| 致谢 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 英文缩略词说明 | 第10-12页 |
| 引言 | 第12-18页 |
| 1 材料 | 第18-22页 |
| ·试剂与仪器 | 第18页 |
| ·PCR引物 | 第18-19页 |
| ·原核表达的试剂及其配制 | 第19-20页 |
| ·SDS-PAGE、Western Blot检测的试剂配制 | 第20-21页 |
| ·抗体纯化以及抗体检测的材料 | 第21页 |
| ·免疫组化材料 | 第21-22页 |
| 2 方法 | 第22-39页 |
| ·EGFR及EGFRvⅢ基因片段构建 | 第22-24页 |
| ·重组pET30a/EGFR、pET30a/EGFRvⅢ质粒的构建(图1,图2) | 第24-28页 |
| ·EGFRvⅢ胞外区(E33Ⅺ及E34Ⅺ)片段构建 | 第28-30页 |
| ·重组pET30a/E33Ⅺ及pET30a/E34Ⅺ质粒的构建(图3) | 第30-33页 |
| ·重组质粒pET30a/EGFR、pET30a/EGFRvⅢ在大肠杆菌中的表达,鉴定及纯化 | 第33-36页 |
| ·重组质粒pET30a/E33Ⅺ、pET30a/E34Ⅺ在大肠杆菌中的表达,鉴定及纯化 | 第36页 |
| ·EGFRvⅢ抗血清制备 | 第36页 |
| ·EGFRvⅢ多克隆抗体纯化及浓度测定 | 第36-37页 |
| ·EGFRvⅢ多克隆抗体最优稀释度测定 | 第37页 |
| ·EGFRvⅢ多克隆抗体特异性测定 | 第37-39页 |
| 3 结果 | 第39-58页 |
| ·pET30a/EGFRvⅢ、pET30a/EGFR原核表达载体的构建及原核表达 | 第39-44页 |
| ·pET30a/E33Ⅺ、pET30a/E34Ⅺ原核表达载体的构建及原核表达 | 第44-51页 |
| ·EGFRvⅢ多克隆抗体纯化 | 第51-52页 |
| ·EGFRvⅢ多克隆抗体最优稀释度测定 | 第52-53页 |
| ·EGFRvⅢ多克隆抗体的特异性 | 第53-58页 |
| 4 讨论 | 第58-62页 |
| ·载体构建 | 第58-59页 |
| ·原核表达 | 第59-60页 |
| ·多克隆抗体的纯化及特异性 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-65页 |
