摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
符号说明 | 第9-10页 |
1. 文献综述 | 第10-21页 |
·有色稻米的研究 | 第10-12页 |
·有色稻米资源 | 第10页 |
·有色稻米的营养品质和生理功能 | 第10-11页 |
·原花色素和花色素苷 | 第11-12页 |
·有色稻米培育与应用 | 第12页 |
·种皮色素的遗传和分子机制 | 第12-13页 |
·植物中花青素的代谢途径 | 第13-14页 |
·雄性不育与智能不育系的研究 | 第14-20页 |
·雄性不育 | 第14-16页 |
·水稻杂种优势及三系配套杂交育种 | 第16-17页 |
·水稻两系杂交育种 | 第17-18页 |
·第三代杂交育种技术(G3育种) | 第18页 |
·水稻智能不育系的设计 | 第18-20页 |
·本研究的目的与意义 | 第20-21页 |
2. 材料与方法 | 第21-35页 |
·实验材料 | 第21-23页 |
·植物材料 | 第21页 |
·质粒及细菌菌株 | 第21页 |
·PCR引物 | 第21-22页 |
·化学试剂 | 第22-23页 |
·质粒DNA的提取、酶切、连接与转化 | 第23-25页 |
·质粒的提取 | 第23页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第23-24页 |
·质粒转化感受态大肠杆菌 | 第24页 |
·农杆菌感受态的制备 | 第24页 |
·质粒转入感受态农杆菌 | 第24-25页 |
·PCR扩增产物的纯化 | 第25页 |
·DNA片段的克隆 | 第25-26页 |
·载体的构建 | 第26-27页 |
·hvChi26-GUS载体的构建 | 第26-27页 |
·PCR获得目的片段 | 第26页 |
·末端加A尾后连接T载体 | 第26页 |
·DNA片段和载体片段的获得 | 第26页 |
·连接及重组子的获得 | 第26-27页 |
·启动子-Rc融合载体的构建 | 第27页 |
·根癌农杆菌介导的水稻转化 | 第27-30页 |
·水稻的组织培养 | 第27-28页 |
·根癌农杆菌的培养 | 第28页 |
·水稻受体材料的侵染及其与根癌农杆菌的共培养 | 第28页 |
·抗性愈伤组织的筛选、分化及植株再生 | 第28-30页 |
·转基因水稻植株的鉴定 | 第30页 |
·水稻总DNA的PCR鉴定 | 第30页 |
·GUS活性的定性及定量分析 | 第30-31页 |
·GUS活性的组织化学染色分析 | 第30页 |
·GUS活性的荧光定量分析 | 第30-31页 |
·RT-PCR分析 | 第31-33页 |
·总RNA的提取 | 第31页 |
·总RNA质量的检测 | 第31-32页 |
·样品RNA纯度和浓度检测 | 第31-32页 |
·MAE变性胶检测RNA质量 | 第32页 |
·总RNA的纯化 | 第32页 |
·第一链cDNA的合成量 | 第32-33页 |
·半定量RT-PCR分析 | 第33页 |
·水稻种子中花青素含量的测定 | 第33-35页 |
·水稻种子中花青素的提取 | 第33页 |
·高效液相色谱法(HPLC)测定水稻种子中花青素的含量 | 第33-35页 |
·HPLC条件 | 第33-34页 |
·水稻种子提取物中花青素的测定 | 第34-35页 |
3. 结果与分析 | 第35-48页 |
·Chi26::GUS融合基因在转基因水稻中的表达研究 | 第35-38页 |
·Chi26基因启动子的克隆 | 第35页 |
·启动子GUS融合载体的构建 | 第35-36页 |
·转基因水稻植株的培育与鉴定 | 第36-37页 |
·转基因水稻中GUS融合基因的表达 | 第37-38页 |
·水稻中Rc基因的克隆 | 第38-39页 |
·转Rc基因水稻的培育与鉴定 | 第39-42页 |
·不同启动子驱动Rc融合载体的构建 | 第39-40页 |
·转基因植株的获得 | 第40-41页 |
·含Rc基因的转基因植株鉴定 | 第41-42页 |
·不同启动子驱动的Rc在转基因水稻中的表达 | 第42-43页 |
·转基因水稻成熟种子的表型 | 第43-44页 |
·转基因植株种子中花青素含量的测定 | 第44-48页 |
·转基因水稻种子中花青素相对含量的测定 | 第44-45页 |
·HPLC检测转基因水稻种子中花青素成分 | 第45-48页 |
4. 小结与讨论 | 第48-53页 |
·主要研究结果 | 第48页 |
·讨论 | 第48-51页 |
·Chi26在转基因水稻中的特异性表达分析 | 第48页 |
·转基因水稻成熟种子的种皮颜色较浅的原因分析 | 第48-51页 |
·花青素的合成代谢途径 | 第48-50页 |
·花青素类的转录调控 | 第50-51页 |
·花青素的运输与累积 | 第51页 |
·微效基因的调控 | 第51页 |
·Rc与Rd在控制水稻种皮色素中的作用 | 第51页 |
·研究展望 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-59页 |
致谢 | 第59-60页 |