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绵羊肺炎支原体PCR快速检测方法的建立及其P40蛋白的抗原性研究

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
0. 引言第9-18页
1. 实验材料第18-21页
   ·菌种及病料第18页
   ·试验动物第18页
   ·主要试剂第18-19页
     ·主要生物学试剂第18页
     ·主要化学试剂第18-19页
   ·主要仪器设备第19-21页
2. 方法与程序第21-34页
   ·绵羊肺炎支原体的复壮培养第21页
     ·培养基的制备第21页
     ·绵羊肺炎支原体的复壮与增值扩培第21页
   ·绵羊肺炎支原体PCR检测方法的建立第21-25页
     ·试剂配制第21-22页
     ·菌体的收集第22页
     ·支原体DNA的提取第22-23页
     ·测定NDA的纯度第23页
     ·临床标本的处理及DNA提取第23页
     ·PCR引物的设计与合成第23-24页
     ·PCR扩增体系第24-25页
     ·PCR扩增产物的分析第25页
     ·PCR特异性试验第25页
     ·PCR敏感性试验第25页
     ·PCR对临床样本的检测第25页
   ·绵羊肺炎支原体菌体全蛋白及其抗血清的制备第25-27页
   ·绵羊肺炎支原体菌体全蛋白的SDS-PAGE及免疫印迹第27-31页
   ·P40蛋白的回收第31-32页
   ·P40蛋白抗原性研究第32-34页
3. 结果与分析第34-43页
   ·绵羊肺炎支原体PCR检测方法的建立第34-37页
     ·DNA纯度测定第34页
     ·Y98与Y-goat传代培养液进行PCR检测第34页
     ·PCR扩增产物分析结果第34-35页
     ·PCR特异性试验结果第35页
     ·PCR试验的敏感性第35-36页
     ·临床样本的检测结果第36-37页
   ·兔抗绵羊支原体抗体效价的测定结果第37页
   ·绵羊肺炎支原体蛋白的SDS-PAGE及免疫印迹分析结果第37-40页
     ·Y98、Y-goat两种种支原体菌体蛋白的SDS-PAGE比较分析结果第37-38页
     ·标准分子量蛋白SDS-PAGE结果第38-39页
     ·绵羊肺炎支原体蛋白免疫印迹结果第39-40页
   ·回收后P40蛋白的SDS-PAGE结果第40-41页
   ·P40抗原最适包被浓度的确定第41页
   ·免疫鼠抗P40蛋白血清效价的检测第41-43页
4 讨论第43-48页
5 结论第48-49页
参考文献第49-54页
在读期间发表论文第54-55页
作者简历第55-56页
致谢第56-57页
附录第57-59页

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