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农杆菌介导三价融合基因(Rirol)转化八棱海棠的研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-13页
第一章 文献综述第13-32页
 1 农杆菌介导的植物多基因遗传转化研究进展第13-20页
   ·植物多基因遗传转化的方法第13-16页
     ·多次转化第13页
     ·转基因植物杂交第13-14页
     ·共转化(co-transformation)第14-16页
   ·影响农杆菌介导的植物多基因遗传转化的因素第16-17页
     ·载体的数目第16-17页
     ·目的基因数目与大小第17页
     ·不同菌株的组合及不同浓度的配比第17页
   ·农杆菌介导多基因遗传转化的外源基因的整合第17页
   ·农杆菌介导多基因遗传转化的外源基因的表达及遗传第17-18页
   ·农杆菌多基因遗传转化的存在的问题与展望第18-19页
     ·表达载体容量的问题第18页
     ·外源基因在植物体内的沉默问题第18页
     ·转化效率较低第18页
     ·外源基因表达量不高第18-19页
   ·果树多基因遗传转化第19-20页
 2 Rirol基因第20-29页
   ·DREB1转录因子及其在植物抗逆中的作用第20-24页
     ·DREB转录因子的结构及作用机理第20-22页
     ·DREB1转录因子的表达第22页
     ·DREB1转录因子在提高植物抗逆性中的作用第22-24页
     ·DREB转录因子在植物遗传转化中的应用与展望第24页
   ·rolC基因及其在植物转基因上的应用第24-26页
     ·Ri质粒与rol基因第24-25页
     ·rol基因在植物转基因上的应用第25-26页
   ·铁载体蛋白基因第26-29页
     ·IRT1基因的生理功能第27-29页
     ·IRT1基因在植物转基因上的应用第29页
 3 苹果矮化抗性砧木培育研究第29-30页
   ·矮化资源的开发利用第29-30页
   ·苹果属种间或品种间杂交第30页
   ·异属嫁接第30页
   ·转基因育种第30页
 4 展望第30-32页
第二章 农杆菌介导的八棱海棠遗传转化系统的优化第32-46页
 1 材料与方法第32-40页
   ·材料第32-38页
     ·植物材料第32页
     ·菌株和质粒第32-37页
       ·供试菌株和质粒第32-37页
       ·菌株的保存第37页
     ·细菌培养基与培养液第37-38页
     ·GUS染色液配方第38页
     ·所用培养基第38页
   ·方法第38-40页
     ·农杆菌的培养、活化第38-39页
     ·根癌农杆菌对外植体的侵染与共培养第39页
     ·卡那霉素选择压的确定第39页
     ·农杆菌菌株类型对遗传转化效率的影响第39页
     ·卡那霉素加入时间对遗传转化效率的影响第39页
     ·vir基因诱导因子对遗传转化效率的影响第39-40页
     ·白化处理对遗传转化效率的影响第40页
     ·悬浮液的pH值对遗传转化效率的影响第40页
 2 结果与分析第40-46页
   ·卡那霉素选择压的确定第40-41页
   ·农杆菌菌株类型对八棱海棠遗传转化效率的影响第41页
   ·Km加入时间对遗传转化效率的影响第41-42页
   ·vir基因诱导因子对遗传转移效率的影响第42-43页
   ·白化处理对八棱海棠遗传转化效率的影响第43页
   ·悬浮液pH值对遗传转化效率的影响第43-46页
第三章 转Rirol基因八棱海棠植株的检测第46-60页
 1 材料与方法第46-54页
   ·材料第46-49页
     ·植物材料第46页
     ·试剂第46页
     ·溶液配制第46-49页
   ·方法第49-54页
     ·转基因八棱海棠植株的GUS染色鉴定第49页
     ·转基因八棱海棠植株的PCR扩增检测第49-50页
     ·转基因八棱海棠植株的Southern杂交检测第50-53页
     ·转基因八棱海棠植株的RT-PCR检测第53-54页
     ·转基因植株的抗盐性测定第54页
 2 结果与分析第54-60页
   ·转基因八棱海棠植株的GUS组织化学染色检测第54-55页
   ·转基因八棱海棠植株的PCR检测第55-56页
   ·转基因八棱海棠植株的Southern杂交检测第56-57页
   ·转基因八棱海棠植株的RT-PCR检测第57-58页
   ·NaCl浓度对不同转基因株系生长的影响第58-60页
全文结论第60-61页
参考文献第61-73页
图版第73-75页
致谢第75页

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