| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 文献综述 | 第8-18页 |
| 1. 概述 | 第8-16页 |
| ·异柠檬酸脱氢酶与柠檬酸循环 | 第8-10页 |
| ·异柠檬酸脱氢酶的分类及其性质 | 第10-11页 |
| ·NAD-异柠檬酸脱氢酶 | 第10页 |
| ·NADP-异柠檬酸脱氢酶 | 第10-11页 |
| ·国内外研究进展 | 第11-16页 |
| 2. 本研究的目的和意义 | 第16-17页 |
| 3. 研究的基本技术路线 | 第17-18页 |
| 1 引言 | 第18-19页 |
| 2 材料和方法 | 第19-27页 |
| ·柳蚕异柠檬酸脱氢酶的克隆及序列分析 | 第19-24页 |
| ·供试材料 | 第19页 |
| ·主要的仪器设备 | 第19页 |
| ·主要生化试剂及常用溶液的配制 | 第19-20页 |
| ·柳蚕组织的提取 | 第20-21页 |
| ·脂肪体总RNA 的抽提 | 第21页 |
| ·脂肪体总 RNA 的检测 | 第21页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第21-22页 |
| ·PCR 反应成分及程序 | 第22页 |
| ·反转录及3’RACE 方法克隆柳蚕NADP-异柠檬酸脱氢酶cDNA | 第22-23页 |
| ·PCR 产物的纯化 | 第23页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第23-24页 |
| ·连接和转化 | 第24页 |
| ·测序 | 第24页 |
| ·序列拼接与分析 | 第24页 |
| ·半定量 PCR 检测柳蚕异柠檬酸脱氢酶基因在不同组织中的表达 | 第24-27页 |
| ·供试材料柳蚕蛹血液、头、精巢RNA 的抽提 | 第24-25页 |
| ·总RNA 的检测 | 第25页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第25-26页 |
| ·引物选择 | 第26页 |
| ·PCR 反应成分 | 第26页 |
| ·循环数目的优化 | 第26页 |
| ·PCR 反应程序的程序 | 第26-27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-36页 |
| ·柳蚕NADP-IDH 的克隆及序列分析结果 | 第27-33页 |
| ·脂肪体总 RNA 的抽提 | 第27页 |
| ·PCR 扩增结果分析 | 第27-28页 |
| ·菌落PCR 结果 | 第28页 |
| ·柳蚕异柠檬酸脱氢酶序列分析 | 第28-30页 |
| ·序列同源性比较 | 第30-32页 |
| ·系统发生树的建立 | 第32页 |
| ·柳蚕异柠檬酸脱氢酶结构分析 | 第32-33页 |
| ·异柠檬酸脱氢酶在不同组织中的表达分析 | 第33-36页 |
| ·不同组织内RNA 的提取 | 第33-34页 |
| ·循环数目的优化 | 第34-35页 |
| ·不同组织内异柠檬酸脱氢酶的表达情况分析 | 第35-36页 |
| 4 讨论 | 第36-37页 |
| 5 结论 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 个人简介 | 第43页 |
| 读研期间发表的论文 | 第43页 |