中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-14页 |
前言 | 第14-17页 |
第一部分 原代骨骼肌成肌细胞的分离培养和鉴定 | 第17-26页 |
材料与方法 | 第17-22页 |
1.实验材料 | 第17-19页 |
·细胞取材 | 第17页 |
·主要仪器 | 第17页 |
·主要试剂 | 第17-18页 |
·主要试剂的配制 | 第18-19页 |
2.实验方法 | 第19-22页 |
·混合酶消化法+连续贴壁法分离纯化大鼠SkMs | 第19-20页 |
·Desmin免疫细胞化学鉴定大鼠SkMs | 第20-22页 |
实验结果 | 第22-24页 |
1.细胞形态学观察和生长特点 | 第22页 |
2.大鼠原代成肌细胞免疫细胞化学鉴定 | 第22-24页 |
讨论 | 第24-26页 |
第二部分 低氧对SkMs增殖的影响及HIF-1 α相关作用探讨 | 第26-50页 |
材料与方法 | 第26-40页 |
1.实验材料 | 第26-29页 |
·细胞取材 | 第26页 |
·主要仪器 | 第26-27页 |
·主要试剂 | 第27-28页 |
·主要试剂的配制 | 第28-29页 |
2.实验方法 | 第29-40页 |
·低氧对原代SkMs增殖的影响 | 第29页 |
·低氧对小鼠成肌细胞系C_2C_(12)细胞增殖的影响 | 第29-32页 |
·HIF-1 α在低氧促C_2C_(12)细胞增殖中相关作用探讨 | 第32-39页 |
·数据处理与统计分析 | 第39-40页 |
实验结果 | 第40-47页 |
1.低氧促进大鼠原代成肌细胞体外增殖 | 第40-41页 |
2.低氧促进小鼠成肌细胞系C_2C_(12)细胞增殖 | 第41-45页 |
·不同氧浓度对C_2C_(12)细胞增殖能力的比较 | 第41页 |
·10% O_2对C_2C_(12)细胞增殖的影响 | 第41-45页 |
3.HIF-1 α在低氧促C_2C_(12)细胞增殖中的作用初探 | 第45-47页 |
·低氧对C_2C_(12)细胞HIF-1α mRNA表达的影响 | 第45页 |
·低氧对C_2C_(12)细胞HIF-1α总蛋白水平的影响 | 第45-46页 |
·低氧对C_2C_(12)细胞胞浆和核HIF-1α蛋白水平的影响 | 第46-47页 |
讨论 | 第47-50页 |
第三部分 低氧预处理及HIF-1α基因修饰SkMs移植治疗心肌梗死的实验研究 | 第50-71页 |
材料与方法 | 第50-58页 |
1.实验材料、仪器和试剂 | 第50-51页 |
·成肌细胞取材 | 第50页 |
·移植实验大鼠 | 第50页 |
·实验仪器 | 第50-51页 |
·手术器械 | 第51页 |
·主要试剂 | 第51页 |
·主要试剂的配制 | 第51页 |
2.实验方法 | 第51-58页 |
·原代成肌细胞的分离培养鉴定 | 第51-52页 |
·实验分组及动物数量 | 第52页 |
·成肌细胞的低氧预处理 | 第52页 |
·Ad/HIF-1α基因感染成肌细胞 | 第52-53页 |
·移植成肌细胞的标记 | 第53页 |
·大鼠心肌梗死动物模型复制及细胞移植 | 第53-54页 |
·血流动力学测定 | 第54页 |
·组织的采集与保存 | 第54页 |
·病理学检查 | 第54-55页 |
·免疫组化鉴定 | 第55页 |
·RT-PCR检测心肌梗死区及梗死周围组织VEGF及其受体的表达 | 第55-57页 |
·数据处理和统计学分析 | 第57-58页 |
实验结果 | 第58-68页 |
1.大鼠骨骼肌成肌细胞原代分离培养与鉴定 | 第58页 |
2.成肌细胞的Ad/HIF-1α基因感染效率测定 | 第58-59页 |
3.感染Ad/HIF-1α基因后SkMs表达HIF-1α蛋白检测 | 第59页 |
4.心肌梗死模型及梗死后心脏大体形态 | 第59-61页 |
5.移植细胞的定居 | 第61页 |
6.血流动力学对心功能的评价 | 第61-62页 |
7.病理切片HE染色、Masson染色表现 | 第62-64页 |
8.HIF-1α基因修饰的SkMs降低缺血局部的胶原沉积 | 第64页 |
9.HIF-1α基因修饰的SkMs移植促进血管的新生 | 第64-66页 |
10.HIF-1α基因修饰的SkMs移植上调VEGF及其受体mRNA受体的表达 | 第66-68页 |
讨论 | 第68-71页 |
研究总结 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-79页 |
文献综述 | 第79-90页 |
缩略语表 | 第90-91页 |
攻读学位期间论文发表情况 | 第91-92页 |
致谢 | 第92页 |