| 中文摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略词 | 第11-13页 |
| 第一章 猪戊型肝炎病毒的研究进展 | 第13-35页 |
| 1 目前对猪戊型肝炎的研究进展 | 第14-32页 |
| ·猪戊型肝炎病毒研究进展 | 第14-25页 |
| ·临床症状和病理变化 | 第25页 |
| ·实验室检测方法及免疫反应 | 第25-30页 |
| ·预防及HEV疫苗的研究 | 第30-32页 |
| 2 目前存在的问题 | 第32-33页 |
| 3 研究的目的和意义 | 第33-35页 |
| 第二章 ORF2片段的克隆及其序列分析 | 第35-47页 |
| 1 材料 | 第35-36页 |
| ·毒株 | 第35页 |
| ·菌株、质粒和血清 | 第35页 |
| ·主要试剂 | 第35-36页 |
| ·主要仪器 | 第36页 |
| ·引物设计 | 第36页 |
| 2 方法 | 第36-42页 |
| ·用具处理 | 第36-37页 |
| ·粪便样品的处理 | 第37页 |
| ·病毒RNA的提取 | 第37页 |
| ·目的基因的扩增和克隆 | 第37-40页 |
| ·PCR产物的T/A连接 | 第40页 |
| ·连接产物的转化 | 第40-41页 |
| ·重组质粒pMD-ORF2的酶切鉴定和PCR鉴定 | 第41-42页 |
| 3 结果 | 第42-44页 |
| ·所选片段抗原性及亲水性分析 | 第42页 |
| ·目的基因的扩增 | 第42-43页 |
| ·序列测定结果 | 第43-44页 |
| 4 讨论 | 第44-47页 |
| 第三章 抗原蛋白的表达及其间接ELISA的建立 | 第47-66页 |
| 1 材料 | 第48页 |
| ·主要试剂 | 第48页 |
| ·主要仪器 | 第48页 |
| ·引物 | 第48页 |
| 2 方法 | 第48-56页 |
| ·RT-PCR扩增目的片段 | 第48-49页 |
| ·目的片段的回收纯化 | 第49页 |
| ·目的片段和表达载体质粒的酶切 | 第49-50页 |
| ·重组质粒的筛选及鉴定 | 第50-52页 |
| ·诱导表达并鉴定 | 第52-53页 |
| ·Western-blot检测重组蛋白的抗原性 | 第53页 |
| ·重组蛋白的纯化及检测 | 第53-54页 |
| ·用纯化的抗原免疫兔子 | 第54-55页 |
| ·间接法抗HEV-IgG EUSA | 第55-56页 |
| 3 结果 | 第56-63页 |
| ·目的片段的酶切鉴定 | 第56-57页 |
| ·不同时相融和蛋白的表达 | 第57页 |
| ·用MagExtractor-His-tag-kit纯化蛋白结果 | 第57-58页 |
| ·Western blot鉴定结果 | 第58-59页 |
| ·融合蛋白间接ELISA方法的建立 | 第59-63页 |
| ·最佳蛋白包被浓度和血清稀释度的确定 | 第59-60页 |
| ·最佳HRP标记的羊抗猪IgG的稀释度的确定 | 第60页 |
| ·抗原抗体最佳反应时间的确定 | 第60页 |
| ·HRP标记的羊抗猪IgG最佳反应时间的确定 | 第60-61页 |
| ·重复性试验 | 第61-62页 |
| ·间接ELISA结果及临界值判定 | 第62页 |
| ·特异性实验结果 | 第62页 |
| ·底物作用时间的确定 | 第62页 |
| ·商品化试剂盒检测结果 | 第62-63页 |
| 4 讨论 | 第63-64页 |
| 5 小结 | 第64-66页 |
| 第四章 上海猪场戊型肝炎病毒抗体和抗原在动物体中的检测 | 第66-75页 |
| 1 材料 | 第67页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第67页 |
| ·血清和粪便样品来源 | 第67页 |
| 2 方法 | 第67-69页 |
| ·戊肝病毒抗体的检测 | 第67页 |
| ·戊肝病毒RNA的检测 | 第67-69页 |
| ·引物设计 | 第67-68页 |
| ·RNA提取 | 第68页 |
| ·目的基因的扩增和克隆 | 第68-69页 |
| ·PCR产物鉴定 | 第69页 |
| ·PCR鉴定 | 第69页 |
| ·测序及序列分析 | 第69页 |
| 3 结果 | 第69-73页 |
| ·血清中抗-HEV抗体 | 第69-71页 |
| ·HEV RNA的检测 | 第71-72页 |
| ·测序结果分析 | 第72页 |
| ·系统遗传进化分析 | 第72-73页 |
| 4 讨论 | 第73-75页 |
| 全文总结 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
| 在读研期间已发表文章 | 第91页 |