中文摘要 | 第1-16页 |
英文摘要 | 第16-19页 |
缩写表 | 第19-21页 |
第一章 引言 | 第21-41页 |
1 转录因子及其在植物抗逆反应中的作用 | 第21-28页 |
·植物逆境应答中的转录因子 | 第22-26页 |
·AP2/EREBP 转录因子家族 | 第22-23页 |
·DREB 亚家族转录因子 | 第23-26页 |
·转录因子与植物抗逆途径 | 第26-28页 |
2 木质素生物合成途径及分子调控机制 | 第28-37页 |
·木质素的组成与分布 | 第29-30页 |
·木质素的组成 | 第29页 |
·木质素的分布 | 第29-30页 |
·木质素单体的生物合成机制 | 第30-34页 |
·起始反应 | 第30-31页 |
·羟基化反应 | 第31-32页 |
·甲基化反应 | 第32页 |
·连接反应 | 第32-33页 |
·还原反应 | 第33页 |
·木质素单体的聚合 | 第33-34页 |
·木质素单体生物合成的多样性 | 第34页 |
·木质素生物合成的分子调控 | 第34-37页 |
·起始反应的生物调控 | 第34-35页 |
·羟基化反应的生物调控 | 第35页 |
·甲基化反应的生物调控 | 第35-36页 |
·连接反应的生物调控 | 第36页 |
·还原反应的生物调控 | 第36-37页 |
3 构树分子改良的重要意义 | 第37-41页 |
·构树生物学特性 | 第37-38页 |
·构树的用途 | 第38-39页 |
·环境适应性强 | 第38-39页 |
·纤维品质优良 | 第39页 |
·构树应用中存在的问题及分子改良的重要意义 | 第39-41页 |
第二章 构树中编码 DREB 转录因子基因的克隆及特性分析 | 第41-67页 |
1 材料和方法 | 第41-55页 |
·材料 | 第41-43页 |
·植物材料培养及胁迫处理 | 第41-42页 |
·菌株 | 第42页 |
·克隆载体 | 第42页 |
·酶与试剂 | 第42页 |
·溶液 | 第42-43页 |
·培养基类 | 第43页 |
·主要仪器 | 第43页 |
·方法 | 第43-55页 |
·构树DREB基因3′端cDNA的克隆 | 第43-49页 |
·构树DREB基因5′cDNA 的克隆 | 第49-51页 |
·构树BpDREB 基因全长的克隆及生物信息学分析 | 第51页 |
·构树BpDREB 基因的组织特异性表达模式分析 | 第51-52页 |
·Southern 杂交检测构树BpDREB 的同源基因 | 第52-54页 |
·Northern 杂交分析BpDREB 基因在逆境胁迫下的表达模式 | 第54-55页 |
2 结果与分析 | 第55-64页 |
·构树DREB 转录因子基因的全长cDNA 的克隆 | 第55-57页 |
·BpDREB 基因3′端序列的克隆 | 第55页 |
·BpDREB 基因5′端序列的克隆 | 第55-56页 |
·BpDREB 基因的全长cDNA 的克隆 | 第56-57页 |
·构树BpDREB 基因的生物信息学分析 | 第57-61页 |
·BpDREB 基因的序列特征分析及编码蛋白的结构功能预测 | 第57-58页 |
·BpDREB 蛋白的空间结构预测 | 第58页 |
·BpDREB 蛋白与其它 DREB 类蛋白的同源性比对和系统进化树分析 | 第58-61页 |
·构树BpDREB 基因的基因组DNA 的结构分析 | 第61-62页 |
·构树BpDREB 基因的拷贝数分析 | 第62页 |
·构树BpDREB 基因的组织特异性表达分析 | 第62-63页 |
·构树BpDREB 基因在不同胁迫条件下的表达模式分析 | 第63-64页 |
3 讨论 | 第64-67页 |
第三章 构树 DREB 转录因子 DNA 结合域与转录激活域的验证 | 第67-82页 |
1 前言 | 第67-68页 |
2 材料和方法 | 第68-73页 |
·菌株与质粒 | 第68-69页 |
·酵母培养基 | 第69-70页 |
·酵母单杂交系统中使用的溶液及缓冲液 | 第70-71页 |
·酵母单杂交 | 第71-73页 |
·其他的试验方法 | 第73页 |
3 结果与分析 | 第73-80页 |
·构建能在酵母中表达的pAD-BpDREB 和pLexA BD-BpDREB 两个重组载体 | 第73-77页 |
·重组质粒pAD-BpDREB 构建 | 第73-75页 |
·重组质粒pLexA BD-BpDREB 构建 | 第75-77页 |
·构树 BpDREB蛋白与DRE元件相互作用的研究 | 第77页 |
·构树 BpDREB蛋白的转录激活能力的研究 | 第77-80页 |
4 讨论 | 第80-82页 |
第四章 构树 BpDREB 基因在拟南芥中的异源表达及其耐逆性分析. | 第82-99页 |
1 前言 | 第82-83页 |
2 材料和方法 | 第83-88页 |
·材料 | 第83页 |
·植物材料 | 第83页 |
·菌株及载体 | 第83页 |
·试验中所用试剂盒与药品 | 第83页 |
·方法 | 第83-88页 |
·各种酶切、连接反应和大肠杆菌感受态细胞的制备及转化过程 | 第83页 |
·农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第83-84页 |
·拟南芥的转化 | 第84-85页 |
·转基因拟南芥的筛选 | 第85页 |
·转基因拟南芥的PCR 检测 | 第85-86页 |
·转基因拟南芥的GUS 染色检测 | 第86-87页 |
·转基因拟南芥的耐盐性分析 | 第87页 |
