摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-10页 |
1 文献综述 | 第10-20页 |
·杨树的概述 | 第10-11页 |
·杨树组织培养的概述 | 第11-13页 |
·杨树组织培养的研究进展 | 第11页 |
·杨树离体再生体系的主要影响因素 | 第11-13页 |
·杨树组织培养的研究意义 | 第13页 |
·杨树遗传转化技术 | 第13-17页 |
·杨树遗传转化技术的研究进展 | 第14-15页 |
·根癌农杆菌概述 | 第15-17页 |
·杨树遗传转化中存在的问题 | 第17页 |
·Bt杀虫晶体蛋白的研究 | 第17-20页 |
·Bt晶体蛋白的杀虫机理 | 第18-19页 |
·转基因植物生态安全性评价 | 第19-20页 |
2 引言 | 第20-22页 |
·本课题的研究意义 | 第20页 |
·本课题研究的内容与目标 | 第20-21页 |
·研究内容 | 第20-21页 |
·研究目标 | 第21页 |
·本课题的研究技术路线 | 第21-22页 |
3 材料与方法 | 第22-32页 |
·实验材料 | 第22-23页 |
·植物材料 | 第22页 |
·菌株和质粒 | 第22-23页 |
·PCR反应的引物 | 第23页 |
·主要仪器设备和试剂 | 第23-26页 |
·主要仪器设备 | 第23页 |
·主要试剂 | 第23-24页 |
·有关实验试剂的配置 | 第24-26页 |
·MS培养基的配置 | 第24页 |
·LB、YEP培养基的配置 | 第24页 |
·vir基因活化试剂的配制 | 第24-25页 |
·质粒提取试剂的配置 | 第25页 |
·CTAB法杨树DNA提取试剂 | 第25-26页 |
·抗生素的配置 | 第26页 |
·实验方法 | 第26-32页 |
·725杨树再生体系的建立 | 第26-27页 |
·叶片消毒方法的筛选 | 第26页 |
·诱导愈伤组织培养基的筛选 | 第26页 |
·诱导分化培养基的筛选 | 第26页 |
·继代增殖培养基的筛选 | 第26-27页 |
·诱导生根培养基的筛选 | 第27页 |
·炼苗与移栽 | 第27页 |
·含Bt基因的根癌农杆菌制备 | 第27-29页 |
·质粒pCAMBIA1300+Cry1C~*转化E.coli DH5α感受态细胞 | 第27页 |
·质粒pCAMBIA1300+Cry1C~*的提取及酶切鉴定 | 第27-28页 |
·根癌农杆菌LBA4404感受态细胞制备 | 第28-29页 |
·液氮冻融法转化LBA4404 | 第29页 |
·农杆菌LBA4404质粒的提取及酶切鉴定 | 第29页 |
·美洲黑杨725杨对潮霉素B敏感性试验 | 第29页 |
·Bt基因转化美洲黑杨725杨 | 第29-31页 |
·受体材料的预培养 | 第30页 |
·工程菌的制备 | 第30页 |
·vir基因的活化 | 第30页 |
·侵染和共培养 | 第30页 |
·菌的清洗 | 第30页 |
·抗性芽的筛选 | 第30-31页 |
·生根选择培养 | 第31页 |
·转化植株的PCR检测 | 第31-32页 |
·转化植株的DNA提取 | 第31页 |
·转化植株的PCR鉴定 | 第31-32页 |
4 结果与分析 | 第32-40页 |
·725杨树叶片再生体系的建立 | 第32-36页 |
·外植体消毒体系的筛选 | 第32页 |
·不同培养基诱导愈伤组织的影响 | 第32-33页 |
·不同培养基对诱导分化芽的影响 | 第33-35页 |
·不同培养基对分化芽继代增殖的影响 | 第35页 |
·不同培养基对组培苗的生根的影响 | 第35-36页 |
·炼苗与移栽 | 第36页 |
·美洲黑杨725杨叶片对潮霉素B浓度的确定 | 第36-37页 |
·美洲黑杨725杨叶片的潮霉素B的敏感性试验 | 第36-37页 |
·美洲黑杨725杨生根的潮霉素B的敏感性试验 | 第37页 |
·pCAMBIA1300+Cry1C~*质粒导入农杆菌的PCR及酶切验证 | 第37-38页 |
·抗性植物的PCR验证 | 第38-40页 |
5 结论与讨论 | 第40-42页 |
·讨论 | 第40-41页 |
·725杨组织培养研究 | 第40页 |
·725杨遗传转化研究 | 第40页 |
·725杨转基因研究 | 第40-41页 |
·结论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-47页 |
附录A:中英文缩写与注释 | 第47-48页 |
附录B | 第48-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
个人简介 | 第52页 |
成果清单 | 第52页 |