| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 縮略词 | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-22页 |
| ·拟南芥开花诱导研究进展 | 第14-18页 |
| ·光周期途径相关基因的研究 | 第14-15页 |
| ·春化途径相关基因的研究 | 第15-16页 |
| ·赤霉素途径相关基因的研究 | 第16-17页 |
| ·自主途径相关基因研究 | 第17页 |
| ·开花途径下游整合子的研究 | 第17-18页 |
| ·拟南芥ATFRIGIDA蛋白家族成员的研究进展 | 第18-19页 |
| ·其他植物中开花调控基因的研究进展 | 第19-20页 |
| ·研究目的与意义 | 第20-22页 |
| 第二章 拟南芥AtFRL4基因的克隆与超表达载体构建 | 第22-34页 |
| ·材料 | 第22-24页 |
| ·植物材料及菌株 | 第22页 |
| ·工具酶与试剂盒 | 第22页 |
| ·培养基的配制 | 第22-23页 |
| ·引物设计及合成 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-27页 |
| ·植物材料的准备 | 第24页 |
| ·拟南芥总RNA的提取 | 第24页 |
| ·反转录与基因全长的扩增 | 第24-25页 |
| ·PCR产物的切胶回收 | 第25页 |
| ·载体的连接转化 | 第25-26页 |
| ·单克隆的获得与筛选 | 第26页 |
| ·序列分析及预测 | 第26-27页 |
| ·质粒的提取与双酶切 | 第27页 |
| ·重组质粒的构建 | 第27页 |
| ·结果与分析 | 第27-32页 |
| ·拟南芥总RNA的提取 | 第27-28页 |
| ·克隆载体pEasy-AtFRL4的鉴定 | 第28页 |
| ·AtFRL4基因的序列分析 | 第28-31页 |
| ·pBI-AtFRL4超表达载体的鉴定 | 第31-32页 |
| ·讨论 | 第32-33页 |
| ·小结 | 第33-34页 |
| 第三章 拟南芥AtFRL4基因的亚细胞定位 | 第34-40页 |
| ·材料 | 第34-35页 |
| ·菌株与载体 | 第34页 |
| ·工具酶与试剂盒 | 第34页 |
| ·引物的设计与合成 | 第34-35页 |
| ·实验方法 | 第35-36页 |
| ·AtFRL4蛋白的定位预测 | 第35页 |
| ·GFP融合表达载体的构建 | 第35页 |
| ·金粉悬浮液的制备 | 第35页 |
| ·基因枪子弹的制备 | 第35-36页 |
| ·GFP融合表达载体转化洋葱 | 第36页 |
| ·GFP融合表达蛋白的检测 | 第36页 |
| ·结果与分析 | 第36-38页 |
| ·AtFRL4蛋白的定位预测 | 第36-37页 |
| ·AtFRL4瞬时表达载体构建与鉴定 | 第37-38页 |
| ·AtFRL4基因在洋葱中的亚细胞定位 | 第38页 |
| ·讨论 | 第38-39页 |
| ·小结 | 第39-40页 |
| 第四章 AtFRL4基因上游启动子的克隆分析与表达载体构建 | 第40-48页 |
| ·材料 | 第40-41页 |
| ·菌株与载体 | 第40页 |
| ·工具酶与试剂盒 | 第40页 |
| ·引物的设计与合成 | 第40-41页 |
| ·实验方法 | 第41-42页 |
| ·拟南芥基因组DNA的提取 | 第41页 |
| ·AtFRL4基因上游启动子序列的克隆 | 第41-42页 |
| ·重组质粒的构建 | 第42页 |
| ·结果与分析 | 第42-46页 |
| ·拟南芥基因组DNA的提取 | 第42-43页 |
| ·AtFRL4基因启动子序列的预测分析 | 第43-45页 |
| ·转录起始位点的预测 | 第43页 |
| ·顺式作用元件的预测 | 第43-45页 |
| ·AtFRL4基因启动子序列的克隆 | 第45页 |
| ·AtFRL4基因启动子序列的表达载体构建 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46-47页 |
| ·小结 | 第47-48页 |
| 第五章 AtFRL4基因及其启动子序列的烟草转化与转基因再生苗筛选 | 第48-56页 |
| ·材料 | 第48-49页 |
| ·植物材料及菌株 | 第48页 |
| ·工具酶 | 第48页 |
| ·引物设计 | 第48-49页 |
| ·培养基的种类 | 第49页 |
| ·实验方法 | 第49-51页 |
| ·植物材料的准备 | 第49页 |
| ·农杆菌感受态的制备与重组质粒的转化 | 第49-50页 |
| ·农杆菌转化烟草 | 第50页 |
| ·AtFRL4转基因再生苗的检测 | 第50-51页 |
| ·DNA水平的检测 | 第50-51页 |
| ·mRNA水平的检测 | 第51页 |
| ·AtFLP转基因再生苗的检测 | 第51页 |
| ·结果与分析 | 第51-55页 |
| ·农杆菌介导的烟草转化 | 第51-52页 |
| ·AtFRL4转基因再生苗的筛选鉴定 | 第52-53页 |
| ·DNA水平的检测 | 第52页 |
| ·mRNA水平的检测 | 第52-53页 |
| ·AtFLP转基因再生苗的检测 | 第53-55页 |
| ·小结 | 第55-56页 |
| 第六章 AtFRL4基因的功能研究及其上游启动子对基因表达的调控作用研究 | 第56-64页 |
| ·材料 | 第56-57页 |
| ·植物材料 | 第56页 |
| ·生化试剂 | 第56-57页 |
| ·实验方法 | 第57-58页 |
| ·AtFRL4转基因烟草开花时间统计 | 第57页 |
| ·样品处理 | 第57页 |
| ·组织化学染色 | 第57-58页 |
| ·结果与分析 | 第58-61页 |
| ·AtFRL4基因在蛋白水平的检测 | 第58页 |
| ·AtFRL4基因在烟草中的功能初探 | 第58页 |
| ·AtFRL4上游启动子序列的调控研究 | 第58-61页 |
| ·讨论 | 第61-62页 |
| ·小结 | 第62-64页 |
| 第七章 全文结论与展望 | 第64-66页 |
| ·全文结论 | 第64页 |
| ·展望 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
