| 目录 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第13-19页 |
| ·研究背景 | 第13页 |
| ·CDK2AP1研究进展 | 第13-18页 |
| ·CDK2AP1基因 | 第13-14页 |
| ·CDK2AP1功能与作用机制 | 第14-18页 |
| ·研究目的与意义 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-39页 |
| ·试验材料 | 第19-23页 |
| ·试验鸡胚 | 第19页 |
| ·细胞系和质粒 | 第19页 |
| ·主要试剂及试剂盒 | 第19-20页 |
| ·主要溶液配制 | 第20-22页 |
| ·主要仪器和设备 | 第22-23页 |
| ·试验方法 | 第23-39页 |
| ·CDK2AP1正反义mRNA探针合成 | 第23-26页 |
| ·WISH | 第26-28页 |
| ·CDK2AP1超表达载体构建 | 第28-30页 |
| ·CDK2AP1干涉载体构建 | 第30-33页 |
| ·脂质体转染CDK2AP1超表达和干涉载体 | 第33-34页 |
| ·qPCR检测mRNA水平超表达和干涉效果 | 第34-36页 |
| ·Western blot检测蛋白水平超表达和干涉效果 | 第36-38页 |
| ·流式细胞仪检测细胞周期 | 第38-39页 |
| 3 结果 | 第39-57页 |
| ·pGEM-T-CDK2AP1载体的鉴定 | 第39页 |
| ·斑点杂交检测正反义探针效率 | 第39-40页 |
| ·CDK2AP1在鸡胚和性腺中的表达 | 第40-51页 |
| ·CDK2AP1克隆载体的构建 | 第42-43页 |
| ·CDK2AP1的扩增 | 第42页 |
| ·酶切和测序鉴定 | 第42-43页 |
| ·逆转录病毒超表达载体构建 | 第43-45页 |
| ·pSlax-13-CDK2AP1-GFP重组载体构建 | 第43页 |
| ·CDK2APl超表达载体构建 | 第43-45页 |
| ·CDK2AP1RNAi干涉载体构建 | 第45-49页 |
| ·U6-shRNA扩增 | 第45页 |
| ·U6-shRNA克隆载体构建 | 第45-46页 |
| ·pSlax-13-GFP-U6-shRNA重组载体的构建 | 第46-47页 |
| ·RCASBP.B-GFP-U6-shRNA重组载体的构建 | 第47-49页 |
| ·CDK2AP1超表达载体和RNAi载体转染 | 第49-51页 |
| ·CDK2AP1超表达和RNAi效果检测 | 第51-52页 |
| ·qPCR检测CDK2AP1表达情况 | 第51页 |
| ·WB检测CDK2AP1表达情况 | 第51-52页 |
| ·检测CDK2AP1与鸡胚性腺发育相关基因调控关系 | 第52-55页 |
| ·qPCR检测ER、CDK2和TWIST2表达变化 | 第52-53页 |
| ·qPCR和WB检测AR表达变化 | 第53-54页 |
| ·qPCR和WB检测FOXO3a表达变化 | 第54-55页 |
| ·CDK2AP1对细胞周期的影响 | 第55-57页 |
| 4 讨论 | 第57-62页 |
| ·CDK2AP1在早期鸡胚中的表达 | 第57-58页 |
| ·CDK2AP1在鸡胚泌尿生殖系统中的表达 | 第58页 |
| ·CDK2AP1与AR的调控关系 | 第58-59页 |
| ·CDK2AP1与FOXO3a和ERα的调控关系 | 第59页 |
| ·CDK2AP1与CDK2和TWIST2的调控关系 | 第59-60页 |
| ·CDK2AP1在鸡胚及性腺发育中的作用 | 第60-62页 |
| 5 小结 | 第62-63页 |
| ·本研究所取得的结果 | 第62页 |
| ·下一步需要研究的问题 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
