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过量表达CDPK9对拟南芥耐逆性的影响

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-8页
第一部分 文献综述第8-22页
 1. 细胞信号转导第8-16页
   ·信号第8页
   ·植物细胞信号转导过程及胞内信使系统第8-9页
   ·钙离子与胁迫信号转导第9页
   ·钙靶蛋白第9-16页
 2. 盐芥作为耐盐的模式植物第16-18页
 3. 绿色荧光蛋白GFP 简介第18-21页
   ·GFP 在植物体中的应用第19-21页
 4. 蛋白的原核表达及纯化第21-22页
第二部分 实验材料及实验方法第22-33页
 1. 实验材料第22-24页
   ·植物材料第22页
   ·菌种第22页
   ·酶、化学试剂及试剂盒第22页
   ·培养基第22-23页
   ·质粒提取液第23页
   ·主要仪器设备第23页
   ·软件第23-24页
 2.实验方法第24-33页
   ·拟南芥植物材料的种植及处理第24页
   ·大肠杆菌感受态的制备及转化第24页
   ·质粒的提取第24-25页
   ·植物基因组DNA 的提取第25页
   ·RNeasy Plant Mini Kit 提取植物总RNA 及DNA 酶消化第25-26页
   ·RNA 的定量与检测第26-27页
   ·RNA 的反转录及cDNA 模板的稀释第27页
   ·农杆菌感受态的制备及转化第27-28页
   ·花序侵染法转化拟南芥第28页
   ·转化子的筛选及遗传分析第28-29页
   ·Northern 杂交分析第29-31页
   ·融合蛋白的表达以及纯化第31-32页
   ·植物细胞膜透性的测定第32-33页
   ·植物细胞液渗透势的测定第33页
第三部分 实验结果与分析第33-43页
 1. 表达载体的构建及验证第33-36页
   ·CDPK9 过量表达载体的构建及验证第33-34页
   ·CDPK9-GST 表达载体的构建及验证第34-35页
   ·CDPK9-GFP 表达载体的构建及验证第35页
   ·CDPK9-GFP 表达载体的PCR 验证第35-36页
 2. 对转基因和野生型植株DNA 的PCR 鉴定第36页
 3. 对转基因和野生型植株RT-PCR 鉴定第36-37页
 4.CDPK9-GST 融合蛋白的表达第37页
 5. CDPK9-GFP 转基因抗性苗已筛出,但还未得到满意的定位图片第37页
 6. 对转基因和野生型植株耐逆性鉴定第37-38页
   ·对转基因和野生型植株电导率的测定第37-38页
   ·对转基因和野生型植株在盐处理条件下渗透势的测定第38页
 7. 转基因和野生型拟南芥在种子萌发阶段抗逆性的测定第38-41页
   ·在无任何胁迫处理条件下的转基因和野生型株系萌发率的测定第38-39页
   ·在0.5umol/LABA 处理条件下的转基因和野生型株系萌发率的测定第39-40页
   ·在1umol/L ABA 上野生型和转基因株系的萌发率测定第40页
   ·200mmol/L 甘露醇处理条件下的转基因和野生型株系的萌发率第40-41页
   ·400mmol/L 甘露醇处理条件下的转基因和野生型株系的萌发率第41页
 8. 分析与讨论第41-43页
参考文献第43-49页
致谢第49-50页
已发文章第50页

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