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诱导型Ac/Ds转座载体的构建及其在拟南芥中的转座行为分析

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-12页
1 前言第12-25页
   ·Ac/Ds 转座系统第14-18页
     ·Ac/Ds 转座系统组成第14-15页
     ·Ac/Ds 转座系统的应用第15-17页
     ·Ac/Ds 转座系统所面临的挑战第17-18页
   ·乙醇诱导系统第18-20页
     ·乙醇诱导系统组成第18页
     ·乙醇诱导系统原理第18-19页
     ·乙醇诱导系统的优点第19页
     ·乙醇诱导系统的缺点第19页
     ·乙醇诱导系统的应用第19-20页
   ·乙醇诱导的Ac/Ds 转座系统第20-21页
     ·乙醇诱导的Ac/Ds 转座系统的作用原理第20-21页
     ·乙醇诱导的Ac/Ds 转座系统的意义第21页
   ·地塞米松诱导系统第21-23页
     ·地塞米松诱导系统原理第21-22页
     ·地塞米松诱导系统的应用第22-23页
   ·地塞米松诱导的Ac/Ds 转座系统第23-24页
     ·地塞米松诱导的Ac/Ds 转座系统的作用原理第23-24页
     ·地塞米松诱导的Ac/Ds 转座系统的意义第24页
   ·诱导型载体在玉米中的使用第24-25页
2 材料和方法第25-46页
   ·实验材料第25-26页
     ·植物材料第25页
     ·菌株和载体第25页
     ·酶及生化试剂第25页
     ·PCR 引物第25页
     ·培养基第25页
     ·GUS 染色液第25-26页
   ·实验方法第26-46页
     ·质粒DNA 的提取第26-27页
     ·电泳目的片段的回收第27页
     ·DNA 片段与载体的连接第27-28页
     ·大肠杆菌感受态细胞制备第28页
     ·大肠杆菌感受态细胞的转化第28-29页
     ·根癌农杆菌LBA4404/GV3101 感受态细胞的制备第29页
     ·冻融法转化农杆菌第29页
     ·表达载体的构建第29-34页
       ·乙醇诱导型Ac/Ds 表达载体pHL1 的构建第29-32页
       ·地塞米松诱导型Ac/Ds 表达载体pHL2 的构建第32-34页
     ·农杆菌介导的拟南芥遗传转化第34页
     ·拟南芥转基因种子的筛选及遗传分析第34-35页
     ·拟南芥纯合体筛选流程第35页
     ·拟南芥DNA 提取第35-36页
     ·拟南芥RNA 提取第36-38页
     ·半定量RT-PCR 分析第38-39页
     ·乙醇诱导第39页
     ·地塞米松诱导第39页
     ·Tail-PCR第39-41页
     ·巢式PCR第41-42页
     ·GUS 染色第42-43页
     ·农杆菌介导的玉米遗传转化第43-46页
3 结果与分析第46-65页
   ·构建乙醇诱导型Ac/Ds 表达载体pHL1第46-48页
   ·表达载体pHL1 转化拟南芥第48-49页
   ·表达载体pHL1 功能验证第49-57页
     ·乙醇诱导功能验证第49-50页
     ·Ds 转座功能验证第50-54页
     ·Ds-GFP 插入位点的分析第54-57页
   ·构建地塞米松诱导型Ac/Ds 表达载体pHL2第57-60页
   ·表达载体pHL2 转化拟南芥第60-61页
   ·表达载体pHL2 功能验证第61-63页
     ·Ds 转座功能验证第61-62页
     ·Ds-GFP 插入位点的分析第62-63页
   ·表达载体pHL1 转化玉米第63-65页
4 讨论第65-67页
5 结论第67-68页
参考文献第68-75页
附录第75-77页
致谢第77页

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