| 目录 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 缩略词(Abbreviation) | 第13-14页 |
| 第一篇 文献综述 | 第14-40页 |
| 第一章 SB转座系统的研究进展 | 第14-26页 |
| 摘要 | 第14-15页 |
| 1 SB转座子的结构、转座机制及特性 | 第15-18页 |
| ·反向重复序列 | 第15页 |
| ·SB转座酶 | 第15-16页 |
| ·“睡美人”转座子的转座机制 | 第16-17页 |
| ·SB转座子的遗传学特性 | 第17-18页 |
| 2 SB转座效率的研究 | 第18-20页 |
| ·SB转座过程的检测方法 | 第18-19页 |
| ·SB转座效率的影响因素 | 第19-20页 |
| 3 SB转座子的优缺点 | 第20-21页 |
| 4 SB转座子的应用 | 第21-22页 |
| ·基因突变剂 | 第21页 |
| ·SB转座子标签技术 | 第21页 |
| ·转基因生物 | 第21-22页 |
| ·基因修复和基因治疗 | 第22页 |
| 5 展望 | 第22-23页 |
| 参考文献 | 第23-26页 |
| 第二章 转基因动物乳腺生物反应器的研究进展 | 第26-40页 |
| 摘要 | 第26-27页 |
| 1 动物乳腺生物反应器的操作流程 | 第27-34页 |
| ·乳腺生物反应器表达载体的构建 | 第27-30页 |
| ·转基因技术的选择 | 第30-32页 |
| ·胚胎移植 | 第32页 |
| ·检测方法 | 第32-34页 |
| 2 动物乳腺反应器的应用 | 第34-35页 |
| ·生产药用蛋白 | 第34-35页 |
| ·生产基因工程疫苗 | 第35页 |
| ·生产抗体 | 第35页 |
| ·生产酶制剂 | 第35页 |
| 3 动物乳腺生物反应器的优缺点 | 第35-36页 |
| 4 展望 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-40页 |
| 第二篇 试验研究 | 第40-94页 |
| 第三章 奶山羊B-乳球蛋白基因的克隆及其鉴定 | 第40-58页 |
| 摘要 | 第40-41页 |
| 1 材料与方法 | 第41-48页 |
| ·试验材料 | 第41-43页 |
| ·试验方法 | 第43-45页 |
| ·pBLG-EGFP的构建 | 第45-47页 |
| ·乳腺上皮细胞的纯化培养 | 第47-48页 |
| ·乳腺上皮细胞的转染 | 第48页 |
| 2 结果与分析 | 第48-54页 |
| ·PCR扩增3'BLG、5'BLG及EGFP片段 | 第48-49页 |
| ·3’BLG、5'BLG、EGFP的TA克隆、酶切鉴定及测序 | 第49-51页 |
| ·pcDNA3.1(-)-BLG-EGFP的构建与酶切鉴定 | 第51-52页 |
| ·乳腺上皮细胞的一般形态学观察 | 第52页 |
| ·流式细胞仪检测激素培养的CMECs细胞凋亡 | 第52-53页 |
| ·乳腺上皮细胞的转染及荧光表达 | 第53-54页 |
| 3 讨论 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-58页 |
| 第四章 SB转座系统介导的HLF基因乳腺表达载体 | 第58-74页 |
| 摘要 | 第58-59页 |
| 1 材料与方法 | 第59-66页 |
| ·试验材料 | 第59-61页 |
| ·试验方法 | 第61-66页 |
| 2 结果与分析 | 第66-69页 |
| ·PCR扩增hLF片段 | 第66页 |
| ·hLF的TA克隆、酶切鉴定及测序 | 第66-67页 |
| ·pT_2-BLG-hLF的构建与酶切鉴定 | 第67-68页 |
| ·RT-PCR检测hLF基因在激素诱导培养的转基因细胞中的表达 | 第68页 |
| ·Western-Blotting检测 | 第68-69页 |
| 3 讨论 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-74页 |
| 第五章 SB转座系统介导的转人乳铁蛋白基因奶山羊成纤维细胞株的建立 | 第74-94页 |
| 摘要 | 第74-75页 |
| 1 材料与方法 | 第75-81页 |
| ·试验材料 | 第75页 |
| ·试验方法 | 第75-81页 |
| 2 结果与分析 | 第81-89页 |
| ·pT_2-BLG-hLF-EGFP-Neo载体的构建及其鉴定 | 第81-83页 |
| ·CEFCs的分离培养及一般形态学观察 | 第83-84页 |
| ·F3、F4代CEFCs生长曲线的绘制 | 第84页 |
| ·G418对CEFCs最小致死量的测定结果 | 第84-85页 |
| ·CEFCs的转染效率的优化 | 第85-87页 |
| ·CEFCs的转染与筛选 | 第87页 |
| ·PCR鉴定CEFCs阳性克隆细胞 | 第87-88页 |
| ·转基因细胞的生长曲线 | 第88页 |
| ·转基因细胞的核型分析 | 第88-89页 |
| 3 讨论 | 第89-92页 |
| ·供体细胞的原代培养与生物学特性分析 | 第89-90页 |
| ·脂质体转染体细胞效率的优化 | 第90-92页 |
| 参考文献 | 第92-94页 |
| 全文结论 | 第94-96页 |
| 附录 | 第96-98页 |
| 硕士期间发表的学术论文 | 第98-100页 |
| 致谢 | 第100页 |
