| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-14页 |
| 1 前言 | 第14-30页 |
| ·植物胚胎发育后期丰富蛋白基因及应用 | 第14-17页 |
| ·植物胚胎发育后期富集蛋白(LEA) | 第14-16页 |
| ·植物胚胎发育后期富集蛋白基因(lea) | 第16-17页 |
| ·Lea基因的应用 | 第17页 |
| ·兰科植物转基因研究 | 第17-27页 |
| ·转基因受体材料 | 第18-19页 |
| ·应用的转基因方法 | 第19-24页 |
| ·转入的报告基因和目的基因 | 第24-26页 |
| ·转基因组织的筛选与检测 | 第26-27页 |
| ·本研究的目的、意义及技术路线 | 第27-30页 |
| 2 材料与方法 | 第30-39页 |
| ·实验材料 | 第30-34页 |
| ·植物材料 | 第30页 |
| ·质粒 | 第30页 |
| ·主要生化试剂 | 第30-31页 |
| ·主要仪器设备 | 第31页 |
| ·主要培养基 | 第31-32页 |
| ·主要溶液及其组成 | 第32-33页 |
| ·PCR扩增引物 | 第33-34页 |
| ·实验方法 | 第34-39页 |
| ·铁皮石斛再生体系的建立和优化 | 第34-35页 |
| ·基因枪转化 | 第35-37页 |
| ·转基因植株的检测 | 第37-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-56页 |
| ·铁皮石斛再生体系的建立和优化 | 第39-49页 |
| ·类原球茎的获得、驯化及状态调整 | 第39页 |
| ·不定芽的诱导 | 第39-46页 |
| ·生根壮苗培养 | 第46-49页 |
| ·再生植株的驯化及移栽 | 第49页 |
| ·基因枪转化 | 第49-53页 |
| ·除草剂(PPT)对未转化类原球茎亚致死剂量的确定 | 第49页 |
| ·除草剂(PPT)对未转化不定芽致死剂量的确定 | 第49-51页 |
| ·除草剂(PPT)对未转化植株致死剂量的确定 | 第51页 |
| ·受体材料预分化处理对基因枪法转化铁皮石斛的影响 | 第51-52页 |
| ·过渡培养时间对基因枪法转化铁皮石斛的影响 | 第52页 |
| ·轰击枪数对基因枪法转化铁皮石斛的影响 | 第52页 |
| ·Lea3基因的导入、抗性类原球茎的筛选及转化植株的再生 | 第52-53页 |
| ·转化再生植株的检测 | 第53-56页 |
| ·转化再生植株bar基因表达检测 | 第53-55页 |
| ·转化再生植株总 DNA的 PCR检测 | 第55-56页 |
| 4 讨论 | 第56-64页 |
| ·影响铁皮石斛再生体系建立的因素 | 第56-58页 |
| ·类原球茎驯化及状态调整 | 第56页 |
| ·植物激素及其组合和多胺对类原球茎分化的影响 | 第56-57页 |
| ·植物激素和天然附加物对壮苗生根的影响 | 第57-58页 |
| ·基因枪法介导遗传转化的影响因素 | 第58-62页 |
| ·受体组织或细胞的状态对转化率的影响 | 第58-59页 |
| ·轰击参数对转化率的影响 | 第59-60页 |
| ·轰击后过渡培养、选择压的大小和选择培养的时间对转化率的影响 | 第60-62页 |
| ·转基因植株的检测 | 第62-63页 |
| ·后期工作 | 第63-64页 |
| 5 结论 | 第64-65页 |
| ·建立了铁皮石斛高效再生体系 | 第64页 |
| ·优化了遗传转化体系 | 第64页 |
| ·获得了转lea3基因植株 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-70页 |
