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梅花鹿IFN-γ基因的克隆表达及其在结核病诊断中的初步应用

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-13页
缩略语表(ABBREVIATION)第13-14页
第1章 文献综述第14页
前言第14-24页
   ·结核病的流行现状及危害第15-17页
     ·结核病原与发病机理第15-16页
     ·野生动物结核病的流行现状及危害第16页
     ·鹿结核病的流行现状及危害第16-17页
   ·鹿结核病的诊断方法第17-24页
     ·细菌学诊断方法第17-18页
     ·分子生物学诊断方法第18页
     ·抗体检测方法第18-19页
     ·免疫学诊断方法第19-23页
     ·其它方法第23-24页
第2章 梅花鹿IFN-Y的克隆、原核表达及生物活性分析第24-39页
   ·研究目的与意义第24页
   ·材料与方法第24-34页
     ·实验材料第24-27页
     ·试验方法第27-34页
   ·结果与分析第34-37页
     ·CerIFN-Y基因的克隆与鉴定第34-35页
     ·CerIFN-Y的生物信息学分析第35-36页
     ·重组CerIFN-Y表达产物SDS-PAGE分析第36页
     ·重组CerIFN-Y抗VSV活性的测定第36-37页
     ·重组CerIFN-Y抗IBRV活性的测定第37页
     ·CerIFN-Y理化特性分析第37页
   ·讨论第37-38页
     ·CerIFN-YRNA的提取第37页
     ·CerIFN-Y基因原核表达条件第37页
     ·CerIFN-Y基因生物信息学分析第37-38页
     ·CerIFN-Y应用前景第38页
   ·小结第38-39页
第3章 梅花鹿Y干扰素在不同真核细胞系中稳定表达的研究第39-46页
   ·研究目的意义第39页
   ·材料与方法第39-42页
     ·实验材料第39-41页
     ·试验方法第41-42页
   ·结果与分析第42-44页
     ·重组CerIFN-Y的表达与鉴定第42页
     ·间接IFA检测CerIFN-γ在MDBK/BHK-21细胞系中表达第42-43页
     ·间接ELISA法检测CerIFN-Y在动物哺乳细胞系中的表达第43-44页
   ·讨论第44-46页
     ·真核表达载体为pCI-neo的特点第44页
     ·组重质粒真核表达与鉴定第44-45页
     ·哺乳细胞系的选筛第45-46页
第4章 抗CERIFN-Y单克隆抗体和多克隆抗体制备的研究第46-58页
   ·研究目的意义第46页
   ·材料与方法第46-53页
     ·材料第46-48页
     ·试验方法第48-53页
   ·结果与分析第53-56页
     ·免疫动物血清效价第53页
     ·细胞融合第53页
     ·杂交瘤细胞的筛选第53页
     ·小鼠腹水单克隆抗体效价的测定第53-54页
     ·多克隆抗体的生产和效价测定第54页
     ·杂交瘤细胞染色体数的检测第54页
     ·CerIFN-Y单克隆抗体的特异性第54-55页
     ·重组CerIFN-Y抗病毒活性阻断试验检测McAb的特异性第55-56页
   ·讨论第56-57页
     ·动物的免疫第56页
     ·细胞融合第56页
     ·杂交瘤阳性细胞株的筛选第56-57页
     ·杂交瘤细胞的亚克隆第57页
     ·杂交瘤细胞的冻存和复苏第57页
   ·小结第57-58页
第5章 梅花鹿IFN-Y双抗体夹心间接ELISA方法建立及临床应用第58-65页
   ·研究目的和意义第58页
   ·材料与方法第58-61页
     ·材料第58页
     ·方法第58-61页
   ·结果与分析第61-64页
     ·IFN-Y夹心ELISA检测IFN-Y灵敏度与特异性第61-62页
     ·梅花鹿IFN-Y体外诱导率第62-63页
     ·梅花鹿IFN-Y体外释放法诊断结核病的灵敏度与特异性第63页
     ·结果的判定第63-64页
   ·小结第64-65页
第6章 结论第65-66页
参考文献第66-73页
附录第73-75页
致谢第75页

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