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猪脂肪细胞分化、脂肪沉积相关候选基因的分离、定位及遗传效应分析

摘要第1-14页
Abstract第14-18页
资源家系测定性状的英文缩写第18-20页
第一章 文献综述第20-40页
 1 引言第20页
 2 脂肪细胞分化相关基因研究进展第20-27页
   ·脂肪细胞分化相关转录因子PPARs基因家族第21-24页
   ·脂肪细胞分化相关转录因子ADD1基因第24-26页
   ·脂肪细胞分化相关转录因子AEBP1基因第26-27页
 3 脂肪沉积相关基因研究进展第27-32页
   ·脂肪沉积相关基因MC4R和MC5R第28-31页
   ·脂肪沉积相关基因IGF2第31-32页
 4 糖原合成与代谢相关基因PRKAG3研究进展第32-34页
 5 猪新基因的分离方法第34-36页
 6 基因定位的方法与研究现状第36-38页
 7 mRNA选择性剪接第38页
 8 本研究的目的和意义第38-40页
第二章 猪脂肪细胞分化相关基因AEBP1的分离、定位、转录本鉴定和组织表达谱研究第40-72页
 1 引言第40页
 2 试验材料第40-43页
   ·试验样品第40-41页
     ·猪组织样品第40-41页
     ·猪血液样品第41页
     ·基因定位所用的猪辐射杂种克隆板(IMpRH)第41页
   ·主要仪器和设备第41页
   ·主要药品及试剂第41-42页
   ·缓冲液及常用试剂的配制第42页
   ·主要生物学软件第42-43页
 3 试验方法第43-53页
   ·猪AEBP1基因cDNA的分离第43-48页
     ·猪组织RNA的提取和cDNA第一链的合成第43-44页
     ·依据电子克隆策略设计引物第44-45页
     ·RT-PCR方法扩增cDNA第45-46页
     ·PCR产物回收、克隆、测序和生物信息学分析第46-48页
   ·猪AEBP1基因组DNA的分离第48-50页
     ·猪血液基因组DNA的提取、浓度测定及质量检测第48-49页
     ·根据猪AEBP1基因的cDNA序列设计引物第49页
     ·猪AEBP1基因内含子的PCR扩增第49-50页
     ·PCR产物回收、克隆、测序和生物信息学分析第50页
   ·猪AEBP1和PNPLA2基因染色体精细定位第50-51页
     ·猪AEBP1基因定位所用引物第50页
     ·猪PNPLA2基因定位所用引物第50页
     ·PCR扩增分型第50-51页
     ·数据分析第51页
   ·猪AEBP1/MCLP转录本的鉴定第51页
     ·引物设计第51页
     ·RT-PCR方法鉴定AEBP1/ACLP转录本第51页
   ·猪AEBP1/ACLP转录本推导的蛋白质基本特征分析第51-52页
   ·猪AEBP1/ACLP转录本转录水平组织表达谱分析第52-53页
     ·RT-PCR反应第52页
     ·猪AEBP1/ACLP转录本RT-PCR反应产物的检测第52-53页
 4 结果与分析第53-66页
   ·猪AEBP1基因cDNA的分离结果第53-54页
     ·猪组织总RNA的提取第53页
     ·猪AEBP1基因各引物的RT-PCR扩增及测序第53页
     ·猪AEBP1基因cDNA序列的生物信息学分析第53-54页
   ·猪AEBP1基因组DNA的分离结果第54-58页
     ·猪AEBP1基因DNA片段扩增结果第54-55页
     ·猪AEBP1基因DNA序列生物信息学分析第55-58页
   ·猪AEBP1和PNPLA2基因的染色体精细定位第58-59页
   ·猪AEBP1/ACLP转录本鉴定结果第59页
   ·猪AEBP1/ACLP转录本推导的蛋白质基本特征分析第59-65页
   ·猪AEBP1/ACLP转录本转录水平组织表达谱第65-66页
 5 讨论第66-72页
   ·分离猪AEBP1基因cDNA序列的策略第66-67页
   ·猪AEBP1基因SNPs在基因组的分布第67-68页
   ·猪AEBP1基因的定位第68-69页
   ·猪AEBP1/ACLP转录本的鉴定第69-71页
   ·猪AEBP1/ACLP转录本的表达差异第71-72页
第三章 猪脂肪细胞分化相关基因AEBP1,PPARγ和ADD1的SNPs及性状关联分析第72-85页
