摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
0. 引言 | 第9-18页 |
1. 实验材料 | 第18-21页 |
·菌种及病料 | 第18页 |
·试验动物 | 第18页 |
·主要试剂 | 第18-19页 |
·主要生物学试剂 | 第18页 |
·主要化学试剂 | 第18-19页 |
·主要仪器设备 | 第19-21页 |
2. 方法与程序 | 第21-34页 |
·绵羊肺炎支原体的复壮培养 | 第21页 |
·培养基的制备 | 第21页 |
·绵羊肺炎支原体的复壮与增值扩培 | 第21页 |
·绵羊肺炎支原体PCR检测方法的建立 | 第21-25页 |
·试剂配制 | 第21-22页 |
·菌体的收集 | 第22页 |
·支原体DNA的提取 | 第22-23页 |
·测定NDA的纯度 | 第23页 |
·临床标本的处理及DNA提取 | 第23页 |
·PCR引物的设计与合成 | 第23-24页 |
·PCR扩增体系 | 第24-25页 |
·PCR扩增产物的分析 | 第25页 |
·PCR特异性试验 | 第25页 |
·PCR敏感性试验 | 第25页 |
·PCR对临床样本的检测 | 第25页 |
·绵羊肺炎支原体菌体全蛋白及其抗血清的制备 | 第25-27页 |
·绵羊肺炎支原体菌体全蛋白的SDS-PAGE及免疫印迹 | 第27-31页 |
·P40蛋白的回收 | 第31-32页 |
·P40蛋白抗原性研究 | 第32-34页 |
3. 结果与分析 | 第34-43页 |
·绵羊肺炎支原体PCR检测方法的建立 | 第34-37页 |
·DNA纯度测定 | 第34页 |
·Y98与Y-goat传代培养液进行PCR检测 | 第34页 |
·PCR扩增产物分析结果 | 第34-35页 |
·PCR特异性试验结果 | 第35页 |
·PCR试验的敏感性 | 第35-36页 |
·临床样本的检测结果 | 第36-37页 |
·兔抗绵羊支原体抗体效价的测定结果 | 第37页 |
·绵羊肺炎支原体蛋白的SDS-PAGE及免疫印迹分析结果 | 第37-40页 |
·Y98、Y-goat两种种支原体菌体蛋白的SDS-PAGE比较分析结果 | 第37-38页 |
·标准分子量蛋白SDS-PAGE结果 | 第38-39页 |
·绵羊肺炎支原体蛋白免疫印迹结果 | 第39-40页 |
·回收后P40蛋白的SDS-PAGE结果 | 第40-41页 |
·P40抗原最适包被浓度的确定 | 第41页 |
·免疫鼠抗P40蛋白血清效价的检测 | 第41-43页 |
4 讨论 | 第43-48页 |
5 结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-54页 |
在读期间发表论文 | 第54-55页 |
作者简历 | 第55-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
附录 | 第57-59页 |