| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-22页 |
| 1. 文昌鱼 | 第8-11页 |
| ·种类及分布 | 第8-9页 |
| ·生活习性 | 第9页 |
| ·形态结构 | 第9-11页 |
| 2. 文昌鱼分子生物学研究 | 第11-17页 |
| ·文昌鱼在基因倍增研究中的重要作用 | 第11-13页 |
| ·文昌鱼比较基因组学中的重要作用 | 第13-14页 |
| ·文昌鱼基因家族的系统进化分析 | 第14-16页 |
| ·文昌鱼与分子发育生物学 | 第16-17页 |
| 3. TIP30/CC3 的研究进展 | 第17-21页 |
| ·TIP30/CC3 的发现 | 第17-18页 |
| ·TIP30/CC3 的结构特征 | 第18页 |
| ·TIP30/CC3 的生理功能 | 第18-20页 |
| ·TIP30/CC3 研究展望 | 第20-21页 |
| 4. 本论文的主要内容和技术路线 | 第21-22页 |
| 第二章 青岛文昌鱼TIP30基因的克隆及进化分析 | 第22-56页 |
| 1. 前言 | 第22页 |
| 2. 材料和方法 | 第22-41页 |
| ·材料 | 第22-24页 |
| ·方法 | 第24-41页 |
| ·总RNA 的制备 | 第24-25页 |
| ·文昌鱼TIP30 基因保守片段的扩增 | 第25-28页 |
| ·RACE 技术扩增TIP30 基因cDNA 全长 | 第28-32页 |
| ·Northern 杂交 | 第32-37页 |
| ·切片原位分析TIP30 基因在成体文昌鱼组织中的表达 | 第37-38页 |
| ·文昌鱼TIP30 基因组DNA 的PCR 扩增和测序 | 第38-40页 |
| ·序列比较与系统进化分析 | 第40页 |
| ·AmphiTIP30 的空间结构分析 | 第40-41页 |
| 3. 结果 | 第41-54页 |
| ·文昌鱼总RNA的提取 | 第41页 |
| ·文昌鱼TIP30 基因cDNA 的克隆 | 第41-44页 |
| ·总RNA 的Northern 杂交和切片原位杂交 | 第44-47页 |
| ·文昌鱼TIP30 基因的序列分析 | 第47-52页 |
| ·文昌鱼TIP30 基因组DNA 的克隆和结构分析 | 第52-53页 |
| ·AmphiTIP30 的立体结构分析 | 第53-54页 |
| 4. 讨论 | 第54-56页 |
| 第三章 青岛文昌鱼TIP30 蛋白的融合表达、纯化、鉴定及特性分析 | 第56-76页 |
| 1. 前言 | 第56页 |
| 2. 材料和方法 | 第56-65页 |
| ·材料 | 第56-58页 |
| ·方法 | 第58-65页 |
| ·表达载体的构建 | 第58-60页 |
| ·大肠杆菌DH-5α感受态细胞的制备 | 第60页 |
| ·连接产物的转化 | 第60-61页 |
| ·挑阳性克隆并提取其质粒做酶切及PCR 检测 | 第61页 |
| ·重组质粒Pet-28-TIP30 的序列测定 | 第61页 |
| ·含pET-28-TIP30 的表达载体的大肠杆菌DH-5α中的诱导表达 | 第61-62页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第62-63页 |
| ·含pET-28-TIP30 的表达载体的大肠杆菌DH-5α中表达条件的优化 | 第63页 |
| ·重组His-TIP30 融合蛋白的纯化 | 第63页 |
| ·重组His-TIP30 融合蛋白与NADP~+（NADPH）结合系数的测定 | 第63-64页 |
| ·重组His-TIP30 融合蛋白还原酶活性的测定 | 第64页 |
| ·重组His-TIP30 融合蛋白的Western blot 检测 | 第64-65页 |
| ·文昌鱼TIP30蛋白的免疫组织化学检测 | 第65页 |
| 3 结果 | 第65-74页 |
| ·TIP30基因的PCR扩增 | 第65-66页 |
| ·pET-28-TIP30表达载体的构建 | 第66-67页 |
| ·重组pET-28-TIP30在大肠杆菌中的表达及表达条件的优化 | 第67-69页 |
| ·重组His-TIP30融合蛋白的纯化 | 第69-70页 |
| ·重组His-TIP30 融合蛋白与NADP~+（NADPH）结合系数的测定 | 第70-71页 |
| ·重组His-TIP30 融合蛋白酶活测定 | 第71-72页 |
| ·TIP30 蛋白的Western blot 检测 | 第72-73页 |
| ·文昌鱼TIP30 蛋白的免疫组织化学分析 | 第73-74页 |
| 4 讨论 | 第74-76页 |
| 总结与展望 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-84页 |
| 附录 | 第84-90页 |
| 致谢 | 第90页 |
