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海洋微生物降解苯并[a]芘的初步研究

中文摘要第1-5页
ABSTRACT第5-8页
目录第8-14页
第一章 引言第14-27页
 1 概况第14-15页
 2 BaP的性质及其危害第15-19页
   ·BaP的理化性质第15-16页
   ·BaP的来源和毒性第16-17页
     ·BaP的来源第16页
     ·BaP的危害途径第16页
     ·BaP的致癌性第16-17页
     ·BaP的毒理性质第17页
   ·BaP的分布及其环境行为第17-19页
     ·BaP在自然界的分布情况第17-18页
     ·BaP的环境行为第18-19页
 3 海洋微生物对PAHs的降解和利用第19-24页
   ·海洋微生物对PAHs的降解第19-21页
     ·降解低分子量(LMW)PAHs的微生物种类第19-20页
     ·降解BaP的微生物种类第20-21页
   ·微生物降解BaP的机制及代谢途径第21-24页
     ·细菌降解BaP的机制及代谢途径第21-22页
     ·真菌降解BaP的机制及代谢途径第22-23页
     ·微生物的共代谢机制第23-24页
 4 现代生物学技术在研究微生物降解PAHs中的应用第24-26页
   ·微生物基因组学的研究第24-25页
   ·微生物蛋白质组学的研究第25-26页
 5 本研究工作的主要内容、意义第26-27页
第二章 汕头内海海域沉积物污染表征、PAHs污染状况及微生物群落分析第27-43页
 1 样品的采集第27-29页
   ·研究区域概况第27-28页
   ·沉积物样品采集站位的设置第28页
   ·样品的采集与处理第28-29页
 2 样品处理及测定方法第29-32页
   ·无机化合物的测定第29-30页
     ·含水量、pH值的测定第29页
     ·无机磷化物(IP)、可溶性磷(DP)的测定第29页
     ·总氮(TN)、氨氮(NH_4~+-N)、亚硝态氮(NO_2~--N)和硝态氮(NO_3~--N)的测定第29-30页
     ·总还原糖(TRS)的测定第30页
     ·硫酸盐的测定第30页
   ·PAHs含量的测定第30-31页
     ·样品的前处理第30页
     ·GC分析仪器和条件第30-31页
   ·微生物多样性分析第31-32页
     ·基因组总DNA的提取和测定第31页
     ·16SrRNA基因池的PCR扩增第31-32页
     ·变性梯度凝胶电泳(DGGE)分析第32页
 3 结果与讨论第32-42页
   ·汕头内海海域沉积物中无机化合物的特征分析第32-35页
     ·沉积物含水量和酸碱度分析第32-33页
     ·沉积物中无机磷、可溶性磷的分析第33页
     ·沉积物中含氮量分析第33-34页
     ·沉积物中还原糖和硫酸盐含量分析第34-35页
   ·汕头内海海域沉积物中PAHs的污染特征分析第35-40页
     ·沉积物中PAHs的含量和分布情况第35-36页
     ·沉积物中PAHs的组成特征分析第36-37页
     ·沉积物中PAHs的来源分析第37-38页
     ·沉积物中PAHs的污染水平及危害评价第38-40页
   ·微生物多样性分析第40-42页
 4 小结第42-43页
第三章 降解BaP微生物的富集、分离和鉴定第43-53页
 1 材料和方法第43-46页
   ·实验材料第43-44页
     ·样品的来源第43页
     ·试剂第43-44页
     ·培养基的配制第44页
     ·溶液第44页
     ·分析仪器和条件第44页
   ·实验方法第44-46页
     ·降解菌的分离、筛选及鉴定第44-45页
     ·降解菌的分子生物学鉴定第45-46页
     ·菌株对BaP降解特性的研究第46页
 2 结果与讨论第46-52页
   ·BaP降解菌的富集、分离和筛选第46-48页
   ·降解菌对BaP的降解能力分析第48-49页
     ·PAHs的标准曲线绘制第48页
     ·不同降解菌的BaP降解能力分析第48-49页
   ·菌株的分子生物学鉴定第49-52页
     ·细菌BAP5的生理生化及系统进化树分析第49-50页
     ·真菌BAP14菌落形态及系统进化树分析第50-51页
     ·混合菌株中优势菌株的分离、纯化和鉴定第51-52页
 3 小结第52-53页
第四章 微生物对BaP的降解第53-66页
 1 材料和方法第53-55页
   ·实验材料第53-54页
     ·实验菌种第53页
     ·试剂第53-54页
     ·培养基的配制第54页
