摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-23页 |
·抗坏血酸的化学特性 | 第10-11页 |
·抗坏血酸的生理功能以及它的合成与降解 | 第11-18页 |
·植物体内抗坏血酸的生理功能 | 第11-13页 |
·AsA 在生物的体内的合成途径 | 第13-14页 |
·AsA 的氧化降解与再生 | 第14-18页 |
·山梨醇以及山梨醇脱氢酶 | 第18-21页 |
·山梨醇的功能 | 第18-19页 |
·蔷薇科植物体内山梨醇代谢途径 | 第19页 |
·山梨醇脱氢酶(Sorbitol dehydrogenase,SDH) | 第19-21页 |
·研究目的与意义 | 第21-23页 |
第二章 苹果SDH1 基因载体的构建以及根癌农杆菌介导法转化番茄 | 第23-31页 |
·材料 | 第23-24页 |
·质粒与菌株 | 第23页 |
·植物材料 | 第23页 |
·酶与生化试剂 | 第23页 |
·PCR 引物 | 第23页 |
·培养基与抗生素配方 | 第23-24页 |
·主要仪器 | 第24页 |
·实验方法 | 第24-27页 |
·苹果SDH1 基因植物表达载体的构建 | 第24-25页 |
·pWR-SDH1 重组载体的鉴定 | 第25-26页 |
·植物表达载体PWR-SDH1 转化农杆菌EHA105 感受态细胞及检测 | 第26页 |
·农杆菌介导法转化番茄 | 第26-27页 |
·抗性芽的扩繁 | 第27页 |
·转基因植株的PCR 检测 | 第27页 |
·结果与分析 | 第27-31页 |
·植物表达载体pWR-SDH1 的构建 | 第27-28页 |
·植物表达载体pWR-SDH1 的鉴定 | 第28页 |
·植物表达载体pWR-SDH1 转化农杆菌 | 第28-29页 |
·抗性植株的获得 | 第29页 |
·目的基因PCR 检测 | 第29-31页 |
第三章 猕猴桃IDH 基因的克隆以及序列分析 | 第31-44页 |
·试验材料 | 第31页 |
·植物材料 | 第31页 |
·菌株、质粒及试剂 | 第31页 |
·酶以及生化试剂 | 第31页 |
·主要仪器 | 第31页 |
·试验方法 | 第31-35页 |
·引物设计 | 第31-32页 |
·猕猴桃果实总RNA 的提取 | 第32页 |
·反转录 | 第32页 |
·PCR 扩增 | 第32-33页 |
·PCR 扩增产物的回收 | 第33页 |
·目的DNA 与pMD18-T vector 的连接 | 第33页 |
·DH5α感受态细胞的制备 | 第33-34页 |
·重组质粒导入大肠杆菌感受态细胞 | 第34页 |
·阳性克隆的筛选和鉴定 | 第34页 |
·质粒提取 | 第34-35页 |
·基因序列的测定 | 第35页 |
·结果与分析 | 第35-44页 |
·IDH 基因cDNA 全长的获得 | 第35-36页 |
·IDH 基因重组质粒的鉴定 | 第36-37页 |
·猕猴桃IDH 基因的测序结果及生物信息学分析 | 第37-44页 |
第四章 猕猴桃IDH 基因载体的构建以及根癌农杆菌介导法转化番茄与苹果 | 第44-53页 |
·材料 | 第44-45页 |
·质粒与菌株 | 第44页 |
·植物材料 | 第44页 |
·酶与生化试剂 | 第44页 |
·PCR 引物 | 第44页 |
·培养基与抗生素配方 | 第44-45页 |
·主要仪器 | 第45页 |
·实验方法 | 第45-47页 |
·猕猴桃IDH 基因植物表达载体的构建 | 第45-46页 |
·pWR-IDH 的鉴定 | 第46页 |
·植物表达载体PWR-IDH 转化农杆菌EHA105 感受态细胞及检测 | 第46-47页 |
·农杆菌介导法转化番茄 | 第47页 |
·抗性芽的扩繁 | 第47页 |
·转基因植株的PCR 检测 | 第47页 |
·结果与分析 | 第47-53页 |
·植物表达载体pWR-IDH 的构建 | 第47-48页 |
·植物表达载体pWR-IDH 的鉴定 | 第48-49页 |
·植物表达载体pWR-IDH 转化农杆菌 | 第49页 |
·抗性植株的获得 | 第49-51页 |
·目的基因PCR 检测 | 第51-53页 |
第五章 讨论 | 第53-55页 |
·农杆菌介导法转化番茄的探讨 | 第53页 |
·IDH 基因的探讨 | 第53页 |
·IDH 基因与SDH1 基因关系的探讨 | 第53-55页 |
第六章 结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
作者简介 | 第63页 |