·转基因拟南芥的耐冻性分析 | 第87页 |
·转基因拟南芥的ABA 依赖性分析 | 第87-88页 |
·转基因拟南芥叶片的叶绿素含量测定 | 第88页 |
3 结果与分析 | 第88-97页 |
·表达载体p3301-121-BpDREB的构建 | 第88-91页 |
·含表达载体p3301-121-BpDREB农杆菌的检测 | 第91页 |
·转基因拟南芥的获得与检测 | 第91-94页 |
·转基因拟南芥的获得 | 第91-92页 |
·转基因拟南芥T1代植株PCR检测与Gus检测 | 第92-93页 |
·转基因拟南芥T2代植株RT-PCR 检测 | 第93-94页 |
·转基因拟南芥 T3代植株抗逆性分析 | 第94-97页 |
·转基因拟南芥T3代植株耐盐性分析 | 第94-95页 |
·转基因拟南芥T3代植株耐冻性分析 | 第95-96页 |
·转基因拟南芥T3代植株对ABA的敏感性分析 | 第96-97页 |
4 讨论 | 第97-99页 |
第五章 构树 CCoAOMT 基因的克隆及特性分析 | 第99-115页 |
1 前言 | 第99-100页 |
2 材料和方法 | 第100-103页 |
·材料 | 第100页 |
·植物材料 | 第100页 |
·菌株及载体 | 第100页 |
·方法 | 第100-103页 |
·构树中编码CCoAOMT 基因的克隆 | 第100-101页 |
·各种CCoAOMT 的氨基酸序列比对与系统进化树构 | 第101页 |
·构树BpCCoAOMT 基因编码蛋白的功能结构位点分析 | 第101页 |
·构树BpCCoAOMT 基因编码蛋白的同源建模 | 第101-102页 |
·uthern 杂交分析构树BpCCoAOMT 基因的拷贝 | 第102页 |
·构树BpCCoAOMT 基因的组织特异性表达模式分析 | 第102-103页 |
3 结果与分析 | 第103-113页 |
·构树BpCCoAOMT基因的全长cDNA克隆 | 第103-104页 |
·pCCoAOMT 基因3′端序列的克隆 | 第103页 |
·pCCoAOMT 基因5′端序列的克隆 | 第103页 |
·pCCoAOMT 基因全长cDNA 的克隆 | 第103-104页 |
·构树BpCCoAOMT 基因的结构特征分析 | 第104-107页 |
·构树CCoAOMT 蛋白的氨基酸序列比对和系统进化树分析 | 第107-109页 |
·构树CCoAOMT 蛋白的功能结构位点与功能结构域的预测 | 第109-110页 |
·构树CCoAOMT 蛋白的空间结构分析 | 第110-111页 |
·构树BpCCoAOMT 基因的组织特异性表达分析 | 第111-112页 |
·构树BpCCoAOMT 基因的拷贝数分析 | 第112-113页 |
4 讨论 | 第113-115页 |
第六章 构树 F5H 基因的克隆及特性分析 | 第115-129页 |
1 前言 | 第115-116页 |
2 材料和方法 | 第116-119页 |
·材料 | 第116页 |
·植物材料的培养 | 第116页 |
·菌株、载体和试剂 | 第116页 |
·方法 | 第116-119页 |
·构树F5H基因的克隆 | 第116-117页 |
·构树F5H蛋白的氨基酸序列比对与系统进化树构建 | 第117页 |
·构树 BpF5H 基因编码蛋白的功能结构位点分析及功能结构域的预测 | 第117-118页 |
·构树BpF5H基因编码蛋白的三级结构预测 | 第118页 |
·Southern 杂交检测构树BpF5H 基因的拷贝数 | 第118-119页 |
·BpF5H基因的组织特异性表达模式分析 | 第119页 |
3 结果与分析 | 第119-127页 |
·构树 BpF5H 基因全长cDNA 的克隆 | 第119-120页 |
·BpF5H 基因3′端序列的克隆 | 第119页 |
·BpF5H 基因5′端序列的克隆 | 第119-120页 |
·BpF5H 基因的全长cDNA 的克隆 | 第120页 |
·构树BpF5H基因的结构特征分析 | 第120-122页 |
·构树BpF5H基因的系统进化树分析和氨基酸序列比对 | 第122-124页 |
·构树 F5H 蛋白的功能结构域的预测与功能结构位点的分析 | 第124-125页 |
·构树F5H蛋白的三级空间结构 | 第125-126页 |
·构树BpF5H基因的拷贝数分析 | 第126页 |
·构树BpF5H基因的组织特异性表达分析 | 第126-127页 |
4 讨论 | 第127-129页 |
第七章 杂交构树离体培养再生体系的建立 | 第129-137页 |
1 前言 | 第129-130页 |
2 材料和方法 | 第130-132页 |
·材料 | 第130-131页 |
·植物材料 | 第130页 |
·主要试剂 | 第130-131页 |
·方法 | 第131-132页 |
·愈伤组织的获得 | 第131页 |
·不定芽的形成 | 第131页 |
·不定芽伸长、生根和移栽 | 第131-132页 |
·数据分析 | 第132页 |
3 结果与分析 | 第132-136页 |
·不同2,4-D的浓度对愈伤组织形成的影响 | 第132页 |
·两种培养基对三种外植体愈伤组织形成的影响 | 第132-133页 |
·不同BA 的浓度对不定芽形成的影响 | 第133-134页 |
·不定芽的生根和移栽 | 第134-136页 |
4 讨论 | 第136-137页 |
结论与创新点 | 第137-139页 |
参考文献 | 第139-153页 |
致谢 | 第153-154页 |
个人简历、博士期间发表的学术论文与专利申请 | 第154页 |