摘要 | 第1-15页 |
ABSTRACT | 第15-20页 |
英文缩略语 | 第20-21页 |
第一篇 文献综述 | 第21-51页 |
犬瘟热病毒研究进展 | 第21-40页 |
1 病原特性 | 第21-26页 |
·CDV基因组RNA | 第21页 |
·病毒结构蛋白 | 第21-25页 |
·CDV生物学特性 | 第25-26页 |
2 诊断技术 | 第26-32页 |
·病毒分离与鉴定 | 第27页 |
·包涵体检查法 | 第27-28页 |
·离子捕获电镜检查法 | 第28页 |
·组织学检查 | 第28页 |
·免疫学检测 | 第28-30页 |
·分子生物学诊断技术 | 第30-32页 |
·展望 | 第32页 |
3 CDV免疫学 | 第32-35页 |
·体液免疫 | 第32-33页 |
·细胞免疫 | 第33-34页 |
·免疫调节机制的研究 | 第34页 |
·免疫抑制 | 第34-35页 |
4 犬瘟热疫苗 | 第35-38页 |
·甲醛灭活疫苗 | 第35-36页 |
·细胞培养弱毒疫苗 | 第36页 |
·基因工程疫苗 | 第36-38页 |
·展望 | 第38页 |
5 CDV与人类疾病 | 第38-40页 |
参考文献 | 第40-51页 |
第二篇 实验研究 | 第51-137页 |
第一章 貂、狐、貉群犬瘟热临床病理学研究 | 第51-61页 |
1 材料与方法 | 第51-52页 |
·病例来源 | 第51-52页 |
·主要试剂 | 第52页 |
·主要设备 | 第52页 |
·实验设计 | 第52页 |
2 结果 | 第52-59页 |
·流行病学调查 | 第52页 |
·临床症状 | 第52-53页 |
·剖检变化 | 第53-57页 |
·病理组织学观察 | 第57-59页 |
3 讨论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-61页 |
第二章 貂、狐、貉源犬瘟热病毒的分离鉴定与生物学特性研究 | 第61-75页 |
1 材料与方法 | 第62-65页 |
·细胞及主要试剂 | 第62页 |
·参考毒株 | 第62页 |
·红细胞 | 第62页 |
·试验动物 | 第62页 |
·病料及病料处理 | 第62页 |
·引物设计与合成 | 第62-63页 |
·病毒分离 | 第63页 |
·病毒粒子形态观察 | 第63页 |
·清洁级小白乳鼠脑内接种感染实验 | 第63页 |
·RT-PCR鉴定 | 第63-64页 |
·红细胞凝集谱试验 | 第64页 |
·病毒TCID_(50)测定 | 第64页 |
·理化特性鉴定 | 第64页 |
·乳鼠半数致死量(LD_(50))测定 | 第64页 |
·对实验兔感染实验 | 第64-65页 |
·对貉的致病力实验 | 第65页 |
2 结果 | 第65-72页 |
·细胞病变观察 | 第65-66页 |
·电镜观察 | 第66-67页 |
·RT-PCR扩增 | 第67页 |
·红细胞凝集谱 | 第67页 |
·TCID_(50)测定 | 第67页 |
·理化特性鉴定 | 第67-68页 |
·清洁级乳鼠脑内接种试验与乳鼠半数致死量(LD_(50))测定 | 第68-69页 |
·实验兔感染实验 | 第69-70页 |
·对貉的致病力实验 | 第70-72页 |
3 讨论 | 第72-74页 |
参考文献 | 第74-75页 |
第三章 貂、狐、貉源犬瘟热病毒分离株H和N基因序列分析 | 第75-93页 |
1 材料与方法 | 第76-79页 |
·菌种、质粒 | 第76页 |
·毒株、细胞 | 第76页 |
·主要试剂、设备 | 第76页 |
·引物的设计与合成 | 第76-77页 |
·病毒的增殖 | 第77页 |
·总RNA提取与RT-PCR扩增 | 第77页 |
·目的基因的克隆与鉴定 | 第77-78页 |
·目的基因的核苷酸序列测定与系统发育进化树分析 | 第78页 |
