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低氧预处理或HIF-1α基因修饰的成肌细胞移植治疗心肌梗死的实验研究

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-14页
前言第14-17页
第一部分 原代骨骼肌成肌细胞的分离培养和鉴定第17-26页
 材料与方法第17-22页
  1.实验材料第17-19页
   ·细胞取材第17页
   ·主要仪器第17页
   ·主要试剂第17-18页
   ·主要试剂的配制第18-19页
  2.实验方法第19-22页
   ·混合酶消化法+连续贴壁法分离纯化大鼠SkMs第19-20页
   ·Desmin免疫细胞化学鉴定大鼠SkMs第20-22页
 实验结果第22-24页
  1.细胞形态学观察和生长特点第22页
  2.大鼠原代成肌细胞免疫细胞化学鉴定第22-24页
 讨论第24-26页
第二部分 低氧对SkMs增殖的影响及HIF-1 α相关作用探讨第26-50页
 材料与方法第26-40页
  1.实验材料第26-29页
   ·细胞取材第26页
   ·主要仪器第26-27页
   ·主要试剂第27-28页
   ·主要试剂的配制第28-29页
  2.实验方法第29-40页
   ·低氧对原代SkMs增殖的影响第29页
   ·低氧对小鼠成肌细胞系C_2C_(12)细胞增殖的影响第29-32页
   ·HIF-1 α在低氧促C_2C_(12)细胞增殖中相关作用探讨第32-39页
   ·数据处理与统计分析第39-40页
 实验结果第40-47页
  1.低氧促进大鼠原代成肌细胞体外增殖第40-41页
  2.低氧促进小鼠成肌细胞系C_2C_(12)细胞增殖第41-45页
   ·不同氧浓度对C_2C_(12)细胞增殖能力的比较第41页
   ·10% O_2对C_2C_(12)细胞增殖的影响第41-45页
  3.HIF-1 α在低氧促C_2C_(12)细胞增殖中的作用初探第45-47页
   ·低氧对C_2C_(12)细胞HIF-1α mRNA表达的影响第45页
   ·低氧对C_2C_(12)细胞HIF-1α总蛋白水平的影响第45-46页
   ·低氧对C_2C_(12)细胞胞浆和核HIF-1α蛋白水平的影响第46-47页
 讨论第47-50页
第三部分 低氧预处理及HIF-1α基因修饰SkMs移植治疗心肌梗死的实验研究第50-71页
 材料与方法第50-58页
  1.实验材料、仪器和试剂第50-51页
   ·成肌细胞取材第50页
   ·移植实验大鼠第50页
   ·实验仪器第50-51页
   ·手术器械第51页
   ·主要试剂第51页
   ·主要试剂的配制第51页
  2.实验方法第51-58页
   ·原代成肌细胞的分离培养鉴定第51-52页
   ·实验分组及动物数量第52页
   ·成肌细胞的低氧预处理第52页
   ·Ad/HIF-1α基因感染成肌细胞第52-53页
   ·移植成肌细胞的标记第53页
   ·大鼠心肌梗死动物模型复制及细胞移植第53-54页
   ·血流动力学测定第54页
   ·组织的采集与保存第54页
   ·病理学检查第54-55页
   ·免疫组化鉴定第55页
   ·RT-PCR检测心肌梗死区及梗死周围组织VEGF及其受体的表达第55-57页
   ·数据处理和统计学分析第57-58页
 实验结果第58-68页
  1.大鼠骨骼肌成肌细胞原代分离培养与鉴定第58页
  2.成肌细胞的Ad/HIF-1α基因感染效率测定第58-59页
  3.感染Ad/HIF-1α基因后SkMs表达HIF-1α蛋白检测第59页
  4.心肌梗死模型及梗死后心脏大体形态第59-61页
  5.移植细胞的定居第61页
  6.血流动力学对心功能的评价第61-62页
  7.病理切片HE染色、Masson染色表现第62-64页
  8.HIF-1α基因修饰的SkMs降低缺血局部的胶原沉积第64页
  9.HIF-1α基因修饰的SkMs移植促进血管的新生第64-66页
  10.HIF-1α基因修饰的SkMs移植上调VEGF及其受体mRNA受体的表达第66-68页
 讨论第68-71页
研究总结第71-72页
参考文献第72-79页
文献综述第79-90页
缩略语表第90-91页
攻读学位期间论文发表情况第91-92页
致谢第92页

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