| 英文缩略词 | 第1-6页 |
| 中文摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 前言 | 第8-13页 |
| 第二章 材料与方法 | 第13-37页 |
| 一、实验材料 | 第13-18页 |
| 1、载体构建材料 | 第13页 |
| 2、体外实验(细胞)材料 | 第13-14页 |
| 3、动物实验材料 | 第14页 |
| 4、其它制剂、溶液 | 第14-16页 |
| 5、常用试剂配制 | 第16-17页 |
| 6、主要仪器设施 | 第17-18页 |
| 7、计算机软件及数据库 | 第18页 |
| 二、实验方法 | 第18-37页 |
| 1、琼脂糖凝胶电泳方法 | 第18-20页 |
| 2、质粒或PCR产物的酶切反应 | 第20页 |
| 3、pMD18-T载体和目的基因的连接 | 第20-21页 |
| 4、质粒的转化 | 第21-22页 |
| 5、质粒的小量制备 | 第22页 |
| 6、质粒的大量制备 | 第22-24页 |
| 7、实验中使用细胞培养条件 | 第24-25页 |
| 8、细胞复苏 | 第25页 |
| 9、细胞换液 | 第25页 |
| 10、细胞传代 | 第25-26页 |
| 11、细胞冻存 | 第26页 |
| 12、血细胞计数板法直接计数细胞 | 第26页 |
| 13、细胞转染 | 第26-27页 |
| 14、组织DNA抽提 | 第27-28页 |
| 15、组织mRNA抽提 | 第28-29页 |
| 16、质粒尾静脉快冲注射 | 第29页 |
| 17、动物实验与血浆、血清采集 | 第29-30页 |
| 18、酶联免疫吸附实验(ELISA)检测小鼠血浆中hFIX抗原 | 第30-31页 |
| 19、肝脏损伤检测 | 第31页 |
| 20、PCR检测质粒在体内的分布 | 第31-32页 |
| 21、RT-PCR检测hFIX mRNA | 第32-33页 |
| 22、肝脏部分切除 | 第33-34页 |
| 23、鼠肝PCR扩增检测质粒-AAVS1整合位点接头序列 | 第34-35页 |
| 24、ELISA检测小鼠血清中hFIX抗体的相对水平 | 第35-36页 |
| 25、统计学分析 | 第36-37页 |
| 第三章 实验结果 | 第37-49页 |
| 1、质粒的构建 | 第37页 |
| 2、不同质粒在不同细胞中的表达情况 | 第37-38页 |
| 3、不同时间点质粒分布检测 | 第38-39页 |
| 4、FIX表达质粒在不同器官中转录检测 | 第39-41页 |
| 5、hFIX在转基因实验小鼠体内的表达情况 | 第41-43页 |
| 6、肝脏毒性检测 | 第43-45页 |
| 7、nested PCR检测plasmid-AAVS1接头位点序列 | 第45-48页 |
| 8、hFIX抗体检测 | 第48-49页 |
| 第四章 讨论与结论 | 第49-52页 |
| 参考文献 | 第52-55页 |
| 综述 | 第55-80页 |
| 参考文献 | 第66-80页 |
| 论文发表及获奖情况 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81-83页 |
