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貂、狐、貉源犬瘟热病毒分离鉴定与分子生物学特性研究

摘要第1-15页
ABSTRACT第15-20页
英文缩略语第20-21页
第一篇 文献综述第21-51页
 犬瘟热病毒研究进展第21-40页
  1 病原特性第21-26页
   ·CDV基因组RNA第21页
   ·病毒结构蛋白第21-25页
   ·CDV生物学特性第25-26页
  2 诊断技术第26-32页
   ·病毒分离与鉴定第27页
   ·包涵体检查法第27-28页
   ·离子捕获电镜检查法第28页
   ·组织学检查第28页
   ·免疫学检测第28-30页
   ·分子生物学诊断技术第30-32页
   ·展望第32页
  3 CDV免疫学第32-35页
   ·体液免疫第32-33页
   ·细胞免疫第33-34页
   ·免疫调节机制的研究第34页
   ·免疫抑制第34-35页
  4 犬瘟热疫苗第35-38页
   ·甲醛灭活疫苗第35-36页
   ·细胞培养弱毒疫苗第36页
   ·基因工程疫苗第36-38页
   ·展望第38页
  5 CDV与人类疾病第38-40页
 参考文献第40-51页
第二篇 实验研究第51-137页
 第一章 貂、狐、貉群犬瘟热临床病理学研究第51-61页
  1 材料与方法第51-52页
   ·病例来源第51-52页
   ·主要试剂第52页
   ·主要设备第52页
   ·实验设计第52页
  2 结果第52-59页
   ·流行病学调查第52页
   ·临床症状第52-53页
   ·剖检变化第53-57页
   ·病理组织学观察第57-59页
  3 讨论第59-60页
  参考文献第60-61页
 第二章 貂、狐、貉源犬瘟热病毒的分离鉴定与生物学特性研究第61-75页
  1 材料与方法第62-65页
   ·细胞及主要试剂第62页
   ·参考毒株第62页
   ·红细胞第62页
   ·试验动物第62页
   ·病料及病料处理第62页
   ·引物设计与合成第62-63页
   ·病毒分离第63页
   ·病毒粒子形态观察第63页
   ·清洁级小白乳鼠脑内接种感染实验第63页
   ·RT-PCR鉴定第63-64页
   ·红细胞凝集谱试验第64页
   ·病毒TCID_(50)测定第64页
   ·理化特性鉴定第64页
   ·乳鼠半数致死量(LD_(50))测定第64页
   ·对实验兔感染实验第64-65页
   ·对貉的致病力实验第65页
  2 结果第65-72页
   ·细胞病变观察第65-66页
   ·电镜观察第66-67页
   ·RT-PCR扩增第67页
   ·红细胞凝集谱第67页
   ·TCID_(50)测定第67页
   ·理化特性鉴定第67-68页
   ·清洁级乳鼠脑内接种试验与乳鼠半数致死量(LD_(50))测定第68-69页
   ·实验兔感染实验第69-70页
   ·对貉的致病力实验第70-72页
  3 讨论第72-74页
  参考文献第74-75页
 第三章 貂、狐、貉源犬瘟热病毒分离株H和N基因序列分析第75-93页
  1 材料与方法第76-79页
   ·菌种、质粒第76页
   ·毒株、细胞第76页
   ·主要试剂、设备第76页
   ·引物的设计与合成第76-77页
   ·病毒的增殖第77页
   ·总RNA提取与RT-PCR扩增第77页
   ·目的基因的克隆与鉴定第77-78页
   ·目的基因的核苷酸序列测定与系统发育进化树分析第78页
   ·引用的毒株核酸序列GENEBANK号第78-79页
  2 结果第79-89页
   ·CDV毒株H基因克隆和鉴定第79-80页
   ·CDV毒株N基因克隆和鉴定第80-81页
   ·H基因核苷酸及其推导的氨基酸序列同源性比较第81-83页
   ·CDV毒株H基因系统进化树第83-84页
   ·各毒株N基因的核苷酸及其推导的氨基酸序列同源性比较第84-88页
   ·CDV毒株N基因系统进化树第88-89页
  3 讨论第89-92页
  参考文献第92-93页
 第四章 犬瘟热病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的研究第93-107页
  1 材料第94-95页
   ·病毒株、细胞第94页
   ·被检样品第94页
   ·实验动物第94页
   ·主要试剂和设备第94-95页
  2 方法第95-97页
   ·病毒培养第95页
   ·样品的准备第95页
   ·病毒RNA的提取第95页
   ·引物和探针设计第95-96页
   ·TAQMAN REAL-TIME荧光RT-PCR方法的建立第96页
   ·定量用标准品的制备第96页
   ·特异性试验第96页
   ·敏感性试验第96页
   ·重复性试验第96页
   ·常规RT-PCR第96-97页
   ·BIOINDIST试剂盒检测第97页
   ·三种方法检测临床样品的比较第97页
  3 结果第97-102页
   ·反应体系的优化第97-98页
   ·TAQMAN RT-PCR重复性第98页
   ·特异性第98-100页
   ·敏感性第100页
   ·TAQMAN RT-PCR与其它检测方法比较第100-102页
  4 讨论第102-104页
  参考文献第104-107页
 第五章 貉源犬瘟热病毒H、F和N基因真核表达质粒的构建与鉴定第107-121页
  1 材料第108页
   ·毒株与细胞第108页
   ·菌株、质粒和载体第108页
   ·主要试剂第108页
   ·兔抗CDV阳性血清第108页
  2 方法第108-112页
   ·病毒培养第108页
   ·病毒基因组总RNA的提取第108-109页
   ·RT-PCR第109-110页
   ·PCR产物的纯化与回收第110页
   ·CDVF、H、N1和N2重组T载体的克隆与测序第110页
   ·H、F、N1和N2基因重组真核表达质粒的构建第110-111页
   ·重组真核表达质粒的表达与鉴定第111-112页
  3 结果第112-119页
   ·H、F和N蛋白免疫原基因的扩增与鉴定结果第112-117页
   ·因免疫质粒的构建与鉴定第117-118页
   ·WESTERN BLOT分析重组真核质粒的表达第118-119页
  4 讨论第119-120页
  参考文献第120-121页
 第六章 貉源犬瘟热病毒H、F和N基因表达质粒DNA免疫保护效率研究第121-137页
  1 材料与方法第122-125页
   ·质粒、疫苗、毒株及细胞第122页
   ·实验动物第122页
   ·主要试剂第122页
   ·主要设备第122-123页
   ·小鼠免疫试验第123页
   ·貉免疫保护试验第123页
   ·统计学分析第123-125页
  2 结果第125-133页
   ·小鼠免疫试验结果第125-126页
   ·貉免疫保护试验第126-133页
  3 讨论第133-135页
  参考文献第135-137页
全文总结第137-139页
致谢第139-141页
发表文章第141页

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