCR 筛选 | 第35-36页 |
| ·番茄类囊体膜抗坏血酸过氧化物酶的原核表达及 Western 杂交 | 第36-41页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第36页 |
| ·E.coli BL21 原核表达的诱导 | 第36页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第36-37页 |
| ·抗体的制备 | 第37-38页 |
| ·抗血清效价的测定 | 第38页 |
| ·Western 杂交 | 第38-41页 |
| ·类胡萝卜素ε-羟化酶的叶绿体定位 | 第41-43页 |
| ·转基因烟草生理指标的测定 | 第43-48页 |
| ·叶黄素循环色素组分分析 | 第43页 |
| ·光合气体交换参数的测定 | 第43-44页 |
| ·叶绿素荧光参数测定 | 第44页 |
| ·P700 的 820nm 光吸收 | 第44页 |
| ·H_2O_2和 O_2~(.-) 的测定 | 第44页 |
| ·膜脂过氧化程度分析 | 第44页 |
| ·APX 酶活性测定 | 第44-45页 |
| ·CAT 酶活性的测定 | 第45页 |
| ·DAB，NBT 和台盼蓝染色分析 | 第45页 |
| ·叶绿素含量的测定 | 第45页 |
| ·低温处理植株生长量测定 | 第45页 |
| ·叶片相对电导率的测定 | 第45-46页 |
| ·卡尔文循环关键酶活性的测定 | 第46页 |
| ·蔗糖合成关键酶活性的测定 | 第46-48页 |
| 3 结果与分析 | 第48-68页 |
| ·番茄类胡萝卜素ε-羟化酶 LeLUT1 基因的分离 | 第48页 |
| ·LeLUT1 基因的序列分析 | 第48-50页 |
| ·LeLUT1 全长 cDNA 分析 | 第48页 |
| ·LeLUT1 编码蛋白质序列分析 | 第48-50页 |
| ·LeLUT1 的亚细胞定位 | 第50-51页 |
| ·LeLUT1 基因在番茄中的表达分析 | 第51-52页 |
| ·LeLUT1 基因在烟草中的遗传转化，鉴定和筛选 | 第52-57页 |
| ·PBI 正义表达载体的构建 | 第52-53页 |
| ·转 LeLUT1 基因植株的转化和鉴定 | 第53-54页 |
| ·转 LeLUT1 基因植株的筛选 | 第54-57页 |
| ·转基因烟草植株在转录水平上的筛选 | 第54-55页 |
| ·转基因烟草植株在蛋白水平上的筛选 | 第55-56页 |
| ·转基因烟草植株在下游产物水平上的筛选 | 第56-57页 |
| ·过表达 LeLUT1 对低温下黄体素含量的影响 | 第57-58页 |
| ·过表达 LeLUT1 对低温胁迫下生长量的影响 | 第58页 |
| ·过表达 LeLUT1 减轻了烟草在低温条件下的光抑制程度 | 第58-61页 |
| ·过表达 LeLUT1 提高了低温胁迫下的光合速率 | 第58-59页 |
| ·过表达 LeLUT1 提高了低温胁迫下的非光化学淬灭活性 | 第59页 |
| ·过表达 LeLUT1 减轻了低温胁迫下 PSII 的光抑制 | 第59-60页 |
| ·过表达 LeLUT1 减轻了低温胁迫下 D1 蛋白的降解 | 第60-61页 |
| ·过表达 LeLUT1 对低温胁迫下 H_2O_2和 O_2~(.-)含量的影响 | 第61-62页 |
| ·过表达 LeLUT1 对低温胁迫下膜渗透性的影响 | 第62-63页 |
| ·过表达 LeLUT1 对低温胁迫下卡尔文循环相关酶类的影响 | 第63-64页 |
| ·过表达 LeLUT1 对低温胁迫下蔗糖合成相关酶类的影响 | 第64-65页 |
| ·过表达 LeLUT1 对低温胁迫下抗逆相关基因的影响 | 第65-66页 |
| ·抑制叶黄素循环之后，过表达 LeLUT1 对低温胁迫下光抑制和光氧化的影响 | 第66-68页 |
| 4 讨论 | 第68-72页 |
| 5 结论 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第81页 |
