| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 缩略词表 | 第8-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-21页 |
| ·谷氨酰胺转胺酶的介绍 | 第12页 |
| ·谷氨酰胺转胺酶的作用机理 | 第12-13页 |
| ·谷氨酰胺转胺酶的来源 | 第13-15页 |
| ·E.coli 重组谷氨酰胺转胺酶的研究 | 第15-17页 |
| ·E.coli 系统表达外源基因的研究 | 第15-16页 |
| ·E.coli 系统表达谷氨酰胺转胺酶的研究 | 第16-17页 |
| ·乳糖诱导表达的研究 | 第17-18页 |
| ·乳糖操纵子诱导机制 | 第17-18页 |
| ·乳糖诱导的意义 | 第18页 |
| ·包涵体复性的研究 | 第18-19页 |
| ·蛋白质分离纯化的方法 | 第19-20页 |
| ·立题背景及意义 | 第20页 |
| ·课题研究的主要内容 | 第20-21页 |
| 第二章 谷氨酰胺转胺酶工程菌的鉴定 | 第21-28页 |
| 引言 | 第21页 |
| ·实验材料 | 第21-22页 |
| ·实验菌株 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21-22页 |
| ·主要仪器 | 第22页 |
| ·常用溶液及培养基的配制 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-24页 |
| ·菌种的活化 | 第22-23页 |
| ·质粒 DNA 的提取 | 第23页 |
| ·pET22b-MTG、pGEX-4T-1-MTG 质粒的双酶切验证 | 第23-24页 |
| ·pET22b-MTG、pGEX-4T-1-MTG 质粒的 PCR 验证 | 第24页 |
| ·实验结果 | 第24-27页 |
| ·pET22b-MTG 质粒的提取及酶切鉴定结果 | 第24-25页 |
| ·pET22b-MTG 质粒的 PCR 验证结果 | 第25-26页 |
| ·pGEX-4T-1-MTG 质粒的提取及酶切鉴定结果 | 第26页 |
| ·pGEX-4T-1-MTG 的 PCR 验证结果 | 第26-27页 |
| ·本章小结 | 第27-28页 |
| 第三章 重组菌中 MTG 的乳糖诱导表达 | 第28-49页 |
| 引言 | 第28页 |
| ·实验材料 | 第28-30页 |
| ·实验菌株 | 第28页 |
| ·主要试剂 | 第28-29页 |
| ·主要仪器 | 第29页 |
| ·常用溶液及培养基的配制 | 第29-30页 |
| ·实验方法 | 第30-34页 |
| ·蛋白质浓度测定方法 | 第30-31页 |
| ·pET22b-MTG 的乳糖诱导培养条件的优化 | 第31-32页 |
| ·pGEX-4T-1-MTG 的乳糖诱导培养条件的优化 | 第32-34页 |
| ·实验结果 | 第34-47页 |
| ·蛋白浓度测定的标准曲线 | 第34页 |
| ·pET22b-MTG 的表达条件优化 | 第34-41页 |
| ·pGEX-4T-1-MTG 的表达条件优化 | 第41-47页 |
| ·小结与讨论 | 第47-49页 |
| 第四章 MTG 的分离纯化 | 第49-71页 |
| 引言 | 第49页 |
| ·实验材料 | 第49-52页 |
| ·主要试剂 | 第49-50页 |
| ·主要仪器 | 第50-51页 |
| ·常用溶液的配制 | 第51-52页 |
| ·实验方法 | 第52-58页 |
| ·pET22b-MTG 的分离纯化 | 第52-56页 |
| ·pGEX-4T-1-MTG 的复性及分离纯化 | 第56-58页 |
| ·实验结果 | 第58-69页 |
| ·pET22b-MTG 的分离纯化结果 | 第58-64页 |
| ·pGEX-4T-1-MTG 的复性及纯化结果 | 第64-69页 |
| ·小结与讨论 | 第69-71页 |
| 第五章 MTG 的酶学稳定性研究 | 第71-75页 |
| 引言 | 第71页 |
| ·试验材料 | 第71页 |
| ·主要试剂 | 第71页 |
| ·主要仪器 | 第71页 |
| ·实验方法 | 第71-72页 |
| ·MTG 酶活的热稳定性研究 | 第71-72页 |
| ·MTG 酶活的 pH 稳定性研究 | 第72页 |
| ·金属离子对 MTG 酶活稳定性影响的研究 | 第72页 |
| ·实验结果 | 第72-74页 |
| ·MTG 的热稳定性测定结果 | 第72-73页 |
| ·MTG 的 pH 稳定性测定结果 | 第73页 |
| ·MTG 的金属离子稳定性测定结果 | 第73-74页 |
| ·本章小结 | 第74-75页 |
| 总结与展望 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 附录 A 研究生期间发表的文章 | 第85-86页 |
| 附录 B 重组载体构建图 | 第86页 |