 1 引言第72页
 2 试验材料第72-73页
   ·试验猪群体和性状测定第72-73页
   ·主要仪器设备及试剂第73页
   ·PCR扩增引物第73页
   ·主要生物学软件第73页
 3 试验方法第73-75页
   ·猪AEBP1、PPARγ和ADD1基因PCR扩增和序列分析第73-74页
     ·PCR扩增第73页
     ·PCR产物电泳检测第73页
     ·猪ADD1基因序列分析第73-74页
   ·猪AEBP1和PPARγ基因PCR-RFLP分析第74页
   ·统计分析第74-75页
 4 结果与分析第75-83页
   ·猪AEBP1、PPARγ和ADD1基因PCR扩增结果第75-76页
   ·猪ADD1基因的序列分析第76页
   ·猪AEBP1和PPARγ基因PCR-RFLP结果第76-77页
   ·猪AEBP1、PPARγ基因型频率及性状关联分析第77-83页
     ·猪AEBP1基因的基因型频率及性状关联分析第77-80页
     ·猪PPARγ基因型频率及性状关联分析第80-83页
 5 讨论第83-85页
   ·内含子SNPs的生物学效应第83页
   ·猪AEBP1和PPARγ基因在不同群体中基因型频率分布第83页
   ·猪AEBP1和PPARγ基因遗传效应分析第83-84页
   ·猪ADD1基因的SNPs第84-85页
第四章 猪脂肪沉积候选基因MC4R、MC5R和IGF2的性状关联分析第85-99页
 1 引言第85页
 2 试验材料第85-86页
   ·试验猪群体和性状测定第85-86页
   ·主要药品及试剂第86页
   ·PCR扩增引物第86页
   ·主要生物学软件第86页
 3 试验方法第86-87页
   ·猪MC4R、MC5R和IGF2基因PCR扩增及检测第86页
     ·PCR扩增第86页
     ·PCR产物的电泳检测第86页
   ·猪MC4R、MC5R和IGF2基因PCR-RFLP分析第86-87页
   ·统计分析第87页
 4 结果与分析第87-94页
   ·猪MC4R、MC5R和IGF2基因PCR扩增结果第87-88页
   ·猪MC4R、MC5R和IGF2基因PCR-RFLP结果第88-90页
   ·猪MC4R、MC5R和IGF2基因型频率及性状关联分析第90-94页
     ·猪MC5R基因型频率及性状关联分析第90-93页
     ·猪MC4R基因型频率及性状关联分析第93页
     ·猪IGF2基因型频率及性状关联分析第93-94页
 5 讨论第94-99页
   ·猪MC4R、MC5R和IGF2基因在不同群体中基因型频率分布第94-96页
   ·候选基因的遗传效应分析第96-99页
第五章 糖原代谢相关基因PRKAG3的性状关联分析第99-108页
 1 引言第99页
 2 试验材料第99-100页
   ·试验猪群体和性状测定第99页
   ·主要药品及试剂第99页
   ·PCR扩增引物第99页
   ·主要生物学软件第99-100页
 3 试验方法第100页
   ·猪PRKAG3基因扩增及检测第100页
     ·PCR扩增第100页
     ·PCR产物的电泳检测第100页
   ·猪PRKAG3基因PCR-RFLP分析第100页
   ·统计分析第100页
 4 结果与分析第100-104页
   ·猪PRKAG3基因PCR扩增结果第100-101页
   ·猪PRKAG3基因PCR-RFLP结果第101-102页
   ·猪PRKAG3基因型频率及性状关联分析第102-104页
     ·I199V和G52S位点基因型频率分布第102-103页
     ·199V和G52S位点基因型与猪肌内脂肪含量的关联分析第103页
     ·I199V和G52S位点基因型与pH值的关联分析第103-104页
     ·I199V和G52S位点基因型与失水率等性状的关联分析第104页
 5 讨论第104-108页
   ·猪PRKAG3基因在不同群体中基因型频率分布第104-107页
   ·猪PRKAG3基因遗传效应分析第107-108页
小结第108-111页
下一步工作第111-112页
参考文献第112-126页
在读期间发表论文题录第126-127页
附录第127-159页
致谢第159页

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