| 中文摘要 | 第1-11页 |
| 英文摘要 | 第11-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-21页 |
| ·特异性刺激肝细胞增殖因子的发现 | 第12页 |
| ·人肝再生增强因子(hALR)的克隆 | 第12-13页 |
| ·hALR的基因结构 | 第13-15页 |
| ·hALR的组织表达定位和受体的确定 | 第15页 |
| ·hALR的生物学活性 | 第15-18页 |
| ·hALR的作用机制 | 第18-20页 |
| ·本研究的意义和主要内容 | 第20-21页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第21-34页 |
| ·实验材料 | 第21-24页 |
| ·菌株和质粒 | 第21页 |
| ·引物 | 第21页 |
| ·试验动物与细胞株 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21-24页 |
| ·主要仪器和设备 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-34页 |
| ·克隆载体的构建 | 第24-26页 |
| ·表达载体的构建 | 第26-28页 |
| ·酵母表达菌pPICZaA-hALR/GS115的构建及诱导表达 | 第28-31页 |
| ·rhALR的纯化 | 第31-32页 |
| ·rhALR活性检测 | 第32-34页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第34-53页 |
| ·重组载体pPICZaA-hALR构建结果 | 第34-37页 |
| ·hALR的PCR扩增结果 | 第34页 |
| ·克隆载体pMD-18T-hALR的菌落PCR和酶切鉴定结果 | 第34-35页 |
| ·表达载体pPICZaA-hALR菌落PCR和酶切鉴定结果 | 第35-36页 |
| ·DNA测序结果 | 第36-37页 |
| ·酵母表达菌pPICZaA-hALR/GS115的构建及诱导表达 | 第37-42页 |
| ·pPICZaA-hALR电穿孔法转化毕赤酵母GS115 | 第37页 |
| ·pPICZaA-hALR原生质球法转化毕赤酵母GS115 | 第37页 |
| ·酵母工程菌基因组DNA的提取与PCR检测 | 第37-38页 |
| ·酵母工程菌pPICZaA-hALR/GS115的表型鉴定 | 第38-39页 |
| ·转化菌株诱导表达筛选检测 | 第39-40页 |
| ·重组酵母表达上清的Westernblot分析 | 第40-41页 |
| ·高表达工程菌rhALR最佳表达时间的确定 | 第41-42页 |
| ·rhALR的纯化 | 第42-48页 |
| ·(NH_4)_2SO_4沉淀法处理重组酵母工程菌发酵液上清 | 第42-44页 |
| ·Sepharose DEAE Fast Flow纯化rhALR | 第44-47页 |
| ·SephadexG-75凝胶层析精制rhALR | 第47-48页 |
| ·rhALR活性实验结果 | 第48-53页 |
| ·rhALR体外促进细胞增殖的活性 | 第48页 |
| ·rhALR促进1/3肝切除大鼠肝细胞增殖 | 第48-52页 |
| ·rhALR对D-氨基半乳糖所致肝损伤大鼠存活率的影响 | 第52页 |
| ·rhALR对D-氨基半乳糖所致肝损伤大鼠肝细胞修复作用 | 第52-53页 |
| 第四章 讨论 | 第53-56页 |
| 一、hALR在毕赤酵母中的分泌表达 | 第53-54页 |
| 二、rhALR的纯化 | 第54页 |
| 三、rhALR的活性研究 | 第54-56页 |
| 第五章 总结 | 第56-57页 |
| 一、本论文的结果 | 第56页 |
| 二、论文的进一步研究设想 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-60页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