·引用的毒株核酸序列GENEBANK号 | 第78-79页 |
2 结果 | 第79-89页 |
·CDV毒株H基因克隆和鉴定 | 第79-80页 |
·CDV毒株N基因克隆和鉴定 | 第80-81页 |
·H基因核苷酸及其推导的氨基酸序列同源性比较 | 第81-83页 |
·CDV毒株H基因系统进化树 | 第83-84页 |
·各毒株N基因的核苷酸及其推导的氨基酸序列同源性比较 | 第84-88页 |
·CDV毒株N基因系统进化树 | 第88-89页 |
3 讨论 | 第89-92页 |
参考文献 | 第92-93页 |
第四章 犬瘟热病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的研究 | 第93-107页 |
1 材料 | 第94-95页 |
·病毒株、细胞 | 第94页 |
·被检样品 | 第94页 |
·实验动物 | 第94页 |
·主要试剂和设备 | 第94-95页 |
2 方法 | 第95-97页 |
·病毒培养 | 第95页 |
·样品的准备 | 第95页 |
·病毒RNA的提取 | 第95页 |
·引物和探针设计 | 第95-96页 |
·TAQMAN REAL-TIME荧光RT-PCR方法的建立 | 第96页 |
·定量用标准品的制备 | 第96页 |
·特异性试验 | 第96页 |
·敏感性试验 | 第96页 |
·重复性试验 | 第96页 |
·常规RT-PCR | 第96-97页 |
·BIOINDIST试剂盒检测 | 第97页 |
·三种方法检测临床样品的比较 | 第97页 |
3 结果 | 第97-102页 |
·反应体系的优化 | 第97-98页 |
·TAQMAN RT-PCR重复性 | 第98页 |
·特异性 | 第98-100页 |
·敏感性 | 第100页 |
·TAQMAN RT-PCR与其它检测方法比较 | 第100-102页 |
4 讨论 | 第102-104页 |
参考文献 | 第104-107页 |
第五章 貉源犬瘟热病毒H、F和N基因真核表达质粒的构建与鉴定 | 第107-121页 |
1 材料 | 第108页 |
·毒株与细胞 | 第108页 |
·菌株、质粒和载体 | 第108页 |
·主要试剂 | 第108页 |
·兔抗CDV阳性血清 | 第108页 |
2 方法 | 第108-112页 |
·病毒培养 | 第108页 |
·病毒基因组总RNA的提取 | 第108-109页 |
·RT-PCR | 第109-110页 |
·PCR产物的纯化与回收 | 第110页 |
·CDVF、H、N1和N2重组T载体的克隆与测序 | 第110页 |
·H、F、N1和N2基因重组真核表达质粒的构建 | 第110-111页 |
·重组真核表达质粒的表达与鉴定 | 第111-112页 |
3 结果 | 第112-119页 |
·H、F和N蛋白免疫原基因的扩增与鉴定结果 | 第112-117页 |
·因免疫质粒的构建与鉴定 | 第117-118页 |
·WESTERN BLOT分析重组真核质粒的表达 | 第118-119页 |
4 讨论 | 第119-120页 |
参考文献 | 第120-121页 |
第六章 貉源犬瘟热病毒H、F和N基因表达质粒DNA免疫保护效率研究 | 第121-137页 |
1 材料与方法 | 第122-125页 |
·质粒、疫苗、毒株及细胞 | 第122页 |
·实验动物 | 第122页 |
·主要试剂 | 第122页 |
·主要设备 | 第122-123页 |
·小鼠免疫试验 | 第123页 |
·貉免疫保护试验 | 第123页 |
·统计学分析 | 第123-125页 |
2 结果 | 第125-133页 |
·小鼠免疫试验结果 | 第125-126页 |
·貉免疫保护试验 | 第126-133页 |
3 讨论 | 第133-135页 |
参考文献 | 第135-137页 |
全文总结 | 第137-139页 |
致谢 | 第139-141页 |
发表文章 | 第141页 |