农杆菌介导三价融合基因(Rirol)转化八棱海棠的研究
| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-32页 |
| 1 农杆菌介导的植物多基因遗传转化研究进展 | 第13-20页 |
| ·植物多基因遗传转化的方法 | 第13-16页 |
| ·多次转化 | 第13页 |
| ·转基因植物杂交 | 第13-14页 |
| ·共转化(co-transformation) | 第14-16页 |
| ·影响农杆菌介导的植物多基因遗传转化的因素 | 第16-17页 |
| ·载体的数目 | 第16-17页 |
| ·目的基因数目与大小 | 第17页 |
| ·不同菌株的组合及不同浓度的配比 | 第17页 |
| ·农杆菌介导多基因遗传转化的外源基因的整合 | 第17页 |
| ·农杆菌介导多基因遗传转化的外源基因的表达及遗传 | 第17-18页 |
| ·农杆菌多基因遗传转化的存在的问题与展望 | 第18-19页 |
| ·表达载体容量的问题 | 第18页 |
| ·外源基因在植物体内的沉默问题 | 第18页 |
| ·转化效率较低 | 第18页 |
| ·外源基因表达量不高 | 第18-19页 |
| ·果树多基因遗传转化 | 第19-20页 |
| 2 Rirol基因 | 第20-29页 |
| ·DREB1转录因子及其在植物抗逆中的作用 | 第20-24页 |
| ·DREB转录因子的结构及作用机理 | 第20-22页 |
| ·DREB1转录因子的表达 | 第22页 |
| ·DREB1转录因子在提高植物抗逆性中的作用 | 第22-24页 |
| ·DREB转录因子在植物遗传转化中的应用与展望 | 第24页 |
| ·rolC基因及其在植物转基因上的应用 | 第24-26页 |
| ·Ri质粒与rol基因 | 第24-25页 |
| ·rol基因在植物转基因上的应用 | 第25-26页 |
| ·铁载体蛋白基因 | 第26-29页 |
| ·IRT1基因的生理功能 | 第27-29页 |
| ·IRT1基因在植物转基因上的应用 | 第29页 |
| 3 苹果矮化抗性砧木培育研究 | 第29-30页 |
| ·矮化资源的开发利用 | 第29-30页 |
| ·苹果属种间或品种间杂交 | 第30页 |
| ·异属嫁接 | 第30页 |
| ·转基因育种 | 第30页 |
| 4 展望 | 第30-32页 |
| 第二章 农杆菌介导的八棱海棠遗传转化系统的优化 | 第32-46页 |
| 1 材料与方法 | 第32-40页 |
| ·材料 | 第32-38页 |
| ·植物材料 | 第32页 |
| ·菌株和质粒 | 第32-37页 |
| ·供试菌株和质粒 | 第32-37页 |
| ·菌株的保存 | 第37页 |
| ·细菌培养基与培养液 | 第37-38页 |
| ·GUS染色液配方 | 第38页 |
| ·所用培养基 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-40页 |
| ·农杆菌的培养、活化 | 第38-39页 |
| ·根癌农杆菌对外植体的侵染与共培养 | 第39页 |
| ·卡那霉素选择压的确定 | 第39页 |
| ·农杆菌菌株类型对遗传转化效率的影响 | 第39页 |
| ·卡那霉素加入时间对遗传转化效率的影响 | 第39页 |
| ·vir基因诱导因子对遗传转化效率的影响 | 第39-40页 |
| ·白化处理对遗传转化效率的影响 | 第40页 |
| ·悬浮液的pH值对遗传转化效率的影响 | 第40页 |
| 2 结果与分析 | 第40-46页 |
| ·卡那霉素选择压的确定 | 第40-41页 |
| ·农杆菌菌株类型对八棱海棠遗传转化效率的影响 | 第41页 |
| ·Km加入时间对遗传转化效率的影响 | 第41-42页 |
| ·vir基因诱导因子对遗传转移效率的影响 | 第42-43页 |
| ·白化处理对八棱海棠遗传转化效率的影响 | 第43页 |
| ·悬浮液pH值对遗传转化效率的影响 | 第43-46页 |
| 第三章 转Rirol基因八棱海棠植株的检测 | 第46-60页 |
| 1 材料与方法 | 第46-54页 |
| ·材料 | 第46-49页 |
| ·植物材料 | 第46页 |
| ·试剂 | 第46页 |
| ·溶液配制 | 第46-49页 |
| ·方法 | 第49-54页 |
| ·转基因八棱海棠植株的GUS染色鉴定 | 第49页 |
| ·转基因八棱海棠植株的PCR扩增检测 | 第49-50页 |
| ·转基因八棱海棠植株的Southern杂交检测 | 第50-53页 |
| ·转基因八棱海棠植株的RT-PCR检测 | 第53-54页 |
| ·转基因植株的抗盐性测定 | 第54页 |
| 2 结果与分析 | 第54-60页 |
| ·转基因八棱海棠植株的GUS组织化学染色检测 | 第54-55页 |
| ·转基因八棱海棠植株的PCR检测 | 第55-56页 |
| ·转基因八棱海棠植株的Southern杂交检测 | 第56-57页 |
| ·转基因八棱海棠植株的RT-PCR检测 | 第57-58页 |
| ·NaCl浓度对不同转基因株系生长的影响 | 第58-60页 |
| 全文结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-73页 |
| 图版 | 第73-75页 |
| 致谢 | 第75页 |