| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-13页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-37页 |
| 第一章. 传染性法氏囊病概述 | 第13-18页 |
| 1. 病毒基因组结构 | 第13-15页 |
| 2. IBDV的病毒蛋白及其功能 | 第15-17页 |
| ·VP1蛋白 | 第15-16页 |
| ·VP2蛋白 | 第16页 |
| ·VP3蛋白 | 第16-17页 |
| ·VP4蛋白 | 第17页 |
| ·VP5蛋白 | 第17页 |
| 3. 病毒形态、结构、复制和繁殖 | 第17-18页 |
| ·病毒的形态和结构 | 第17-18页 |
| ·IBDV的复制和繁殖 | 第18页 |
| 第二章. 天然免疫系统和Toll样受体 | 第18-32页 |
| 1. 天然免疫系统 | 第18-24页 |
| ·免疫系统概述 | 第18-19页 |
| ·天然免疫的识别特点 | 第19-20页 |
| ·天然免疫系统的组成 | 第20-22页 |
| ·上皮屏障 | 第21页 |
| ·吞噬细胞 | 第21-22页 |
| ·天然免疫系统的识别策略 | 第22-24页 |
| 2. Toll-like receptors | 第24-32页 |
| ·概述 | 第24-26页 |
| ·各TLRs的功能简介 | 第26-29页 |
| ·TLR3的研究进展 | 第29-32页 |
| 第三章. RNA干扰技术的发展和应用 | 第32-37页 |
| 1. RNA干扰技术的发现 | 第32-33页 |
| 2. RNA干扰技术的作用机制 | 第33-35页 |
| 3. RNA干扰技术的特点 | 第35页 |
| 4. RNA干扰技术存在的一些问题 | 第35-37页 |
| 第二部分 实验研究 | 第37-84页 |
| 第一章. 引言 | 第37-40页 |
| 1. 研究目的和意义 | 第37-38页 |
| 2. 研究内容 | 第38-39页 |
| 3. 技术路线 | 第39-40页 |
| 第二章 材料和方法 | 第40-62页 |
| ·材料 | 第40-49页 |
| ·方法 | 第49-62页 |
| ·鸡胚成纤维细胞的培养、接毒及收毒 | 第49-50页 |
| ·细胞总 RNA的提取 | 第50-51页 |
| ·RNA反转录的步骤 | 第51-52页 |
| ·TLR2Ⅰ型、TLR3、TLR4、TLR5、TLR7及β-actin基因的PCR扩增 | 第52-53页 |
| ·目的片段的克隆 | 第53-56页 |
| ·用siRNA对鸡胚成纤维细胞进行转染 | 第56-57页 |
| ·Real-time PCR | 第57-58页 |
| ·间接免疫荧光 | 第58-59页 |
| ·Western-blotting检测 | 第59-60页 |
| ·病毒滴度TCID_(50)测定 | 第60-62页 |
| 第三章 结果与分析 | 第62-70页 |
| 1. 鸡胚成纤维细胞感染IBDV后的病变情况 | 第62页 |
| 2. RT-PCR扩增 | 第62-66页 |
| ·细胞总RNA提取 | 第62-63页 |
| ·TLR3基因的PCR扩增 | 第63-64页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第64-65页 |
| ·TLR3基因克隆后测序结果 | 第65-66页 |
| 3. 转染后检测 | 第66-70页 |
| ·鸡胚成纤维细胞转染效果 | 第66页 |
| ·Real-time PCR | 第66-67页 |
| ·病毒滴度的测定 | 第67-68页 |
| ·转染后间接免疫荧光 | 第68页 |
| ·Western-blotting | 第68-70页 |
| 第四章 讨论 | 第70-74页 |
| 1. TLR3在病毒感染过程中的作用 | 第70-72页 |
| 2. 实验中存在的一些问题及解决 | 第72-74页 |
| 1. RT-PCR扩增 | 第72页 |
| 2. 接毒时细胞状态的影响 | 第72页 |
| 3. 不同收毒时间对后续试验的影响 | 第72页 |
| 4. Real-time PCR | 第72-74页 |
| 第五章 结论 | 第74-75页 |
| 第六章 参考文献 | 第75-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 个人简介 | 第85页 |