蜀麦482抗冻蛋白基因TaIRI的克隆和荧光定量表达分析
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-20页 |
| ·植物的冷害 | 第10页 |
| ·小麦的冻害 | 第10-11页 |
| ·影响小麦抗寒性的因素 | 第11-13页 |
| ·决定遗传因子的内部因素 | 第11-12页 |
| ·抗寒性在不同品种之间的差异性 | 第11页 |
| ·地中茎耐寒能力伸长特性 | 第11-12页 |
| ·麦苗在生育时期的耐寒能力和生长状况 | 第12页 |
| ·环境因素对抗寒特性的影响 | 第12-13页 |
| ·温度因素 | 第12页 |
| ·光照 | 第12页 |
| ·水分因素 | 第12-13页 |
| ·土壤 | 第13页 |
| ·植物抗冻蛋白特性 | 第13页 |
| ·小麦抗冻蛋白研究进展 | 第13-14页 |
| ·TaIRI基因研究简介 | 第14-15页 |
| ·实时荧光定量PCR技术简介 | 第15-20页 |
| ·实时荧光定量PCR的技术 | 第15页 |
| ·实时荧光定量PCR原理 | 第15-16页 |
| ·实时荧光定量PCR技术种类 | 第16-18页 |
| ·SYBR Green I荧光性染料 | 第16-17页 |
| ·TaqMan探针 | 第17-18页 |
| ·实时荧光定量PCR定量方法 | 第18-19页 |
| ·绝对定量 | 第19页 |
| ·相对定量 | 第19-20页 |
| ·研究的目的意义 | 第20页 |
| 2 材料和方法 | 第20-30页 |
| ·实验材料 | 第20-21页 |
| ·植物材料 | 第20页 |
| ·细菌菌株 | 第20-21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·主要仪器设备 | 第21页 |
| ·引物的合成 | 第21页 |
| ·实验的方法 | 第21-30页 |
| ·抗寒性鉴定 | 第21-22页 |
| ·TaIRI基因的克隆 | 第22-27页 |
| ·总RNA提取 | 第22页 |
| ·反转录(cDNA第一链的合成) | 第22-23页 |
| ·PCR引物设计和cDNA扩增 | 第23-24页 |
| ·PCR产物的回收和纯化 | 第24-25页 |
| ·制备感受态细胞 | 第25页 |
| ·连接 | 第25页 |
| ·转化 | 第25-26页 |
| ·筛选阳性克隆 | 第26页 |
| ·生物信息学分析及序列测定 | 第26-27页 |
| ·荧光定量表达分析 | 第27-30页 |
| ·荧光定量引物 | 第27页 |
| ·质粒标准品的制备 | 第27-29页 |
| ·质粒提取 | 第28-29页 |
| ·质粒标准品的稀释 | 第29页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第29-30页 |
| ·实时荧光定量PCR分析 | 第30页 |
| ·分析融解曲线 | 第30页 |
| ·标准曲线分析 | 第30页 |
| ·数据处理 | 第30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-44页 |
| ·抗寒性鉴定 | 第30-31页 |
| ·TalRI基因编码区的克隆 | 第31页 |
| ·核苷酸序列分析 | 第31-34页 |
| ·聚类分析 | 第34-35页 |
| ·荧光定量分析 | 第35-44页 |
| ·总RNA的提取 | 第35页 |
| ·荧光定量PCR引物的特异性检测 | 第35-37页 |
| ·相对标准品质粒的鉴定结果及标准曲线的建立 | 第37-39页 |
| ·TaIRI基因的表达分析 | 第39-44页 |
| ·TaIRI-1基因的定量表达分析 | 第39-40页 |
| ·TaIRI-2基因的定量表达分析 | 第40-41页 |
| ·TaIRI-3基因的定量表达分析 | 第41-42页 |
| ·TaIRI-4基因的定量表达分析 | 第42-44页 |
| 4 结论与讨论 | 第44-46页 |
| ·小麦TaIRI基因的表达 | 第44-45页 |
| ·小麦TaIRI基因研究展望 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 致谢 | 第50页 |
