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β-甘露聚糖酶内生类芽孢杆菌诱变选育及酶的纯化研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
缩略词表第12-13页
第一章 前言第13-21页
   ·β-甘露聚糖酶的发现史第13页
   ·β-甘露聚糖酶的来源及性质第13-15页
   ·植物内生菌的研究及作用第15-16页
   ·类芽孢杆菌研究第16-19页
     ·类芽孢杆菌研究进展第16页
     ·类芽孢杆菌的研究应用第16-18页
     ·类芽孢杆菌与β-1,3-葡聚糖酶第18页
     ·内生类芽孢杆菌研究现状第18-19页
   ·β-甘露聚糖酶的纯化研究第19页
   ·本研究的目的和意义第19-21页
第二章 产β-甘露聚糖酶 CH-3 的诱变选育第21-34页
   ·原始出发菌株来源及菌悬液和粗酶液的制备第21页
     ·原始出发菌株来源第21页
     ·菌悬液及粗酶液的制备第21页
   ·主要培养基第21-22页
   ·实验用主要试剂及仪器第22页
     ·试验主要用试剂第22页
     ·仪器第22页
   ·试剂与缓冲液配制第22-23页
     ·DNS 试剂第22页
     ·主要缓冲液第22-23页
   ·酶活测定第23-24页
     ·绘制标准曲线第23页
     ·DNS 法测酶活第23-24页
     ·酶活计算方法第24页
   ·Paenibacillus sp CH-3 菌株的诱变及选育第24-27页
     ·菌株生长曲线绘制第24-25页
     ·紫外诱变第25页
     ·硫酸二乙酯诱变第25-26页
     ·紫外线-光复活诱变第26-27页
     ·紫外线-硫酸二乙酯诱变第27页
     ·亚硝酸盐诱变及其复合诱变第27页
     ·诱变突变菌株的初筛和复筛第27页
   ·诱变突变菌株遗传稳定性的研究第27-28页
   ·诱变选育结果与分析第28-33页
     ·CH-3 菌株生长曲线第28页
     ·紫外诱变结果与分析第28-29页
     ·硫酸二乙酯诱变结果第29-30页
     ·紫外线-光复活诱变结果第30-32页
     ·高产突变菌株 CH3-5 的遗传稳定性研究第32-33页
   ·本章小结第33-34页
第三章 诱变菌株 CH3-5 发酵产酶条件优化第34-42页
   ·诱变菌株来源第34页
   ·培养基与试剂第34页
   ·产酶培养基及产酶条件的优化方法第34-36页
     ·主要碳源对突变菌株发酵产酶的影响第34页
     ·不同氮源对诱变突变菌株发酵产酶的影响第34-35页
     ·不同碳源与氮源比及有机氮源无机氮源比对发酵产酶的影响第35页
     ·离子及甘氨酸对突变菌株发酵产酶的影响第35页
     ·接种量与发酵时间对突变菌株产酶的影响第35页
     ·pH 对突变菌株产酶的影响第35页
     ·培养温度对突变菌株产酶的影响第35-36页
     ·摇床转速对突变菌株发酵产酶的影响第36页
   ·结果与分析第36-41页
     ·主要碳源对 CH3-5 发酵产酶的影响第36-37页
     ·氮源对 CH3-5 发酵产酶的影响第37-38页
     ·碳源与氮源比及有机氮源与无机氮源比对产酶的影响第38页
     ·离子及甘氨酸对 CH3-5 发酵产酶的影响第38-39页
     ·接种量对 CH3-5 发酵产酶的影响第39页
     ·初始 pH 对 CH3-5 发酵产酶的影响第39-40页
     ·培养温度对发酵产酶的影响第40-41页
     ·转速对 CH3-5 发酵产酶的影响第41页
   ·本章小结第41-42页
第四章 β-甘露聚糖酶的分离纯化第42-48页
   ·主要试验仪器及药品第42页
   ·蛋白质含量测定第42页
   ·酶回收率、比活力及纯化倍数的计算第42页
   ·分离纯化方法第42-43页
     ·硫酸铵盐析第42-43页
     ·乙醇沉淀第43页
     ·丙酮沉淀第43页
     ·双水相萃取第43页
   ·结果与分析第43-47页
     ·硫酸铵纯化结果第43-44页
     ·乙醇沉淀结果与分析第44-45页
     ·丙酮沉淀结果与分析第45页
     ·双水相处理结果与分析第45-47页
   ·本章小结第47-48页
第五章 CH3-5 产β-甘露聚糖酶性质与发酵罐放大第48-51页
   ·试验菌株来源第48页
   ·培养基、试剂及仪器第48页
   ·酶学特性质测定方法与发酵罐放大第48-49页
     ·温度对酶活及酶稳定性的影响第48页
     ·pH 对酶活及酶稳定性的影响第48-49页
     ·发酵罐放大实验第49页
   ·产β-甘露聚糖酶菌株 CH3-5 酶学特性分析第49-50页
     ·温度对酶活及酶稳定性的影响第49页
     ·pH 对酶活及酶稳定性的影响第49-50页
   ·发酵罐放大实验第50-51页
第六章 讨论第51-55页
   ·菌株诱变选育探讨第51-53页
   ·酶纯化探讨第53-55页
第七章 结论第55-56页
参考文献第56-65页
致谢第65-66页
攻读硕士学位期间所发表的论文第66-67页

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