| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-14页 |
| 1. 启动子结构和功能的研究现状 | 第8-10页 |
| ·启动子功能和结构研究的策略 | 第8-9页 |
| ·转化分析 | 第8页 |
| ·瞬间表达分析 | 第8页 |
| ·点突变分析 | 第8-9页 |
| ·RNA 干涉技术 | 第9页 |
| ·组成型启动子的功能和结构特征 | 第9页 |
| ·组织特异型启动子的功能和结构 | 第9页 |
| ·诱导型启动子的功能和结构 | 第9-10页 |
| 2.启动子克隆方法的研究进展 | 第10-12页 |
| ·利用启动子探针载体筛选启动子 | 第10页 |
| ·利用PCR 技术克隆启动子 | 第10-11页 |
| ·环状PCR | 第11页 |
| ·I-PCR | 第11页 |
| ·P-PCR | 第11页 |
| ·YADE 法 | 第11-12页 |
| ·TAIL-PCR | 第12页 |
| 3. 本研究的意义、内容与技术路线 | 第12-14页 |
| ·研究背景、目的与意义 | 第12-13页 |
| ·研究的内容 | 第13页 |
| ·技术路线 | 第13-14页 |
| 第二章 目的片段的克隆和序列分析 | 第14-27页 |
| 1. 材料和方法 | 第14-20页 |
| ·实验材料 | 第14-15页 |
| ·植物材料 | 第14页 |
| ·植物材料的生态习性 | 第14页 |
| ·植物材料的坪用特性 | 第14页 |
| ·质粒与菌株 | 第14-15页 |
| ·实验方法 | 第15-20页 |
| ·植物总DNA 的提取 | 第15-16页 |
| ·制备感受态细胞大肠杆菌的Inoue 方法 | 第16-17页 |
| ·感受态细胞的效价测定 | 第17-18页 |
| ·目的片段的克隆 | 第18-20页 |
| ·引物设计的原则 | 第18页 |
| ·PCR 扩增反应 | 第18-19页 |
| ·电泳目的基因片段的回收 | 第19页 |
| ·连接反应 | 第19页 |
| ·感受态细胞的转化 | 第19-20页 |
| 2. 结果与分析 | 第20-24页 |
| ·提取植物总DNA | 第20页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第20-21页 |
| ·感受态细胞的效价测定 | 第21页 |
| ·目的片段的克隆 | 第21-22页 |
| ·测序结果与分析 | 第22-24页 |
| 3. 讨论 | 第24-27页 |
| ·植物总DNA 的提取 | 第24-25页 |
| ·制备大肠杆菌的感受态细胞 | 第25页 |
| ·感受态细胞的效价测定 | 第25页 |
| ·目的片段的克隆 | 第25-26页 |
| ·PCR 扩增反应 | 第25-26页 |
| ·连接及转化反应 | 第26页 |
| ·研究展望 | 第26-27页 |
| 第三章 目的片段的功能鉴定 | 第27-37页 |
| 1.G FP 报告基因的瞬时表达 | 第27-33页 |
| ·材料和方法 | 第27-31页 |
| ·材料 | 第27页 |
| ·受体材料和试剂 | 第27页 |
| ·载体和菌种 | 第27页 |
| ·培养基 | 第27页 |
| ·基因枪转化法 | 第27-31页 |
| ·两种启动子分别驱动的GFP 基因植物表达载体的构建 | 第27-28页 |
| ·金粉DNA 复合体的制备 | 第28-30页 |
| ·受体材料的处理 | 第30页 |
| ·受体材料的轰击 | 第30页 |
| ·洋葱表皮细胞中GFP 基因瞬时表达的检测 | 第30-31页 |
| ·结果与分析 | 第31-32页 |
| ·目的片段驱动的GFP 基因植物表达载体的构建 | 第31页 |
| ·GFP 基因的瞬时表达 | 第31-32页 |
| ·讨论 | 第32-33页 |
| 2.G US 报告基因的瞬时表达 | 第33-37页 |
| ·材料和方法 | 第33-35页 |
| ·材料 | 第33页 |
| ·受体材料和试剂 | 第33页 |
| ·载体和菌种 | 第33页 |
| ·培养基 | 第33页 |
| ·细菌培养基 | 第33页 |
| ·受体材料培养基 | 第33页 |
| ·基因枪转化法 | 第33-35页 |
| ·两种启动子分别驱动的GUS 基因植物表达载体的构建 | 第33-34页 |
| ·洋葱表皮细胞中GUS 基因的活性染色 | 第34-35页 |
| ·结果与分析 | 第35页 |
| ·目的片段驱动的GUS 基因植物表达载体的构建 | 第35页 |
| ·GUS 基因活性染色分析 | 第35页 |
| ·讨论 | 第35-37页 |
| 第四章 结论 | 第37-38页 |
| 1. 结缕草 Rd29A 基因启动子的克隆 | 第37页 |
| 2. Rd29A 基因启动子的功能鉴定 | 第37-38页 |
| ·GFP 基因的瞬时表达 | 第37页 |
| ·GUS 基因的瞬时表达 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-42页 |
| 附图I | 第42-43页 |
| 附图II | 第43-44页 |
| 个人简介 | 第44-45页 |
| 导师简介 | 第45-46页 |
| 获得成果目录清单 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47页 |