| 目录 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 缩略语表(Abbreviation) | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-20页 |
| ·PKC信号通路在细胞中作用的研究进展 | 第12-15页 |
| ·PKC信号通路与细胞增殖 | 第12-13页 |
| ·PKC信号通路与细胞凋亡 | 第13-14页 |
| ·PKC信号通路与细胞缝隙连接 | 第14-15页 |
| ·PKC信号通路与TGF-β/Smad家族 | 第15页 |
| ·哺乳动物卵泡发育机制的研究进展 | 第15-18页 |
| ·激素类 | 第16页 |
| ·TGF-β超家族 | 第16-17页 |
| ·细胞缝隙连接 | 第17-18页 |
| ·丝裂原活化蛋白激酶 | 第18页 |
| ·蛋白激酶C与哺乳动物卵泡发育的相互影响 | 第18-20页 |
| ·蛋白激酶C与颗粒细胞增殖 | 第19页 |
| ·蛋白激酶C与卵母细胞恢复减数分裂 | 第19-20页 |
| 2 研究目的及意义 | 第20-21页 |
| 3 实验材料与方法 | 第21-35页 |
| ·实验材料 | 第21-24页 |
| ·主要试剂与抗体 | 第21-22页 |
| ·主要仪器设备 | 第22-23页 |
| ·主要溶液及相关缓冲液 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-35页 |
| ·腔前卵泡的剥离与培养 | 第24-25页 |
| ·颗粒细胞培养 | 第25页 |
| ·流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第25-26页 |
| ·免疫荧光细胞化学(颗粒细胞) | 第26-27页 |
| ·免疫荧光细胞化学(腔前卵泡) | 第27-28页 |
| ·共聚焦显微镜采集图像 | 第28页 |
| ·蛋白提取 | 第28页 |
| ·蛋白浓度检测 | 第28-29页 |
| ·免疫印记 | 第29-31页 |
| ·实时荧光定量PCR(QPCR) | 第31-34页 |
| ·试剂 | 第31页 |
| ·仪器 | 第31-32页 |
| ·具体步骤 | 第32-34页 |
| ·统计分析 | 第34-35页 |
| 4 实验结果 | 第35-52页 |
| ·Staurosporine影响腔前卵泡体外发育 | 第35-37页 |
| ·Staurosporine抑制腔前卵泡体外发育 | 第35-36页 |
| ·Staurosporine抑制成熟卵泡体外诱导排卵 | 第36-37页 |
| ·PKC抑制剂staurosporine诱导体外培养颗粒细胞凋亡 | 第37-44页 |
| ·不同浓度的staurosporine影响体外培养颗粒细胞形态结构 | 第37-38页 |
| ·staurosporine以浓度依赖方式诱导体外培养颗粒细胞发生凋亡 | 第38-40页 |
| ·staurosporine诱导凋亡相关基因表达 | 第40-42页 |
| ·其它种类PKC抑制剂对体外培养颗粒细胞凋亡及坏死的影响 | 第42-44页 |
| ·Staurosporine对腔前卵泡和颗粒细胞中缝隙连接蛋白connexin43表达和定位的影响 | 第44-48页 |
| ·Staurosporine影响腔前卵泡中缝隙连接蛋白connexin43的定位 | 第44-46页 |
| ·Staurosporine影响颗粒细胞中缝隙连接蛋白connexin43的定位 | 第46-48页 |
| ·Staurosporine对体外培养颗粒细胞smad4蛋白表达的影响 | 第48-52页 |
| ·Staurosporine影响腔前卵泡smad4蛋白表达 | 第48-50页 |
| ·Staurosporine对体外培养颗粒细胞smad4蛋白表达的影响 | 第50-52页 |
| 5 讨论 | 第52-58页 |
| ·阻断PKC信号通路可抑制腔前卵泡体外发育 | 第52-53页 |
| ·阻断PKC信号通路促进体外培养颗粒细胞发生凋亡 | 第53-54页 |
| ·PKC抑制剂staurosporine影响细胞缝隙连接蛋白connexin43及其磷酸化 | 第54-55页 |
| ·PKC抑制剂staurosporine影响Smad4蛋白 | 第55-57页 |
| ·小结 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-71页 |
| 附录 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
