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水稻条纹病毒CP、NS3、SP、NSvc4基因介导的病毒抗性比较研究

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-12页
1 引言第12-21页
   ·水稻条纹病毒的分子生物学特性第13-14页
     ·RSV 的基因组结构特点第13页
     ·RSV 的转录调控和编码的蛋白第13-14页
   ·RNA 干扰第14-15页
     ·RNA 干扰现象的发现第14-15页
     ·RNAi 的特点第15页
   ·RNA 介导的病毒抗性第15-17页
     ·概念的提出第15-16页
     ·RNA 介导的病毒抗性的特点第16-17页
     ·RNA 介导的病毒抗性本质是转录后基因沉默第17页
   ·影响RNA 沉默效率的因素第17-19页
     ·发夹结构第17-19页
   ·不同功能基因对RNA 介导的病毒抗性的影响第19-20页
   ·立题依据和主要研究内容第20-21页
     ·立题依据第20页
     ·主要研究内容第20-21页
2 材料与方法第21-35页
   ·材料第21页
     ·毒源第21页
     ·植物受体第21页
     ·菌株和质粒第21页
     ·常用缓冲液及培养基的配制第21页
     ·常用化学试剂、分子生物学试剂及仪器第21页
   ·方法第21-35页
     ·植物表达载体系统的构建第21-27页
       ·目的片段的 PCR 扩增第23页
       ·目的片段和质粒的酶切和回收第23-24页
       ·目的片段和质粒的连接第24页
       ·感受态细胞的制备第24-25页
       ·重组质粒向大肠杆菌中的转化(热激法)第25页
       ·转化菌落的PCR 鉴定第25-26页
       ·重组质粒的酶切鉴定第26页
       ·质粒DNA 的大量提取(碱裂解法)第26-27页
     ·重组表达载体向农杆菌中的转化(冻融法)第27-28页
     ·农杆菌介导的水稻基因转化第28-29页
     ·水稻总DNA 的提取第29-30页
     ·转基因植株的PCR 检测第30页
     ·转基因植物的潮霉素抗性检测第30页
     ·水稻总RNA 的提取(Trizol 法)第30-31页
     ·转基因水稻的抗病性分析第31页
     ·转基因植株的Northern blot 分析第31-33页
     ·转基因植株siRNA 的提取及杂交分析第33-35页
3 结果与分析第35-43页
   ·发夹结构植物表达载体构建第35-38页
     ·400bp 目的片段与载体的连接及鉴定第35-37页
     ·片段反向连接的PCR 鉴定第37页
     ·重组表达载体的酶切鉴定第37-38页
   ·重组表达载体向农杆菌中的转化第38页
   ·转基因水稻的获得第38-39页
   ·转基因水稻的鉴定第39-40页
     ·转基因水稻的 HygB 抗性检测第39-40页
     ·转基因水稻的PCR 检测第40页
   ·转基因水稻的抗病性分析第40-41页
   ·总 RNA 和siRNA 的 Northern blot 分析第41-43页
4 讨论第43-45页
5 结论第45-46页
参考文献第46-59页
附录第59-68页
致谢第68-69页
硕士学位论文内容简介及自评第69页

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