| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 第一章 鸡传染性支气管炎病毒分子生物学及核蛋白研究进展 | 第12-24页 |
| ·IBV 分类地位及形态特征 | 第12-13页 |
| ·IBV 基因组 | 第13-16页 |
| ·S 基因 | 第14页 |
| ·M 基因 | 第14-15页 |
| ·非结构域 | 第15-16页 |
| ·N 基因研究进展 | 第16-23页 |
| ·N 基因遗传变异研究 | 第16-17页 |
| ·N 蛋白的结构特征 | 第17-18页 |
| ·N 蛋白的生物学功能 | 第18-20页 |
| ·N 蛋白的免疫学特性研究 | 第20-21页 |
| ·N 蛋白与IBV 基因工程疫苗 | 第21-22页 |
| ·N 蛋白在血清抗体水平监测中的应用 | 第22页 |
| ·N 蛋白单克隆抗体研究 | 第22-23页 |
| ·结语 | 第23-24页 |
| 第二章 鸡传染性支气管炎病毒陕西分离株N 基因的克隆及分子遗传变异分析 | 第24-42页 |
| ·材料 | 第24-26页 |
| ·毒株 | 第24-25页 |
| ·载体及菌种 | 第25页 |
| ·试剂及溶液配制 | 第25-26页 |
| ·主要仪器 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-30页 |
| ·IBV 各分离毒株的引物设计 | 第26页 |
| ·病毒增殖 | 第26页 |
| ·病毒总RNA 提取 | 第26-27页 |
| ·分离株 N 基因 RT-PCR | 第27页 |
| ·RT-PCR 产物的纯化回收 | 第27页 |
| ·RT-PCR 产物与T 载体连接 | 第27-28页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第28页 |
| ·转化 | 第28页 |
| ·重组质粒的提取 | 第28-29页 |
| ·IBV 分离株N 基因重组质粒的鉴定 | 第29页 |
| ·各分离株N 基因序列测定与测定结果的鉴定 | 第29页 |
| ·IBV 分离株N 基因核苷酸序列及推导氨基酸序列分析 | 第29页 |
| ·IBV 分离株N 基因系统发生进化关系分析 | 第29-30页 |
| ·结果 | 第30-39页 |
| ·各毒株N 基因扩增结果 | 第30页 |
| ·N 基因克隆筛选的限制性酶切鉴定结果 | 第30-31页 |
| ·各毒株N 基因序列测定结果 | 第31-36页 |
| ·参考毒株在GenBank 中的登录号 | 第36页 |
| ·各毒株N 基因与参考毒株核苷酸序列及氨基酸推导序列同源性比对 | 第36-37页 |
| ·IBV 分离株的N 蛋白氨基酸变异特征分析 | 第37-38页 |
| ·IBV 分离株的N 基因系统发生进化关系分析 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39-40页 |
| ·小结 | 第40-42页 |
| 第三章 鸡肾型传染性支气管炎病毒W118 株主要结构基因的分子遗传特征 | 第42-51页 |
| ·材料与方法 | 第42-44页 |
| ·毒株 | 第42页 |
| ·载体及菌种 | 第42页 |
| ·试剂 | 第42页 |
| ·引物设计 | 第42-43页 |
| ·病毒RNA 提取及RT-PCR | 第43页 |
| ·IBV W118 株S1、M 和N 基因克隆与鉴定 | 第43页 |
| ·IBV W118 株S1、M 和N 基因序列测定 | 第43页 |
| ·S1、M 和N 基因推倒氨基酸序列分析 | 第43页 |
| ·S1、M 和N 基因与参考毒株序列比较及系统发生进化关系分析 | 第43-44页 |
| ·结果 | 第44-48页 |
| ·IBV W118 株S1、M 和N 基因的扩增、克隆及鉴定 | 第44页 |
| ·IBV W118 株S1、M 和N 基因的核苷酸序列测定 | 第44页 |
| ·W118 株S1、M 和N 基因的分子特征及与参考毒株的比较分析 | 第44-46页 |
| ·IBV W118 株与参考毒株S1 基因的同源性比较与进化树分析 | 第46-47页 |
| ·IBV W118 株与参考毒株M 基因的同源性比较与系统进化分析 | 第47页 |
| ·IBV W118 株与参考毒株N 基因的同源性比较与进化树分析 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| ·W118 株S1、M 和N 基因变异特点 | 第48-49页 |
| ·W118 株与其它参考毒株的可能关系、可能来源及研究意义 | 第49页 |
| ·小结 | 第49-51页 |
| 第四章 传染性支气管炎病毒W118 株N 蛋白在大肠杆菌中的表达及其结构预测分析 | 第51-59页 |
| ·材料与方法 | 第51-54页 |
| ·菌株和质粒 | 第51页 |
| ·酶与试剂 | 第51-52页 |
| ·阳性血清及酶标抗体 | 第52页 |
| ·W118 株N 蛋白二级结构预测和抗原表位分析 | 第52页 |
| ·引物的设计与合成 | 第52页 |
| ·N 基因的扩增与pMD18-T 载体连接 | 第52页 |
| ·原核重组表达载体的构建与鉴定 | 第52页 |
| ·N 蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第52-53页 |
| ·表达蛋白的鉴定 | 第53-54页 |
| ·结果 | 第54-57页 |
| ·W118 株N 蛋白二级结构和抗原表位 | 第54-55页 |
| ·重组原核表达载体N-pET32a 的酶切鉴定 | 第55-56页 |
| ·重组原核表达载体序列测定 | 第56页 |
| ·表达蛋白的SDS-PAGE 检测 | 第56页 |
| ·表达蛋白的Western-blot 检测 | 第56-57页 |
| ·讨论 | 第57-58页 |
| ·小结 | 第58-59页 |
| 第五章 鸡传染性支气管炎病毒W118株N基因自杀性DNA免疫质粒的构建 | 第59-77页 |
| ·材料与方法 | 第59-60页 |
| ·质粒及菌株 | 第59页 |
| ·酶与试剂 | 第59-60页 |
| ·引物的设计与合成 | 第60页 |
| ·N 基因的扩增与pMD18-T 载体连接 | 第60页 |
| ·N 基因DNA 免疫质粒的构建 | 第60页 |
| ·N 基因DNA 免疫质粒序列测定 | 第60页 |
| ·结果 | 第60-61页 |
| ·N 基因的扩增 | 第60-61页 |
| ·N 基因重组质粒的酶切鉴定 | 第61页 |
| ·N 基因DNA 免疫质粒的酶切鉴定 | 第61页 |
| ·N 基因DNA 免疫质粒的测序鉴定 | 第61页 |
| ·讨论 | 第61-62页 |
| ·小结 | 第62-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 作者简介 | 第78页 |
