中文摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-13页 |
综述 | 第13-20页 |
1. 猪瘟及猪瘟病毒概述 | 第13-14页 |
2. 猪瘟病毒分子生物学研究进展 | 第14-17页 |
·猪瘟病毒非编码区研究进展 | 第14-15页 |
·猪瘟病毒蛋白研究进展 | 第15-17页 |
3. 猪瘟病毒疫苗研究进展 | 第17-18页 |
4. 猪瘟病毒反向遗传系统研究进展 | 第18-20页 |
第一部分 比较猪瘟病毒兔化毒株和石门株5 端非编码区对病毒翻译的影响 | 第20-41页 |
1. 材料 | 第20-24页 |
·菌株、细胞、质粒 | 第20页 |
·主要仪器 | 第20-21页 |
·药品及试剂盒 | 第21-22页 |
·溶液配方 | 第22-24页 |
2. 方法 | 第24-35页 |
·CSFV-C 株5’-UTR 片段的克隆 | 第24-26页 |
·pMD18-T-C-5’-UTR 质粒的构建 | 第26-29页 |
·pEGFP-N3-FR-C-5’-UTR 质粒的构建 | 第29-30页 |
·pEGFP-N3-FR-5’-UTR-质粒的构建 | 第30-31页 |
·目的质粒的大量获得 | 第31-32页 |
·猪肾细胞PK-15 的常规培养 | 第32-34页 |
·重组质粒的表达、检测及分析 | 第34-35页 |
3. 结果 | 第35-39页 |
·pMD18-T-C-5’-UTR 质粒的构建 | 第35-36页 |
·pEGFP-N3-FR-C-5’-UTR 质粒的构建 | 第36-38页 |
·pEGFP-N3-FR-5’-UTR–的构建及鉴定 | 第38-39页 |
·Dual-Luciferase 双荧光素酶报告基因检测结果 | 第39页 |
4. 分析与讨论 | 第39-41页 |
第二部分 T7 RNA 聚合酶真核表达系统的建立 | 第41-51页 |
1 材料 | 第41-43页 |
·菌株、细胞、质粒 | 第41页 |
·主要仪器 | 第41-42页 |
·药品及试剂盒 | 第42-43页 |
2. 方法 | 第43-46页 |
·pMD18-T-T7 质粒的构建 | 第43-44页 |
·pEGFP-N3-T7 重组质粒的构建 | 第44-45页 |
·T7 RNA polymerase 在PK-15 细胞中表达 | 第45-46页 |
3 结果 | 第46-49页 |
·T7 RNA 聚合酶基因的克隆 | 第46页 |
·重组质粒pMD18-T-T7 的构建 | 第46-47页 |
·重组质粒pEGFP-N3-T7 的构建 | 第47-48页 |
·T7 RNA polymerase 的表达检测 | 第48-49页 |
4. 分析与讨论 | 第49-51页 |
第三部分CSFV C 株全长cDNA 测序 | 第51-54页 |
1. 材料 | 第51-52页 |
·质粒 | 第51页 |
·主要仪器 | 第51-52页 |
·药品及试剂盒 | 第52页 |
2. 方法 | 第52-53页 |
·引物设计 | 第52页 |
·PCR 扩增目的片段 | 第52页 |
·测序结果拼接 | 第52页 |
·二次测序 | 第52-53页 |
·序列比对 | 第53页 |
3. 结果 | 第53页 |
4. 讨论与分析 | 第53-54页 |
第四部分 中国猪瘟病毒进化及种群动态研究 | 第54-64页 |
1. 材料和方法 | 第54-55页 |
·收集序列数据及系统发生分析 | 第54页 |
·同源重组的检测 | 第54-55页 |
·进化速率及种群动态的分析 | 第55页 |
·选择压力分析 | 第55页 |
2. 结果 | 第55-62页 |
·系统发生分析 | 第55-57页 |
·重组病毒的鉴定 | 第57-59页 |
·猪瘟病毒进化速率分析 | 第59-61页 |
·猪瘟病毒种群动态分布 | 第61-62页 |
·选择压力分析 | 第62页 |
3. 讨论与分析 | 第62-64页 |
第五部分 结论 | 第64-65页 |
附录 | 第65-74页 |
附录6-1:质粒图谱 | 第65-66页 |
附录6-2:论文中的相关表格 | 第66-71页 |
附录6-3:论文中的测序结果 | 第71-74页 |
参考文献 | 第74-79页 |
致谢 | 第79-80页 |
攻读硕士学位期间发表文章 | 第80页 |