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甘蓝型油菜矮杆基因Bnrga-ds的克隆和功能分析

摘要第1-9页
Abstract第9-12页
缩略语表第12-13页
第一章 文献综述第13-31页
   ·禾本科作物矮杆突变体的遗传研究和应用第13-15页
     ·水稻矮杆突变体的遗传研究和应用第13-14页
     ·小麦矮杆突变体的遗传研究和应用第14-15页
   ·油菜矮杆突变体遗传研究现状第15-17页
   ·高等植物矮杆性状的机理研究第17-29页
     ·赤霉素与植物矮化第17-24页
       ·GA生物合成途径与植物矮化第17-19页
       ·GA信号转导途径与植物矮化第19-24页
     ·油菜素内酯和植物矮化第24-27页
       ·BR生物合成和植物矮化第25-27页
       ·BR信号转导途径和植物矮化第27页
     ·生长素与植物矮化第27-29页
       ·生长素生物合成和植物矮化第27-28页
       ·束缚型生长素的形成和植物矮化第28页
       ·生长素的极性运输与植物矮化第28-29页
       ·生长素信号转导途径和植物矮化第29页
   ·本研究的目的和意义第29-31页
第二章 材料和方法第31-45页
   ·植物材料第31页
   ·矮杆基因的定位第31-34页
     ·定位群体的构建第31页
     ·基因组DNA的提取第31-32页
     ·BSA法和SSR分析第32-33页
     ·PAGE凝胶制备和电泳检测第33页
     ·SCAR标记SCM07的检测第33-34页
     ·数据分析第34页
   ·候选基因的分析第34-37页
     ·候选基因转录水平的分析第34-35页
       ·总RNA的提取第34页
       ·cDNA的合成第34-35页
       ·半定量RT-PCR第35页
     ·候选基因编码序列比对第35-37页
       ·编码序列的扩增第35页
       ·DNA片段的回收、克隆第35-36页
       ·感受态细胞的电击转化第36页
       ·质粒的提取、检测和测序第36-37页
       ·甘蓝型油菜不同品种BnRGA编码序列的测定第37页
   ·候选基因的转化验证第37-39页
     ·转化载体的构建第37-39页
     ·拟南芥的遗传转化和阳性植株筛选第39页
     ·转基因拟南芥的筛选和表型观察第39页
   ·定点突变第39-40页
   ·酵母双杂交实验第40-43页
     ·酵母双杂交的载体构建第40-41页
     ·酿酒酵母感受态细胞的制备第41-42页
     ·酵母菌的转化第42-43页
   ·亚细胞定位第43页
     ·转化载体的构建第43页
     ·亚细胞定位观察第43页
   ·甘蓝型油菜的遗传转化第43-45页
     ·甘蓝型油菜的转化方法第43-44页
     ·阳性植株的PCR检测第44页
     ·阳性植株花器官的GUS染色第44-45页
第三章 结果和分析第45-66页
   ·突变体ds-1矮杆性状的遗传分析第45-46页
   ·DS-1基因的分子标记定位第46-50页
     ·SSR标记的筛选第46-48页
     ·SCM07的检测第48-49页
     ·DS-1连锁图谱的构建第49-50页
   ·BnRGA和Bnrga-ds转录水平的比较第50页
   ·BnRGA和Bnrga-ds的序列比对第50-55页
     ·BnRGA和Bnrga-ds的DNA序列比对第50-53页
     ·BnRGA和Bnrga-ds氨基酸序列比对第53-55页
   ·Bnrga-ds转化野生型拟南芥第55-58页
     ·转化载体的获得第56-57页
     ·Bnrga-ds转化对野生型拟南芥的影响第57-58页
   ·Atrga-ds转化野生型拟南芥第58-60页
   ·VHYNP模体中Pro突变对Bnrga-ds与GID1相互作用的影响第60-62页
   ·BnRGA和Bnrga-ds的亚细胞定位第62-63页
   ·Bnrga-ds转化甘蓝型油菜第63-66页
第四章 讨论第66-71页
   ·Bnrga-ds突变位点的意义第66-67页
   ·VHYNP模体中Pro突变对DELLA蛋白与GID1相互作用的影响第67-68页
   ·甘蓝型油菜矮杆突变体ds-1与白菜矮杆突变体dwf2的矮化机理比较第68-69页
   ·甘蓝型油菜矮杆突变体ds-1的应用第69-71页
参考文献第71-85页
致谢第85-86页
附录第86-89页
 附录1:主要培养基配方第86-88页
 附录2:攻读博士期间发表的论文第88-89页

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