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不同启动子驱动Rc基因在转基因水稻中表达的研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-9页
符号说明第9-10页
1. 文献综述第10-21页
   ·有色稻米的研究第10-12页
     ·有色稻米资源第10页
     ·有色稻米的营养品质和生理功能第10-11页
     ·原花色素和花色素苷第11-12页
     ·有色稻米培育与应用第12页
   ·种皮色素的遗传和分子机制第12-13页
   ·植物中花青素的代谢途径第13-14页
   ·雄性不育与智能不育系的研究第14-20页
     ·雄性不育第14-16页
     ·水稻杂种优势及三系配套杂交育种第16-17页
     ·水稻两系杂交育种第17-18页
     ·第三代杂交育种技术(G3育种)第18页
     ·水稻智能不育系的设计第18-20页
   ·本研究的目的与意义第20-21页
2. 材料与方法第21-35页
   ·实验材料第21-23页
     ·植物材料第21页
     ·质粒及细菌菌株第21页
     ·PCR引物第21-22页
     ·化学试剂第22-23页
   ·质粒DNA的提取、酶切、连接与转化第23-25页
     ·质粒的提取第23页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第23-24页
     ·质粒转化感受态大肠杆菌第24页
     ·农杆菌感受态的制备第24页
     ·质粒转入感受态农杆菌第24-25页
   ·PCR扩增产物的纯化第25页
   ·DNA片段的克隆第25-26页
   ·载体的构建第26-27页
     ·hvChi26-GUS载体的构建第26-27页
       ·PCR获得目的片段第26页
       ·末端加A尾后连接T载体第26页
       ·DNA片段和载体片段的获得第26页
       ·连接及重组子的获得第26-27页
     ·启动子-Rc融合载体的构建第27页
   ·根癌农杆菌介导的水稻转化第27-30页
     ·水稻的组织培养第27-28页
     ·根癌农杆菌的培养第28页
     ·水稻受体材料的侵染及其与根癌农杆菌的共培养第28页
     ·抗性愈伤组织的筛选、分化及植株再生第28-30页
   ·转基因水稻植株的鉴定第30页
   ·水稻总DNA的PCR鉴定第30页
   ·GUS活性的定性及定量分析第30-31页
     ·GUS活性的组织化学染色分析第30页
     ·GUS活性的荧光定量分析第30-31页
   ·RT-PCR分析第31-33页
     ·总RNA的提取第31页
     ·总RNA质量的检测第31-32页
       ·样品RNA纯度和浓度检测第31-32页
       ·MAE变性胶检测RNA质量第32页
     ·总RNA的纯化第32页
     ·第一链cDNA的合成量第32-33页
     ·半定量RT-PCR分析第33页
   ·水稻种子中花青素含量的测定第33-35页
     ·水稻种子中花青素的提取第33页
     ·高效液相色谱法(HPLC)测定水稻种子中花青素的含量第33-35页
       ·HPLC条件第33-34页
       ·水稻种子提取物中花青素的测定第34-35页
3. 结果与分析第35-48页
   ·Chi26::GUS融合基因在转基因水稻中的表达研究第35-38页
     ·Chi26基因启动子的克隆第35页
     ·启动子GUS融合载体的构建第35-36页
     ·转基因水稻植株的培育与鉴定第36-37页
     ·转基因水稻中GUS融合基因的表达第37-38页
   ·水稻中Rc基因的克隆第38-39页
   ·转Rc基因水稻的培育与鉴定第39-42页
     ·不同启动子驱动Rc融合载体的构建第39-40页
     ·转基因植株的获得第40-41页
     ·含Rc基因的转基因植株鉴定第41-42页
   ·不同启动子驱动的Rc在转基因水稻中的表达第42-43页
   ·转基因水稻成熟种子的表型第43-44页
   ·转基因植株种子中花青素含量的测定第44-48页
     ·转基因水稻种子中花青素相对含量的测定第44-45页
     ·HPLC检测转基因水稻种子中花青素成分第45-48页
4. 小结与讨论第48-53页
   ·主要研究结果第48页
   ·讨论第48-51页
     ·Chi26在转基因水稻中的特异性表达分析第48页
     ·转基因水稻成熟种子的种皮颜色较浅的原因分析第48-51页
       ·花青素的合成代谢途径第48-50页
       ·花青素类的转录调控第50-51页
       ·花青素的运输与累积第51页
       ·微效基因的调控第51页
       ·Rc与Rd在控制水稻种皮色素中的作用第51页
   ·研究展望第51-53页
参考文献第53-59页
致谢第59-60页

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