     ·溶液第54页
     ·分析仪器和条件第54页
   ·实验方法第54-55页
     ·菌株降解BaP效率和生长曲线的测定第54-55页
     ·降解BaP条件的优化第55页
 2 结果与讨论第55-65页
   ·菌株Ochrobactrum sp.BAP5降解特性的研究第55-57页
     ·菌株降解BaP效率及生长曲线第55-56页
     ·菌株降解BaP条件的优化第56-57页
   ·菌株Aspergillus sp.BAP14降解特性的研究第57-61页
     ·菌株降解BaP效率及生长曲线第57-58页
     ·菌株降解BaP的条件优化第58-61页
   ·混合菌S6降解特性的研究第61-65页
     ·菌株降解BaP的分析第61-62页
     ·混合菌株降解BaP条件的优化第62-65页
 3 小结第65-66页
第五章 降解BaP的功能蛋白研究第66-76页
 1 材料和方法第66-69页
   ·实验材料第66-67页
     ·菌株来源第66页
     ·试剂第66-67页
     ·溶液第67页
   ·实验方法第67-69页
     ·菌株的培养和菌体收集第67页
     ·菌体蛋白的提取第67-68页
     ·SDS-PAGE电泳分析第68页
     ·2D电泳分析第68页
     ·差异蛋白的MALDI-TOF/MS分析第68-69页
 2 结果与讨论第69-75页
   ·细菌BAP5在PAHs胁迫下菌株蛋白表达的差异分析第69-73页
     ·菌株在BaP诱导下的蛋白SDS-PAGE分析第69-70页
     ·菌株在不同PAHs诱导下的蛋白SDS-PAGE分析第70页
     ·菌株在PAHs胁迫下蛋白表达差异的二维电泳分析第70-71页
     ·差异蛋白的MALDI-TOF-MS分析第71-73页
   ·真菌BAP14在PAHs胁迫下菌株蛋白表达的差异分析第73-74页
   ·混合菌S6在PAHs胁迫下菌株蛋白表达的差异分析第74-75页
 3 小结第75-76页
第六章 总结和展望第76-79页
 1 本研究主要结果和结论第76-77页
 2 研究展望第77-79页
附章一 酵母菌降解苯酚的研究第79-94页
 1 材料和方法第79-82页
   ·实验材料第79-80页
     ·样品来源第79页
     ·试剂第79-80页
     ·培养基第80页
     ·溶液第80页
   ·实验方法第80-82页
     ·苯酚降解菌的分离、筛选及鉴定第80页
     ·菌株特性研究第80页
     ·降解菌18SrDNA序列分析第80-81页
     ·菌株的苯酚降解特性研究第81页
     ·降解菌酶活力的研究第81-82页
 2 结果和讨论第82-93页
   ·海洋苯酚降解菌的分离、筛选及形态特征第82-83页
   ·苯酚降解菌的降解能力的研究第83-85页
     ·苯酚的标准曲线的绘制第83-84页
     ·降解菌的降解能力的测定第84-85页
   ·菌株P2、P4、P5对苯酚降解特性的研究第85-93页
     ·菌株的选择和降解条件的优化第85-89页
     ·菌株对不同芳烃化合物的利用能力第89-90页
     ·菌株的生理生化特性及种属鉴定第90-92页
     ·菌株代谢苯酚的途径及酶特性的分析第92-93页
 3 小结第93-94页
附章二 纳豆激酶产生菌的性质研究第94-107页
 1 材料与方法第95-97页
   ·实验材料第95页
     ·菌株第95页
     ·样品来源第95页
     ·试剂第95页
     ·培养基第95页
     ·溶液第95页
   ·实验方法第95-97页
     ·具纤溶活性菌株的筛选、分离和纯化第95-96页
     ·菌株产纳豆激酶发酵条件的优化第96页
     ·菌株纳豆激酶基因的克隆和表达第96-97页
 2 结果和分析第97-105页
   ·具纤溶活性菌株的性质研究第97-102页
     ·具纤溶活性菌株的筛选、分离和纯化第97页
     ·菌株的纤溶活性分析第97-98页
     ·菌株的生理生化性质分析第98-99页
     ·菌株产纳豆激酶发酵条件的优化第99-102页
   ·纳豆激酶(NK)基因的克隆与表达体系的研究第102-105页
     ·NK基因的克隆、表达第102-103页
     ·重组NK基因的表达条件优化第103-105页
 3 小结和讨论第105-107页
参考文献第107-117页
在校期间科研情况第117-119页
致谢第119页

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